Stöðlun ferla felur í sér hagræðingu þeirra og síðari stofnun og samhæfingu, sem gerir kleift að ná framúrskarandi árangri langtíma-óháð notandanum. Stöðlun tryggir hágæða niðurstöður, svo og fjölföldun þeirra og samanburð.
Markmiðið með (klassískt) PCR er kynslóð áreiðanlegrar og fjölfaldanlegrar niðurstöðu. Fyrir ákveðin forrit, afraksturPCR varaer líka viðeigandi. Fyrir þessi viðbrögð verður að gæta þess að ekki sé í hættu og að PCR verkflæðið haldist stöðugt. Sérstaklega þýðir þetta að lágmarka innleiðingu mengunar sem gæti leitt til rangra jákvæðra eða rangra neikvæðra niðurstaðna eða jafnvel hindra PCR viðbrögð. Ennfremur ættu viðbragðsskilyrðin að vera eins eins og mögulegt er fyrir hvert einstakt sýni innan keyrslu og einnig að vera framseljanleg til síðari viðbragða (af sömu aðferð). Þetta vísar til samsetningar viðbragða sem og tegundar hitastýringar í hjólreiðaranum. Að sjálfsögðu skal forðast villur notenda eins mikið og mögulegt er.
Hér að neðan munum við sýna fram á þær áskoranir sem upp koma við undirbúning og í gegnum PCR - og aðferðir við lausnir sem eru til með tilliti til hljóðfæra og rekstrarvörur sem notaðar eru við stöðlun PCR verkflæðisins.
Viðbragðsundirbúningur
Afgreiðsla viðbragðsþátta í PCR-skip, eða plötur, hver um sig, samanstendur af mörgum áskorunum sem þarf að vinna bug á:
Viðbragðsskilyrði
Nákvæm og nákvæm skömmtun á einstökum íhlutum er ómissandi þegar miðað er við eins og eins viðbragðsaðstæður. Til viðbótar við góða pipetting tækni er það mikilvægt að velja rétt tól. PCR meistaralífar innihalda oft efni sem auka seigju eða mynda froðu. Meðan á pipettingunni stóð, leiða þetta til verulegs bleytingar áPipette ráð, þannig að draga úr nákvæmni pipetting. Notkun beinna afgreiðslukerfa eða val á pípettuábendingum sem eru minna tilhneigð til að bleyta getur bætt nákvæmni og nákvæmni pipetting.
Mengun
Meðan á afgreiðsluferlinu stendur myndast úðabrúsa sem, ef það er leyft að ná innan í pípettu, geta hugsanlega mengað annað sýni á næsta pipeting skrefi. Hægt er að koma í veg fyrir þetta með því að nota síuábendingar eða bein tilfærslukerfi.
Rekstrarvörur eins ogÁbendingar, skip og plötur sem eru notaðar í PCR verkflæðinu mega ekki innihalda efni sem skerða sýnið eða falsa niðurstöðuna. Má þar nefna DNA, DNAS, RNAS og PCR hemla, svo og íhluti sem geta hugsanlega lekið frá efninu meðan á viðbrögðum stendur - efnin þekkt sem útskolun.
Villa notenda
Því fleiri sýni eru unnin, því hærri er villuáhættan. Það getur auðveldlega gerst að sýnishorn er pipett í röng skip eða röng vel. Þessa áhættu er hægt að draga verulega úr með því að greina á milli bruna. Með sjálfvirkni afgreiðslustiga er „mannlegur þáttur“, þ.e. villur og notendatengd afbrigði lágmörkuð og þannig aukin fjölföldun, sérstaklega þegar um er að ræða lítil viðbragðsmagn. Þetta krefst þess að plötur af nægilegum víddarstöðugleika verði notaðir á vinnustöð. Meðfylgjandi strikamerki veita viðbótarvélahæfni, sem einfaldar sýnishornsporun í öllu ferlinu.
Forritun hitakerfisins
Forritun tæki getur reynst tímafrekt og villuleit. Mismunandi PCR hitauppstreymisaðgerðir vinna saman að því að einfalda þetta ferli skref og síðast en ekki síst til að gera það öruggt:
Auðveld notkun og góð notendaleiðbeiningar eru grundvöllur skilvirkrar forritunar. Með því að byggja á þessum grunni mun notendastjórnun, sem varið er með lykilorði koma í veg fyrir að eigin forrit verði breytt af öðrum notendum. Ef margir hjólreiðar (af sömu gerð) eru í notkun er það gagnlegt ef hægt er að flytja forrit beint frá einu tæki til annars með USB eða tengingu. Tölvuhugbúnaður gerir aðal og öruggri stjórn á forritum, réttindum notenda og skjölum á tölvu.
PCR Run
Meðan á keyrslunni stendur er DNA magnað í hvarfskipinu, þar sem hvert sýni ætti að láta í té sömu, stöðugu viðbragðsaðstæður. Eftirfarandi þættir skipta máli fyrir ferlið:
Hitastýring
Framúrskarandi nákvæmni í hitastýringu og einsleitni hjólreiðarokksins eru grunnurinn að jafnvel hitastigsskilyrðum allra sýna. Hágæða upphitunar- og kælingarþátta (Peltier þættir), sem og hvernig þeir eru tengdir við reitinn, eru ákvarðandi þættir sem munu ákvarða hættu á misræmi í hitastigi sem kallast „brúnáhrif“
Uppgufun
Styrkur einstakra viðbragðsþátta ætti ekki að breytast meðan á viðbrögðum stóð vegna uppgufunar. Annars er mögulegt að mjög lítiðPCR varagetur verið búið til, eða alls ekki. Það er því áríðandi að lágmarka uppgufun með því að tryggja öruggt innsigli. Í þessu tilfelli vinnur hitað loki hitakerfisins og innsigli skipsins. Mismunandi þéttingarmöguleikar eru í boði fyrirPCR plötur (Link: Seling Article), þar sem besta innsigli er náð með hitaþéttingu. Aðrar lokanir geta einnig hentað, svo framarlega sem hægt er að stilla snertisþrýsting hjólhylkisloksins að völdum innsigli.
Stöðlun ferla er til staðar til að vernda nákvæmar og endurtakanlegar niðurstöður til langs tíma. Þetta felur í sér reglulegt viðhald búnaðarins til að tryggja að hann sé alltaf í góðu ástandi. Allar rekstrarvörur ættu að vera stöðugt í háum gæðaflokki í öllum lóðum sem framleiddar eru og áreiðanlegt framboð þeirra verður að vera tryggt.
Post Time: Nóv-29-2022