מָבוֹא
צלחות PCR, מצרך של המעבדה במשך שנים רבות, הופך להיות נפוץ עוד יותר במסגרת המודרנית ככל שהמעבדות מגדילות את תפוקתן ומפעילות יותר ויותר אוטומציה בתוך זרימות העבודה שלהן. השגת יעדים אלה תוך שמירה על הדיוק ושלמות הניסויים יכולה להיות קשה. אחד האזורים המשותפים שבהם שגיאות יכולות להתגנב הוא עם איטום שלצלחות PCR, בטכניקה לקויה המאפשרת אידוי של דגימות, שינוי ה- pH ולכן משבשת תפקודים אנזימטיים ומזמינה זיהום. ללמוד כיצד לאטום אצלחת PCRמבטל נכון את הסיכונים הללו ומבטיח תוצאות לשחזור.
מצא את החותם הנכון לצלחת ה- PCR שלך
כובעי צלחות לעומת חותמות קולנוע לעומת מכסים
כובעיםהם דרך טובה לאטום את הצלחת שלך עם חותם הדוק, תוך שהם עדיין נותנים לך את הגמישות להתנתק בקלות רבה ולקלט את הצלחת כפי שאתה צריך בלי שום בזבוז. עם זאת, ל- CAPS יש כמה חסרונות מרכזיים.
ראשית, תצטרך לקנות את הכובע הספציפי התואם, מה שהופך אותם לא למגוונים. יהיה עליכם לוודא שהכובע שתבחר מתאים לצלחת, התלויה ביצרן, ובחרו כיפוי או שטוח על סמך מחזיר התרמי בו אתם משתמשים.
שנית, החלת הכובעים על הצלחת יכולה להיות חוזרת ונשנית מאוד ומייגעת, בסיכון לזיהום צולב אם תשים את הכובע הלא נכון על הבאר הלא נכונה.
אמנם חותמות הקולנוע פחות גמישות מבחינת הסרה והחלפה, אך הם מאוד מגוונים מכיוון שהם יתאימו לכל סוג של צלחת PCR, ללא התחשבות מיהו היצרן. הם יכולים פשוט לחתוך לגודל, מה שהופך אותם ליעילים מאוד.
אפשרות נוספת היא מכסה צלחת. אלה מציעים פחות הגנה כי כובעים וחותמות, ומשמשים בעיקר רק לכיסוי לטווח קצר כדי למנוע זיהום.
חותמות סרטים אופטיים לעומת רדיד
בין אם אתה זקוק לחותם אופטי, ברור אוסרט נייר אלומיניוםכדי לאטום את הצלחת שלך מוחלט על ידי הפורמט הניסיוני שלך.סרטי איטום אופטייםשקופים כדי לאפשר לך לצפות בדגימות, תוך שהם עדיין מגנים עליהם ומניעת אידוי. הם מועילים במיוחד בניסויי QPCR הכוללים ביצוע מדידות מדויקות ביותר של פלואורסצנט ישירות מהצלחת, ובמקרה זה תזדקק לסרט איטום המסנן את הקרינה מעט ככל האפשר. חשוב לוודא שלאיטום או בכובע בו אתה משתמש יש רמה גבוהה מספיק של בהירות אופטית כדי להבטיח שהקריאות יהיו מדויקות.
סרטי נייר כסף מתאימים לכל דגימות רגישות לאור או שיש לאחסן אותה מתחת ל 80 מעלות צלזיוס. מסיבה זו, מרבית הדגימות המיועדות לאחסון לטווח הארוך ידרשו סרט נייר כסף. סרטי נייר כסף הם גם נוקבים, אשר מועילים לבחינת בארות בודדות, או להעברת דוגמאות על ידי מחטים. זה יכול להתרחש ידנית או כחלק מפלטפורמה רובוטית.
קחו בחשבון כי חומרים אגרסיביים הכוללים חומצות, בסיסים או ממסים ידרשו חותם שיכול לעמוד בהם, ובמקרה זה ככל הנראה חותם נייר כסף מתאים יותר.
דבק לעומת סרט איטום חום
חותמות סרט דבקהם מאוד ישירים קדימה וקלים. כל מה שאתה צריך זה שהמשתמש יחיל את החותם על הצלחת, ולהשתמש בכלי פשוט של המוליך כדי ללחוץ למטה וליצור חותם הדוק.
חותמות החום מתקדמות יותר, ומספקות חותם לאורך זמן שהפחית את שיעורי האידוי בהשוואה לחותם דבק קונבנציונאלי. אפשרות זו מתאימה אם אתם מחפשים לאחסן דגימות לטווח הארוך, אם כי זה בא דרישה נוספת לציוד איטום צלחות.
איך לאטום צלחת PCR
שיטת איטום צלחות
דבק עצמי
1. וודא שאתה עובד על משטח עבודה שטוח ויציב
2. הסר את הסרט מהאריזה שלו והסר את הגיבוי
3. הניחו בזהירות את החותם על הצלחת, תוך הקפדה על כל הבארות מכוסות
4. השתמש בכלי המוליך כדי למרוח לחץ על פני הצלחת. התחל מקצה אחד ועבד את דרכך לקצה, לחץ באופן שווה
5. חזור על כך פעמים רבות
6. הפעל את המוליך שלך סביב הבארות החיצוניות, כדי לוודא שאלו גם אטומים כראוי.
חותמות חום
חותמות חום פועלות על ידי היתוך הסרט לשפת כל באר, בעזרת איטום צלחת. להפעלת אוטם חום, עיין בהוראות המסופקות על ידי יצרן הציוד. וודא שהיצרן ממנו אתה מקור בציוד שלך הוא בעל מוניטין, מכיוון שחשוב מאוד שהחותם יהיה תקין, יעיל וערך מים.
טיפים לאיטום צלחת
א. בעת הפעלת לחץ על החותם, עבור לכיוונים אופקיים ואנכיים כאחד כדי להבטיח חותם מתאים
ב. זה תמיד תרגול טוב לנהל ריצת מבחן של כל מה שאתה עושה, וזה לא שונה עם איטום צלחות. בדוק עם צלחת ריקה לפני השימוש באחת עם דגימות.
ג. בבדיקה, הסר את החותם והסתכל לראות שהדבק דבק כראוי, ללא פערים. יש ייצוג חזותי של זה במסמך ההתייחסות הראשון. אם לא אטמת את הצלחת כראוי, כשאתה מסיר את החותם יהיו פערים שבהם הדבק לא עשה קשר מלא לצלחת.
ד. לצורך משלוח והובלת דגימות, ייתכן שתמצא שזה מועיל למרוח חותם פלסטי על גבי חותם נייר הכסף להגנה נוספת (במיוחד מפני פירסינג).
ה. תמיד וודא כי אין בליטות או קמטים בעת יישום הסרט - אלה יגרמו לדליפות ואידוי
זמן הודעה: נובמבר 23-2022