5 טיפים פשוטים למניעת שגיאות בעבודה עם לוחות PCR

תגובות שרשרת פולימראז (PCR) הן אחת השיטות הידועות בשימוש במעבדות למדעי החיים.

לוחות ה-PCR מיוצרים מפלסטיק מהשורה הראשונה לעיבוד וניתוח מעולים של דגימות או תוצאות שנאספו.

יש להם קירות דקים והומוגניים כדי לספק העברה תרמית מדויקת.

כהכנה ליישומים בזמן אמת, קטע דקות של DNA או RNA מבודדים ומאוחסנים בצלחות PCR.

לוחות ה-PCR יעילות ביותר באיטום בחום ומגבילות גם את זרימת החום.

עם זאת, ככל שצלחות ה-PCR הן יעילות ואמינות, שגיאות ואי דיוקים מתקלקלים בקלות בזמן עיבוד דגימות.

לכן, אם אתם מעוניינים לקבל איכות טובה ואיכותיתלוחות PCR.זה אידיאלי ליצור קשר עם יצרן לוחות PCR אמין. עם זה אתה מבטיח לקבל את העסקה הטובה ביותר.

הנה כמה אמצעי זהירות שיש לנקוט כדי למנוע זיהומים של ריאגנטים או דגימות ולמנוע אי דיוקים לזחול אל התוצאות.

עיקור הסביבה
חיובי או שליליים שגויים מתרחשים עקב נוכחותם של זיהומים, מה שגורם לך לפקפק בתוצאות.

זיהומים ומזהמים מתרחשים בצורות שונות כגון DNA לא קשור או תוספים כימיים אשר בסופו של דבר מפחיתים את היעילות והיעילות של התגובה.

ישנן דרכים רבות להפחית במידה ניכרת את קצב הזיהום של צלחת ה-PCR.

שימוש בקצות סינון מעוקרות הוא דרך שימושית נוספת למנוע זיהומים לזחול לתוך הדגימות שלך דרך הפיפטות.

הקדישו סט נקי לחלוטין של ציוד, הכולל פיפטות ומתלים, אך ורק לשימוש ב-PCR. זה יבטיח העברה זניחה של זיהומים או מזהמים ברחבי המעבדה.

השתמש באקונומיקה, אתנול על הפיפטות, מתלים וספסלים כדי לנגב מזהמים.

הקצו מקום שמור לכל תגובות ה-PCR שלכם כדי למזער עוד יותר את זיהום החלקיקים.

השתמש בכפפות נקיות בכל שלב והחלף אותן לעתים קרובות.

לוחות PCR
בדוק את הריכוז והטוהר של התבנית.
יש לשמור על ניקיון הספסל והציוד המשמשים בעת ניתוח דגימות עם ה-PCR. חיוני לאמת את מידת הטוהר של הדגימות לפני ניתוח ועיבוד.

בדרך כלל, מנתחים לוקחים בחשבון את הריכוז והטוהר של דגימות ה-DNA.

Endeavor יחס הספיגה עבור 260nm/280nm לא חייב להיות פחות מ-1.8. בעוד שאורך גל שלאחר מכן בין 230 ננומטר ל-320 ננומטר משמש לזיהוי זיהומים.

במקרה כזה, מלחים כאוטרופיים ותרכובות אורגניות אחרות מתגלים בקצב ספיגה של 230 ננומטר. בעוד שעכירות בדגימות DNA מזוהה ומאומתת גם בקצב ספיגה של 320 ננומטר.

הימנע מהעמסת יתר של לוחות PCR במוצר
ככל שרוצים להפעיל מספר מוצרים בו זמנית, זה גורם לזיהום צולב של לוחות ה-PCR.

העמסת יתר של לוחות ה-PCR בפסולת מוצרים שונים ומקשה מאוד על בירור הדגימות.

שמור תיעוד של ריאגנטים PCR של Aliquot
מחזורי הקפאה/הפשרה מתמשכים ושימוש תכוף במנה עלולים לפגוע בריאגנטים של PCR, אנזימים ו-DNTP באמצעות התגבשות מחדש.

השתדל תמיד לנטר את שיעור המנה המשמש בעת הכנת דגימות לניתוח.

LIMS עדיף יותר מתאים לשלוט במלאי וכמות הריאגנטים והדגימות שהוקפאו או הופשרו.

בחר את טמפרטורת החישול הטובה ביותר.
בחירה ושימוש בטמפרטורת חישול שגויה היא שיטה נוספת שתוצאות PCR מכילות שגיאה.

לפעמים, התגובה לא הולכת כמתוכנן. רצוי להפחית את טמפרטורת החישול על מנת להקל על תגובה מוצלחת.

עם זאת, הורדת הטמפרטורה מגדילה את הסיכויים לתוצאות חיוביות שגויות ולהופעת דימר פריימר.

חשוב לאשר את הניתוח של עקומת ההיתוך בעת שימוש בלוחות PCR מכיוון שהוא אינדיקטור טוב לבחירת טמפרטורת החישול הנכונה.

תוכנת תכנון פריימר מסייעת בתכנון, מתן טמפרטורת חישול נכונה עם מפחיתה ישירות את השגיאות בפלטות ה-PCR.

זקוק לצלחת PCR איכותית?
למקרה ששקלתם היכן למצוא יצרן אמין שללוחות PCR. אל תחפש יותר כי אתה במקום הנכון.

אָדִיבלחץ כאן כדי ליצור איתנו קשרלמוצרים ושירות באיכות גבוהה במחיר שלא ישבור את הכיס.


זמן פרסום: 30 באוקטובר 2021