Mmeghachi omume yinye polymerase (PCR) bụ otu n'ime ụzọ ama ama nke ejiri na ụlọ nyocha sayensị ndụ.
A na-emepụta efere PCR site na plastik nke mbụ maka nhazi na nyocha nke ihe nlele ma ọ bụ nsonaazụ anakọtara.
Ha nwere mgbidi dị gịrịgịrị na nke jikọrọ ọnụ iji nye nnyefe ọkụ ziri ezi.
Na nkwadebe maka ngwa ngwa, a na-ezobe akụkụ nkeji nke DNA ma ọ bụ RNA n'ime efere PCR.
Efere PCR na-arụ ọrụ nke ọma na njichi okpomọkụ ma na-egbochikwa oke okpomọkụ.
Agbanyeghị, ka efere PCR dị irè ma bụrụ nke a pụrụ ịdabere na ya, njehie na ezighi ezi na-adị mfe mgbe a na-ahazi ihe nlele.
Ya mere, ọ bụrụ na ị nwere mmasị ịnweta ezigbo mma na eluPCR efere.Ọ dị mma ịkpọtụrụ onye nrụpụta efere PCR a pụrụ ịdabere na ya. Na nke a, ị na-emesi obi ike na ị ga-enweta ihe kacha mma.
Nke a bụ ụfọdụ ịkpachara anya ịgbaso iji zere mmetọ nke reagents ma ọ bụ ihe nlele ma gbochie ezighi ezi ịbanye na nsonaazụ ya.
Sterilizing gburugburu
Ihe na-ezighị ezi ma ọ bụ ihe ọjọọ na-eme n'ihi ọnụnọ nke adịghị ọcha, nke na-eme ka ị nwee obi abụọ na nsonaazụ ya.
Ihe adịghị ọcha na ihe mmetọ na-eme n'ụdị dị iche iche dị ka DNA na-enweghị njikọ ma ọ bụ ihe mgbakwunye kemịkalụ nke na-emecha na-ebelata arụmọrụ na ịdị irè nke mmeghachi omume ahụ.
Enwere ọtụtụ ụzọ iji belata oke mmetọ nke efere PCR.
Iji ndụmọdụ nzacha emechara bụ ụzọ ọzọ bara uru iji gbochie adịghị ọcha ịbata n'ime nlele gị site na pipettes.
Wepụta akụrụngwa dị ọcha kpamkpam, nke nwere pipettes na racks, naanị maka iji PCR. Nke a ga-ekwe nkwa ịnyefe adịghị ọcha ma ọ bụ mmetọ gburugburu ụlọ nyocha.
Jiri bleaches, ethanol na pipettes, racks na bench mee ihe iji kpochapụ mmetọ.
Wepụta ohere echekwabara maka mmeghachi omume PCR gị niile iji belata mmetọ ahụ.
Jiri uwe aka dị ọcha mee ihe ọ bụla ma dochie ha ugboro ugboro.
PCR efere
Nyochaa nleba anya na ịdị ọcha nke Template.
Ekwesịrị idowe ịdị ọcha nke oche na akụrụngwa eji mgbe a na-enyocha ihe nlele na PCR. Ọ dị mkpa iji kwado ogo ịdị ọcha nke ihe nlele tupu nyocha na nhazi.
N'ozuzu, ndị nyocha na-echebara nleba anya na ọkwa ịdị ọcha nke ihe nlele DNA.
Gbaa mbọ hụ na nha nke nnabata maka 260nm/280nm ekwesịghị ịbụ ihe na-erughị 1.8. Ebe a na-eji ogologo ikuku na-esote n'etiti 230nm na 320nm iji chọpụta adịghị ọcha.
N'otu oge, a na-ahụ salts chaotropic na ogige organic ndị ọzọ na ọnụego nnabata 230nm. Ọ bụ ezie na a na-achọpụtakwa turbidity na nlele DNA wee chọpụta na ọnụego nnabata nke 320nm.
Zere ibufe PCR Plates na ngwaahịa
Ka ọ na-achọrọ ịme ọtụtụ ngwaahịa n'otu oge, ọ na-ebute mmetọ nke efere PCR.
Ibufe efere PCR na ngwaahịa dị iche iche na-ekpofu ihe na-eme ka ọ sie ike ịchọpụta ihe nlele ahụ.
Debe ndekọ nke Aliquot PCR Reagents
Ọkpụkpọ oyi na-aga n'ihu na oyi na-atụ na iji aliquot eme ihe mgbe niile nwere ike imebi PCR reagents, enzymes na DNTP site na recrystallization.
Gbalịsie ike mgbe niile iji nyochaa ọnụego aliquot ejiri mee ihe mgbe ị na-akwadebe ihe nlele maka nyocha.
LIMS kacha mma dabara adaba maka njikwa ngwa ahịa yana ọnụọgụ reagents na ihe nlele oyiri ma ọ bụ gbazee.
Họrọ Okpomọkụ kachasị mma.
Ịhọrọ na iji ọnọdụ okpomọkụ na-adịghị mma bụ usoro ọzọ PCR nwere njehie.
Mgbe ụfọdụ, mmeghachi omume adịghị aga dị ka atụmatụ. A na-achọrọ iji belata okpomọkụ na-ekpo ọkụ iji mee ka mmeghachi omume na-aga nke ọma.
Otú ọ dị, iweda ọnọdụ okpomọkụ na-eme ka ohere nke adịgboroja na-emepụta ihe na-eme ka ọ dịkwuo mma na ọdịdị nke primer dimers.
Ọ dị mkpa iji kwado nyocha nke mgbaze mgbaze mgbe ị na-eji efere PCR n'ihi na ọ bụ ezigbo ihe na-egosi ịhọrọ ọnọdụ okpomọkụ nke ọma.
Ngwa ngwa imewe ngwa ngwa na-enyere aka na imebe, inye ọnọdụ okpomọkụ nke ọma na-ebelata njehie na efere PCR ozugbo.
Achọrọ efere PCR dị elu?
Bụrụ na ị na-atụle ebe ịchọta a pụrụ ịdabere na emeputa nkePCR efere. Chọọkwa ọzọ n'ihi na ị nọ ebe kwesịrị ekwesị.
Obiọmapịa ebe a ka ịkpọtụrụ anyịmaka ngwaahịa na ọrụ dị elu na ọnụahịa nke na-agaghị agbaji ụlọ akụ.
Oge nzipu: Ọktoba 30-2021