Pambuka
Apa ekstraksi asam nukleat?
Ing syarat-syarat sing paling gampang, ekstraksi asam nukle yaiku ngilangi RNA lan / utawa DNA saka conto lan kabeh keluwihan sing ora perlu. Proses ekstraksi ngisolasi asam nukleat saka conto lan ngasilake kanthi bentuk eluk sing klempakan, bebas saka diluents lan rereged sing bisa mengaruhi aplikasi hilir.
Aplikasi saka ekstraksi asam nukleat
Asam nuklir diresiki digunakake ing macem-macem aplikasi, wiwit macem-macem industri. HealthCare bisa uga wilayah sing digunakake, kanthi rna lan DNA sing dibutuhake kanggo macem-macem tujuan uji coba.
Aplikasi saka ekstraksi asam nukleat ing kesehatan kalebu:
- Amplifikasi PCR lan QPPCRIFIKASI
- Sabanjure urutan generasi (ngs)
- Genp SNP adhedhasar amplific
- Genotyping adhedhasar Array
- Nyimpen enzim Watesan
- nganalisa nggunakake enzim modifikasi (kayata ligation lan cloning)
Ana uga lapangan liyane sing ngluwihi kesehatan ing ngendi ekstraksi asam nukleik digunakake, kalebu nanging ora winates kanggo uji coba paternity, forensik lan genomik.
Riwayat ringkes kanggo ekstraksi asam nukleat
Extraction DNATanggal maneh kanthi cara sing paling dawa, kanthi pamisahan sing paling anyar sing wis ditindakake dening dokter Swiss sing jenenge Friedrich Miescher ing taun 1869. Miescher ngarep-arep bisa ngrampungake prinsip dhasar sel. Sawise gagal karo limfosit, dheweke bisa entuk endapan sing bisa diremehake saka leukosit sing ditemokake ing bandhane sing dibuwang. Dheweke nindakake iki kanthi nambah asam lan banjur alkali menyang sel kanggo ninggalake sitoplasma sel, banjur ngembangake protokol kanggo misahake DNA saka protein liyane.
Dipuntedahaken riset breaking lemah-Miescher, akeh ilmuwan liyane sing maju lan ngembangake teknik kanggo ngisolasi lan ngresiki DNA. Edwin Joseph Cohn, ilmuwan protein ngembangake pirang-pirang teknik kanggo dimurnekake protein sajrone WW2. Dheweke tanggung jawab kanggo ngisolasi bagéan album album saka plasma getih, sing penting njaga tekanan osmotik ing pembuluh getih. Iki penting kanggo njaga prajurit isih urip.
Ing taun 1953 Francis Krik, bebarengan karo Rosalind Franklin lan James Watson, nemtokake struktur DNA, nuduhake manawa digawe rong lembaran nukleat asam nukleat. Penemuan terobosan iki diluncurake kanthi cara meselson lan Stahl, sing bisa ngembangake protokol centrifugation kasedhiyan kanggo ngisolasi DNA saka bakteri E. kayata eksperimen 1958.
Teknik ekstraksi asam nukleat
Apa 4 tahap ekstraksi DNA?
Kabeh cara ekstraksi sing nggodhok menyang langkah dhasar sing padha.
Gangguan selWaca rangkeng-. Tahap iki, uga dikenal minangka lysis sel, kalebu tembok sel lan / utawa membran sel, kanthi ngeculake cairan intra-mRNA sing ngemot asam inti.
Mbusak lebu sing ora dikarepake. Iki kalebu lipid membran, protein lan asam nukleat liyane sing bisa ngganggu aplikasi hilir.
Isolasi. Ana pirang-pirang cara kanggo ngisolasi asam nukleat sing disenengi saka lyset sing wis digawe, sing tiba ing antarane rong kategori utama utawa solid (ndeleng bagean sabanjure).
Konsentrasi. Sawise asam nukleik wis diisolasi saka kabeh rereged lan pacaran liyane, dituduhake ing eluate sing konsentrasi banget.
Loro jinis ekstraksi
Ana rong jinis ekstraksi asam nukleat - metode adhedhasar solusi lan cara negara sing padhet. Cara adhedhasar solusi uga dikenal minangka cara ekstraksi kimia, amarga kalebu nggunakake bahan kimia kanggo ngilangi sel lan ngakses bahan nuklir. Iki bisa nggunakake senyawa organik kayata fenol lan kloroform, utawa ora mbebayani senyawa ora luwih disaranake kayata proteinase K utawa Silica gel.
Tuladha cara ekstraksi kimia sing beda kanggo ngilangi sel kalebu:
- tukang pecah osmotik saka membran
- Pencernaan tembok sel
- Solubilisasi membran
- karo cucuk
- Kanthi perawatan alkali
Teknik negara sing solid, uga dikenal minangka cara mekanik, kalebu ngeksploitasi carane DNA interaksi karo substrat sing padhet. Kanthi milih manik utawa molekul sing bakal ditarik DNA nanging analitis ora bakal, bisa misahake loro. Tuladha teknik ekstraksi Solid-Phase kalebu nggunakake manik silika lan magnet.
Ekstraksi manik magnet sing diterangno
Cara Ekstraksi Manik Magnetik
Potensial kanggo ekstraksi nggunakake manik magnetik pisanan sing diakoni ing paten AS kanthi diajukake Trevor Hawkins, kanggo institusi riset Panaliten Whitehead. Paten iki ngakoni manawa sampeyan bisa ngilangi materi genetik kanthi naleni menyang operator dhukungan sing kuat, sing bisa dadi manik magnet. Prinsip yaiku nggunakake manik-manik magnetik kanthi fungsional kanthi fungsi sing bakal ditarik, sing banjur bisa dipisahake saka supernatant kanthi ngetrapake kekuwatan ing njaba kapal kasebut.
Napa nggunakake ekstraksi manik magnetik?
Teknologi ekstraksi manik Magnetik dadi tambah akeh, amarga potensial kasebut bisa ditindakake kanthi cepet lan efisien prosedur ekstraksi. Ing jaman saiki, ana pembangunan manik-manik magnetik kanthi fungsional kanthi sistem buffer sing cocog, sing bisa nggawe automasi ekstraksi asam nukleat lan alur kerja sing duwe cahya sing akeh banget lan efisien. Uga, cara ekstraksi manik-manik Magnetik ora kalebu langkah centrifugation sing bisa nyebabake pasukan nyukur sing ngilangi DNA sing luwih dawa. Iki tegese DNA sing luwih suwe tetep utuh, sing penting ing tes genomik.
Wektu Pos: Nov-25-2022