Cosa sono i Cryovials?
Fiale di conservazione criogenicasono piccoli contenitori cilindrici con tappo progettati per conservare e conservare campioni a temperature ultra-basse. Sebbene tradizionalmente queste fiale fossero realizzate in vetro, ora sono molto più comunemente realizzate in polipropilene per ragioni di comodità e costo. I Cryovials sono stati attentamente progettati per resistere a temperature fino a -196℃ e per accogliere un'ampia varietà di tipi di cellule. Questi variano dalle cellule staminali per la diagnosi, ai microrganismi, alle cellule primarie fino alle linee cellulari stabilite. Oltre a ciò, potrebbero esserci anche piccoli organismi multicellulari immagazzinati all'internofiale di conservazione criogenica, nonché acido nucleico e proteine che devono essere conservati a livelli di temperatura di conservazione criogenica.
Le fiale per la conservazione criogenica sono disponibili in varie forme diverse e trovare il tipo corretto che soddisfa tutte le tue esigenze ti garantirà di mantenere l'integrità del campione senza pagare in eccesso. Leggi il nostro articolo per saperne di più sulle principali considerazioni d'acquisto quando selezioni il crioviale giusto per la tua applicazione di laboratorio.
Proprietà della fiala criogenica da considerare
Discussioni esterne e interne
Le persone spesso fanno questa scelta in base alle preferenze personali, ma in realtà ci sono differenze funzionali chiave da considerare tra i due tipi di filo.
Molti laboratori optano spesso per fiale filettate internamente per ridurre al minimo lo spazio di conservazione delle provette e consentire un migliore inserimento nelle scatole del congelatore. Nonostante ciò, potresti considerare che l'opzione con filettatura esterna è l'opzione migliore per te. Si ritiene che comportino un rischio di contaminazione inferiore, grazie al design che rende ancora più difficile l'ingresso nella fiala per qualsiasi cosa diversa dal campione.
Le fiale con filettatura esterna sono generalmente preferite per le applicazioni genomiche, ma entrambe le opzioni sono considerate adatte per le biobanche e altre applicazioni ad alta produttività.
Un'ultima cosa da considerare sulla filettatura: se il tuo laboratorio utilizza l'automazione, potrebbe essere necessario considerare quale filo può essere utilizzato con le pinze dello strumento.
Volume di archiviazione
Le fiale criogeniche sono disponibili in una varietà di dimensioni per coprire la maggior parte delle esigenze, ma nella maggior parte dei casi hanno una capacità compresa tra 1 ml e 5 ml.
La chiave è assicurarsi che la criovial non sia riempita eccessivamente e che ci sia spazio extra disponibile, nel caso in cui il campione si gonfi durante il congelamento. In pratica, ciò significa che i laboratori optano per fiale da 1 mL quando conservano campioni di 0,5 mL di cellule sospese nel crioprotettore e fiale da 2,0 mL per 1,0 mL di campione. Un altro consiglio per non riempire eccessivamente le fiale è quello di utilizzare criovial con contrassegni graduati, che ti assicureranno di prevenire eventuali rigonfiamenti che potrebbero causare crepe o perdite.
Tappo a vite vs Flip Top
Il tipo di tappo che scegli dipende principalmente dal fatto che utilizzerai o meno azoto in fase liquida. Se lo sei, allora avrai bisogno di criovial con tappo a vite. Ciò garantisce che non possano aprirsi accidentalmente a causa di una manipolazione errata o di sbalzi di temperatura. Inoltre, i tappi a vite consentono un recupero più semplice dalle scatole criogeniche e uno stoccaggio più efficiente.
Tuttavia, se non si utilizza azoto allo stadio liquido e si necessita di una parte superiore più comoda e più facile da aprire, la parte superiore ribaltabile è l'opzione migliore. Ciò ti farà risparmiare molto tempo poiché è molto più semplice da aprire, il che lo rende particolarmente utile nelle operazioni a rendimento più elevato e in quelle che utilizzano processi batch.
Sigillo di sicurezza
Il modo migliore per garantire una tenuta sicura è assicurarsi che il tappo e la bottiglia crioviale siano entrambi realizzati con lo stesso materiale. Ciò garantirà che si restringano e si espandano all'unisono. Se sono realizzati utilizzando materiali diversi, si restringono e si espandono a velocità diverse al variare della temperatura, creando spazi vuoti e potenziali perdite e conseguente contaminazione.
