ポリメラーゼ鎖反応（PCR）は、Life Science Laboratoriesで使用される広く知られている方法の1つです。
PCRプレートは、収集されたサンプルまたは結果の優れた処理と分析のために、ファーストクラスのプラスチックから生成されます。
それらは、正確な熱伝達を提供するために薄く均質な壁を持っています。
リアルタイムアプリケーションに備えて、DNAまたはRNAの微小セクションが隔離され、PCRプレートに保存されます。
PCRプレートは、熱密閉に非常に効率的であり、同様に熱の流れを制限しています。
ただし、PCRプレートは効果的かつ信頼できるように、サンプルを処理する際に簡単に誤りと不正確さです。
したがって、あなたが良質で高品質を得ることに興味があるならPCRプレート。信頼できるPCRプレートメーカーに連絡することが理想的です。これにより、あなたは最良の取引を得ることを保証します。
試薬やサンプルの汚染を避け、不正確さが結果に忍び寄るのを防ぐために、従うべきいくつかの予防策を以下に示します。
周囲を滅菌します
不純物の存在のために誤った陽性または否定が発生し、結果を疑うことができます。
不純物と汚染物質は、無関係なDNAや化学添加物などのさまざまな形で発生し、最終的に反応の効率と有効性を低下させます。
PCRプレートの汚染速度を大幅に減らす方法はたくさんあります。
滅菌されたフィルターのヒントを使用することは、ピペットを通して不純物がサンプルに忍び寄るのを防ぐためのもう1つの便利な方法です。
PCRの使用専用に、ピペットとラックで構成される完全にきれいな機器セットを捧げます。これにより、実験室の周りの不純物または汚染物質が無視できる移転が保証されます。
汚染物質を拭くために、ピペット、ラック、ベンチに漂白剤、エタノールを利用します。
すべてのPCR反応のために予約スペースを割り当てて、粒子の汚染をさらに最小限に抑えます。
すべてのステップできれいな手袋を使用して、それらを頻繁に交換します。
PCRプレート
テンプレートの濃度と純度を検査します。
PCRでサンプルを分析するときに使用されるベンチと機器の清潔さを維持する必要があります。分析と処理の前に、サンプルの純度の程度を検証することが不可欠です。
一般に、アナライザーはDNAサンプルの濃度と純度レベルを考慮します。
260NM/280NMの吸光度の比率は、1.8より少なくてはなりません。一方、230nmから320nmの間のその後の波長は、不純物を特定するために使用されます。
例では、カオトロピック塩およびその他の有機化合物は230nmの吸収速度で検出されます。 DNAサンプルの濁度も検出され、320nmの吸光度速度で検証されています。
PCRプレートを製品で過負荷にすることは避けてください
複数の製品を同時に実行することが望まれている限り、PCRプレートの相互汚染をもたらします。
PCRプレートを異なる製品の廃棄物で過負荷にすると、サンプルを確認することが非常に困難になります。
Aliquot PCR試薬の記録を保持します
連続凍結/解凍サイクルとアリコートの頻繁な使用は、再結晶を通じてPCR試薬、酵素、DNTPを損傷する可能性があります。
分析するサンプルを準備しながら使用するアリコートの速度を監視するために常に努力します。
好ましいリムは、在庫と試薬とサンプルの量を凍結または解凍する量を制御するのに適しています。
最適なアニーリング温度を選択してください。
アニーリング温度を選択して使用することは、PCRの結果にエラーが含まれるもう1つの方法です。
時には、反応が計画どおりに進まないことがあります。成功した反応を促進するために、アニーリング温度を下げることが望まれます。
ただし、温度を下げると、誤検知とプライマーダイマーの外観の可能性が高まります。
正しいアニーリング温度を選択する良い指標であるため、PCRプレートを使用する場合、融解曲線の分析を確認することが重要です。
プライマーデザインソフトウェアは、設計に役立ちます。正しいアニーリング温度の提供により、PCRプレートのエラーが直接減少します。
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投稿時間：10月30日 - 2021年