Come sigillare una piastra PCR

Introduzione

Piastre PCR, un punto fermo del laboratorio per molti anni, stanno diventando ancora più diffusi nel contesto moderno poiché i laboratori aumentano la loro produttività e utilizzano sempre più l'automazione nei loro flussi di lavoro. Raggiungere questi obiettivi preservando l’accuratezza e l’integrità degli esperimenti può essere difficile. Una delle aree comuni in cui possono insinuarsi errori è la sigillaturaPiastre PCR, con una tecnica scadente che consente l'evaporazione dei campioni, alterando il pH e quindi interrompendo le funzioni enzimatiche e invitando alla contaminazione. Imparare a sigillare aPiastra PCRelimina correttamente questi rischi e garantisce risultati riproducibili.

Trova il sigillo giusto per la tua piastra PCR

Cappucci per piastre, guarnizioni in pellicola e coperchi
Tappisono un buon modo per sigillare il piatto con una chiusura ermetica, offrendo allo stesso tempo la flessibilità di aprire e richiudere molto facilmente il piatto secondo necessità senza sprechi. Tuttavia, i limiti presentano un paio di svantaggi principali.

Innanzitutto dovrai acquistare il cappellino specifico compatibile, il che li rende poco versatili. Dovrai assicurarti che il tappo scelto si adatti alla piastra, che dipende dal produttore, e scegliere a cupola o piatto in base al termociclatore che stai utilizzando.

In secondo luogo, applicare i tappi alla piastra può essere molto ripetitivo e noioso, con il rischio di contaminazione incrociata se si mette il tappo sbagliato nel pozzetto sbagliato.

Sebbene i sigilli in pellicola siano meno flessibili in termini di rimozione e sostituzione, sono molto versatili poiché si adattano a qualsiasi tipo di piastra PCR, indipendentemente da chi sia il produttore. Possono semplicemente essere tagliati su misura, rendendoli molto efficaci.

Un'altra opzione è un coperchio per piatti. Questi offrono una protezione inferiore rispetto a tappi e sigilli e vengono utilizzati principalmente solo per coperture a breve termine per prevenire la contaminazione.

Sigilli ottici vs. film in alluminio

Se hai bisogno di un sigillo ottico, trasparente o di unpellicola di foglio di alluminioper sigillare il tuo piatto è deciso dal tuo formato sperimentale.Pellicole sigillanti ottichesono trasparenti per consentire di osservare i campioni, proteggendoli e prevenendone l'evaporazione. Sono particolarmente utili anche negli esperimenti qPCR che prevedono misurazioni altamente precise della fluorescenza direttamente dalla piastra, nel qual caso sarà necessaria una pellicola sigillante che filtri la minor fluorescenza possibile. È importante assicurarsi che il sigillo o il cappuccio che si sta utilizzando abbiano un livello di chiarezza ottica sufficientemente elevato da garantire che le letture siano accurate.

Le pellicole in alluminio sono adatte per tutti i campioni sensibili alla luce o che devono essere conservati a una temperatura inferiore a 80°C. Per questo motivo, la maggior parte dei campioni destinati alla conservazione a lungo termine richiederanno una pellicola di alluminio. Le pellicole di alluminio sono inoltre perforabili, il che è utile sia per l'esame dei singoli pozzetti, sia per il trasferimento di campioni mediante aghi. Ciò può avvenire manualmente o come parte di una piattaforma robotica.

Considerare inoltre che le sostanze aggressive che includono acidi, basi o solventi richiederanno un sigillo in grado di resistere, nel qual caso è probabilmente più appropriato un sigillo in alluminio.

Pellicola adesiva e termosaldante
Sigillature in pellicola adesivasono molto semplici e facili da applicare. Tutto ciò di cui hai bisogno è che l'utente applichi il sigillo sulla piastra e utilizzi un semplice strumento applicatore per premere verso il basso e formare una tenuta ermetica.

Le sigillature a caldo sono più avanzate e forniscono una sigillatura più duratura con tassi di evaporazione ridotti rispetto a una sigillatura adesiva convenzionale. Questa opzione è appropriata se si desidera conservare i campioni a lungo termine, sebbene ciò comporti un requisito aggiuntivo per l'attrezzatura per la sigillatura delle piastre.

Come sigillare una piastra PCR

Metodo di sigillatura della piastra

Autoadesiva

1. Assicurati di lavorare su una superficie di lavoro piana e stabile

2. Rimuovere la pellicola dalla confezione e rimuovere il supporto

3. Posizionare con attenzione il sigillo sulla piastra, assicurandosi che tutti i pozzetti siano coperti

4. Utilizzare uno strumento applicatore per esercitare pressione sulla piastra. Inizia da un'estremità e procedi verso l'altra, premendo in modo uniforme

5. Ripeti l'operazione numerose volte

6. Fai scorrere l'applicatore attorno ai pozzetti esterni, per assicurarti che anche questi siano adeguatamente sigillati.

Sigillature a caldo

Le termosaldature funzionano sciogliendo la pellicola sul bordo di ciascun pozzetto, con l'aiuto di un sigillante per piastre. Per utilizzare una termosigillatrice, fare riferimento alle istruzioni fornite dal produttore dell'apparecchiatura. Assicurati che il produttore da cui acquisti la tua attrezzatura sia affidabile, poiché è molto importante che il sigillo sia adeguato, efficace e a tenuta stagna.

Consigli utili per la sigillatura delle piastre

UN. Quando si applica pressione sulla guarnizione, procedere sia in direzione orizzontale che verticale per garantire una tenuta adeguata

B. È sempre buona norma eseguire un test di qualunque cosa si stia facendo, e questo non è diverso con la sigillatura delle piastre. Eseguire il test con una piastra vuota prima di usarne una con i campioni.

C. Durante il test, rimuovi il sigillo e controlla che l'adesivo aderisca correttamente, senza spazi vuoti. C'è una rappresentazione visiva di ciò nel primo documento di riferimento. Se non hai sigillato correttamente la piastra, quando rimuovi il sigillo rimarranno degli spazi in cui l'adesivo non ha aderito completamente alla piastra.

D. Per la spedizione e il trasporto dei campioni, potrebbe essere utile applicare un sigillo di plastica sopra il sigillo in alluminio per una maggiore protezione (soprattutto dalla perforazione).

e. Assicurarsi sempre che non vi siano protuberanze o rughe durante l'applicazione della pellicola: queste causerebbero perdite ed evaporazione