Alcune aziende offrono doppie rondelle e flangia per il massimo livello di sicurezza dei campioni su criovials filettati esternamente. I crioviali con O-Ring sono considerati i più affidabili per i crioviali con filettatura interna.
Vetro contro plastica
Per motivi di sicurezza e comodità, molti laboratori ora utilizzano fiale di plastica, solitamente polipropilene, invece delle fiale di vetro termosaldabili. Le fiale di vetro sono ormai considerate una scelta obsoleta poiché durante il processo di sigillatura possono svilupparsi perdite invisibili a foro stenopeico che, una volta scongelate dopo la conservazione in azoto liquido, potrebbero farle esplodere. Inoltre, non sono altrettanto adatti alle moderne tecniche di etichettatura, che sono fondamentali per garantire la tracciabilità dei campioni.
Autoportante o fondo arrotondato
Le fiale criogeniche sono disponibili sia nella versione autoportante con fondo a forma di stella, sia nella versione con fondo arrotondato. Se devi posizionare le fiale su una superficie, assicurati di scegliere la versione self-standing
Tracciabilità e tracciabilità dei campioni
Quest'area della conservazione criogenica viene spesso trascurata, ma il monitoraggio e la tracciabilità dei campioni sono un aspetto cruciale da considerare. I campioni criogenici possono essere conservati per molti anni, periodo durante il quale il personale può cambiare e senza registrazioni adeguatamente conservate possono diventare non identificabili.
Assicurati di scegliere fiale che rendano l'identificazione del campione il più semplice possibile. Le cose a cui dovresti prestare attenzione includono:
Ampie aree di scrittura per registrare dettagli sufficienti in modo da poter trovare i record se una fiala si trova in una posizione errata: in genere sono adeguate l'identità della cella, la data di congelamento e le iniziali della persona responsabile.
Codici a barre per facilitare la gestione dei campioni e i sistemi di tracciabilità
Tappi colorati
Una nota per il futuro: sono in fase di sviluppo chip ultra resistenti al freddo che, se inseriti all'interno di singole crioviale, potrebbero potenzialmente memorizzare una cronologia termica dettagliata, nonché informazioni dettagliate sul lotto, risultati dei test e altra documentazione di qualità pertinente.
Oltre a considerare le diverse specifiche delle fiale disponibili, è necessario riflettere anche sul processo tecnico di conservazione delle crioviali nell'azoto liquido.
Temperatura di conservazione
Esistono diversi metodi di conservazione per la conservazione criogenica dei campioni, ciascuno dei quali funziona a una temperatura specifica. Le opzioni e la temperatura a cui operano includono:
Fase liquida LN2: mantenere una temperatura di -196℃
Fase vapore LN2: sono in grado di funzionare a specifici intervalli di temperatura compresi tra -135°C e -190°C a seconda del modello.
Congelatori a vapori di azoto: da -20°C a -150°C
Il tipo di cellule conservate e il metodo di conservazione preferito dal ricercatore determineranno quale delle tre opzioni disponibili verrà utilizzata dal laboratorio.
Tuttavia, a causa delle temperature estremamente basse utilizzate, non tutti i tubi o i modelli saranno adatti o sicuri. I materiali possono diventare estremamente fragili a temperature estremamente basse, l'utilizzo di una fiala non adatta all'uso alla temperatura prescelta potrebbe causare la frantumazione o la rottura del contenitore durante la conservazione o lo scongelamento.
Controllare attentamente le raccomandazioni dei produttori sull'uso corretto poiché alcune fiale criogeniche sono adatte a temperature fino a -175°C, alcune -150°C altre solo 80°C.
Vale anche la pena notare che molti produttori dichiarano che le loro fiale criogeniche non sono adatte all'immersione in fase liquida. Se queste fiale vengono conservate nella fase liquida quando vengono riportate a temperatura ambiente, le fiale o i relativi tappi potrebbero frantumarsi a causa del rapido aumento di pressione causato da piccole perdite.
Se le cellule devono essere conservate nella fase liquida dell'azoto liquido, prendere in considerazione la conservazione delle cellule in apposite fiale criogeniche termosaldate in tubi cryoflex o la conservazione delle cellule in fiale di vetro chiuse ermeticamente.
Orario di pubblicazione: 25 novembre 2022