5 einföld ráð til að koma í veg fyrir villur þegar unnið er með PCR plötum

Pólýmerasa keðjuverkun (PCR) er ein af þekktustu aðferðunum sem notuð eru í lífvísindarannsóknarstofum.

PCR plöturnar eru framleiddar úr fyrsta flokks plasti til framúrskarandi vinnslu og greiningar á sýnum eða niðurstöðum sem safnað er.

Þeir hafa þunna og einsleita veggi til að veita nákvæma hitaflutning.

Til undirbúnings fyrir rauntíma umsóknir eru örfáir hlutar af DNA eða RNA afskildir og geymdir í PCR plötum.

PCR plöturnar eru mjög duglegar við hitaþéttingu og takmarka einnig hitaflæði.

Hins vegar, eins áhrifaríkar og áreiðanlegar PCR plöturnar eru, minnka villur og ónákvæmni auðveldlega við vinnslu sýna.

Því ef þú hefur áhuga á að fá góða og hágæðaPCR plötur.Tilvalið er að hafa samband við áreiðanlegan PCR plötuframleiðanda. Með þessu ertu viss um að fá besta samninginn.

Hér eru nokkrar varúðarráðstafanir til að forðast mengun hvarfefna eða sýna og koma í veg fyrir að ónákvæmni líði inn í niðurstöðurnar.

Að sótthreinsa umhverfið
Rangt jákvætt eða neikvætt kemur fram vegna tilvistar óhreininda, sem fær þig til að efast um niðurstöðurnar.

Óhreinindi og aðskotaefni koma fyrir í ýmsum myndum eins og óskyld DNA eða efnaaukefni sem að lokum draga úr skilvirkni og skilvirkni hvarfsins.

Það eru fjölmargar leiðir til að draga verulega úr mengunarhraða PCR plötunnar.

Notkun dauðhreinsaðra síuábendinga er önnur gagnleg leið til að koma í veg fyrir að óhreinindi líði inn í sýnin þín í gegnum pípetturnar.

Notaðu algjörlega hreint sett af búnaði, sem samanstendur af pípettum og rekkum, eingöngu til notkunar á PCR. Þetta mun tryggja hverfandi flutning óhreininda eða mengunarefna um rannsóknarstofuna.

Notaðu bleikjurtir, etanól á pípetturnar, rekkana og bekkina til að þurrka af mengunarefnum.

Úthlutaðu fráteknu plássi fyrir öll PCR viðbrögðin þín til að lágmarka frekar agnamengun.

Notaðu hreina hanska við hvert skref og skiptu þeim oft út.

PCR plötur
Skoðaðu styrk og hreinleika sniðmátsins.
Halda skal hreinleika bekkjarins og búnaðarins sem notaður er þegar sýni eru greind með PCR. Nauðsynlegt er að sannreyna hreinleikastig sýnanna fyrir greiningu og vinnslu.

Almennt taka greiningartæki tillit til styrks og hreinleikastigs DNA sýnanna.

Endeavor hlutfall gleypni fyrir 260nm/280nm má ekki vera minna en 1,8. Þó síðari bylgjulengd á milli 230nm og 320nm sé notuð til að bera kennsl á óhreinindi.

Í tilviki eru kaótrópísk sölt og önnur lífræn efnasambönd greind við 230nm gleypnihraða. Þó að grugg í DNA sýnum sé einnig greint og sannreynd við gleypnihraða 320nm.

Forðastu að ofhlaða PCR plötur með vöru
Eins mikið og það er óskað eftir að keyra margar vörur samtímis leiðir það til krossmengunar á PCR plötunum.

Ofhleðsla á PCR plöturnar með mismunandi úrgangi og gerir það mjög erfitt að ganga úr skugga um sýnin.

Halda skrár yfir PCR hvarfefni í skammtafjölda
Stöðugar frystingar/þíðingarlotur og tíð notkun á skammti gæti skemmt PCR hvarfefnin, ensím og DNTP með endurkristöllun.

Reyndu alltaf að fylgjast með hlutfalli deilsins sem notaður er á meðan þú undirbýr sýni sem á að greina.

Æskilegt LIMS er hentugra til að stjórna birgðum og magn hvarfefna og sýna frosna eða þiðna.

Veldu besta hitastigið fyrir glæðingu.
Að velja og nota rangt glæðingarhitastig er enn ein aðferðin sem PCR niðurstöður innihalda villur.

Stundum fara viðbrögðin ekki eins og áætlað var. Æskilegt er að lækka glæðingarhitastigið til að auðvelda árangursríkt hvarf.

Hins vegar, lækkun hitastigsins eykur líkurnar á fölskum jákvæðum og primer dimerum útliti.

Það er mikilvægt að staðfesta greininguna á bræðsluferlinu þegar PCR plöturnar eru notaðar þar sem það er góður vísbending um að velja réttan glæðuhitastig.

Grunnhönnunarhugbúnaður hjálpar við hönnun, útvegun rétts glæðingarhitastigs og dregur beint úr villum í PCR plötum.

Vantar þig hágæða PCR plötu?
Ef þú hefur verið að íhuga hvar á að finna áreiðanlegan framleiðandaPCR plötur. Leitaðu ekki lengur því þú ert á réttum stað.

Vinsamlegasmelltu hér til að hafa samband við okkurfyrir hágæða vörur og þjónustu á verði sem mun ekki brjóta bankann.


Birtingartími: 30. október 2021