Hvernig á að innsigla PCR plötu

Inngangur

PCR plötur, hefta rannsóknarstofunnar í mörg ár, eru að verða enn algengari í nútíma umhverfi þar sem rannsóknarstofur auka afköst þeirra og nota í auknum mæli sjálfvirkni í verkflæði sínu. Það getur verið erfitt að ná þessum markmiðum en varðveita nákvæmni og heilleika tilrauna. Eitt af þeim sameiginlegu svæðum þar sem villur geta læðst inn er með þéttingu áPCR plötur, með lélegri tækni sem leyfir uppgufun sýna, breytir pH og truflar þar af leiðandi ensímvirkni og býður upp á mengun. Að læra að innsigla aPCR plötuútilokar þessar áhættur á réttan hátt og tryggir endurtakanlegar niðurstöður.

Finndu rétta innsiglið fyrir PCR plötuna þína

Diskhettur á móti filmuþéttingum á móti lokum
Húfureru góð leið til að innsigla plötuna þína með þéttri innsigli, en gefa þér samt sveigjanleika til að afloka og endurþétta plötuna eins og þú þarft án þess að sóa. Hins vegar hafa húfur nokkra helstu galla.

Í fyrsta lagi verður þú að kaupa sérstaka hettuna sem er samhæfð, sem gerir þá ekki fjölhæfa. Þú verður að ganga úr skugga um að tappan sem þú velur passi við plötuna, sem er háð framleiðanda hennar, og veldu annað hvort kúplað eða flatt miðað við hitahjólið sem þú notar.

Í öðru lagi getur verið mjög endurtekið og leiðinlegt að setja tappana á plötuna, með hættu á krossmengun ef þú setur ranga hettu á ranga brunn.

Þó að filmuþéttingar séu minna sveigjanlegar hvað varðar að fjarlægja og skipta út, eru þau mjög fjölhæf þar sem þau passa hvers kyns PCR plötur, án tillits til þess hver framleiðandinn er. Það er einfaldlega hægt að skera þær í stærð, sem gerir þær mjög áhrifaríkar.

Annar valkostur er plötulok. Þessir bjóða upp á minni vörn en húfur og innsigli, og eru aðallega aðeins notuð til skammtímahlífar til að koma í veg fyrir mengun.

Optical vs Foil Film Seals

Hvort sem þú þarft optíska, glæra innsigli eðaálpappírsfilmaað innsigla diskinn þinn er ákveðið af tilraunasniðinu þínu.Optískar þéttingarfilmareru gagnsæ til að leyfa þér að fylgjast með sýnum, en samt vernda þau og koma í veg fyrir uppgufun. Þeir eru einnig sérstaklega gagnlegir í qPCR tilraunum sem fela í sér að gera mjög nákvæmar mælingar á flúrljómun beint frá plötunni, en þá þarftu þéttifilmu sem síar eins lítið flúrljómun út og mögulegt er. Það er mikilvægt að ganga úr skugga um að innsiglið eða hettan sem þú notar hafi nægilega mikið ljóstærleikastig til að tryggja að aflestur sé nákvæmur.

Þynnufilmur eru viðeigandi fyrir öll sýni sem eru ljósnæm eða sem á að geyma við undir 80°C. Af þessum sökum munu flest sýni sem eru ætluð til langtímageymslu þurfa filmu. Þynnufilmur eru einnig götaðar, sem er gagnlegt annað hvort til að skoða einstaka holur eða til að flytja sýni með nálum. Þetta getur gerst handvirkt eða sem hluti af vélfærakerfi.

Hugsaðu einnig um að árásargjarn efni sem innihalda sýrur, basa eða leysiefni krefjast innsigli sem þolir þau, í því tilviki er álpappír líklega hentugra.

Lím á móti hitaþéttingarfilmu
Límfilmuþéttingareru mjög einfalt og auðvelt að nota. Það eina sem þú þarft er að notandi setji innsiglið á plötuna og noti einfalt ásetningarverkfæri til að þrýsta niður og mynda þétt innsigli.

Hitaþéttingar eru fullkomnari og veita langvarandi innsigli sem hefur dregið úr uppgufunarhraða samanborið við hefðbundna límþéttingu. Þessi valkostur er viðeigandi ef þú ert að leita að því að geyma sýni til lengri tíma litið, þó að það fylgi viðbótarkröfu um plötuþéttingarbúnað.

Hvernig á að innsigla PCR plötu

Plötuþéttingaraðferð

Sjálflímandi

1. Gakktu úr skugga um að þú sért að vinna á sléttu og stöðugu vinnusvæði

2. Fjarlægðu filmuna úr umbúðunum og fjarlægðu bakhliðina

3. Setjið innsiglið varlega á plötuna og tryggið að allir brunnarnir séu þaktir

4. Notaðu búnað til að þrýsta á plötuna. Byrjaðu frá einum enda og vinnðu þig yfir í hinn, þrýstu jafnt

5. Endurtaktu þetta mörgum sinnum

6. Látið úðann um ytri brunnana renna til að ganga úr skugga um að þær séu líka rétt lokaðar.

Hitaþéttingar

Hitaþéttingar vinna með því að bræða filmuna að brún hvers brunns, með hjálp plötuþéttingarefnis. Til að nota hitaþéttibúnað skaltu skoða leiðbeiningarnar frá framleiðanda búnaðarins. Gakktu úr skugga um að framleiðandinn sem þú færð búnaðinn þinn frá sé virtur, því það er mjög mikilvægt að innsiglið sé rétt, skilvirkt og vatnsþétt.

Ábendingar um plötuþéttingu

a. Þegar þrýst er á innsiglið skaltu fara í bæði lárétta og lóðrétta átt til að tryggja rétta innsigli

b. Það er alltaf góð æfing að keyra prufukeyrslu á hverju sem þú ert að gera og þetta er ekkert öðruvísi með plötuþéttingu. Prófaðu með tómum disk áður en þú notar einn með sýnum.

c. Þegar þú prófar skaltu taka innsiglið af og sjá að límið festist rétt niður, án eyður. Það er sjónræn framsetning á þessu í fyrsta viðmiðunarskjali. Ef þú hefur ekki innsiglað plötuna almennilega, þegar þú fjarlægir innsiglið verða eyður þar sem límið hefur ekki fest sig að fullu við plötuna.

d. Fyrir sendingu og flutning á sýnum gæti þér fundist það vera gagnlegt að setja plastinnsigli ofan á þynnuþéttinguna til að auka vernd (sérstaklega gegn göt).

e. Gakktu úr skugga um að það séu engar högg eða hrukkur þegar filman er sett á - það mun valda leka og uppgufun