Perkenalan
pelat PCR, yang merupakan kebutuhan pokok laboratorium selama bertahun-tahun, menjadi semakin lazim di lingkungan modern seiring dengan meningkatnya kapasitas laboratorium dan semakin banyaknya penggunaan otomatisasi dalam alur kerja mereka. Mencapai tujuan-tujuan ini sambil menjaga keakuratan dan integritas eksperimen bisa jadi sulit. Salah satu area umum di mana kesalahan dapat terjadi adalah pada penyegelanpelat PCR, dengan teknik yang buruk memungkinkan terjadinya penguapan sampel, mengubah pH sehingga mengganggu fungsi enzimatik, dan mengundang kontaminasi. Mempelajari cara menyegel apelat PCRmenghilangkan risiko ini dengan tepat dan memastikan hasil yang dapat direproduksi.
Temukan Segel yang Tepat untuk Pelat PCR Anda
Tutup Pelat vs. Segel Film vs. Tutup
topiadalah cara yang baik untuk menutup piring Anda dengan segel yang rapat, namun tetap memberi Anda fleksibilitas untuk dengan mudah membuka segel dan menutup kembali piring sesuai kebutuhan tanpa ada limbah. Namun, topi memiliki beberapa kelemahan utama.
Pertama, Anda harus membeli tutup khusus yang kompatibel, sehingga tidak serbaguna. Anda harus memastikan bahwa tutup yang Anda pilih sesuai dengan pelat, tergantung pada pabrikannya, dan memilih tutup berbentuk kubah atau datar berdasarkan termosiklik yang Anda gunakan.
Kedua, memasang tutup pada piring bisa sangat berulang dan membosankan, dengan risiko kontaminasi silang jika Anda salah memasang tutup pada sumur yang salah.
Meskipun segel film kurang fleksibel dalam hal pelepasan dan penggantian, segel ini sangat serbaguna karena dapat cocok dengan semua jenis pelat PCR, tanpa peduli siapa produsennya. Mereka dapat dengan mudah dipotong sesuai ukuran, sehingga sangat efektif.
Pilihan lainnya adalah tutup piring. Perlindungan ini lebih sedikit dibandingkan penutup dan segel, dan umumnya hanya digunakan untuk perlindungan jangka pendek guna mencegah kontaminasi.
Segel Film Optik vs. Foil
Apakah Anda memerlukan segel optik dan bening ataufilm aluminium foiluntuk menutup piring Anda ditentukan oleh format eksperimental Anda.Film penyegelan optiktransparan untuk memungkinkan Anda mengamati sampel, sekaligus tetap melindunginya dan mencegah penguapan. Mereka juga sangat berguna dalam eksperimen qPCR yang melibatkan pengukuran fluoresensi dengan presisi tinggi langsung dari pelat, dalam hal ini Anda memerlukan lapisan film penyegel yang menyaring fluoresensi sesedikit mungkin. Penting untuk memastikan bahwa segel atau tutup yang Anda gunakan memiliki tingkat kejernihan optik yang cukup tinggi untuk memastikan pembacaan akurat.
Film foil sesuai untuk sampel apa pun yang sensitif terhadap cahaya atau disimpan pada suhu di bawah 80°C. Oleh karena itu, sebagian besar sampel yang ditujukan untuk penyimpanan jangka panjang memerlukan film foil. Film foil juga dapat ditembus, yang berguna untuk memeriksa sumur individu, atau untuk memindahkan sampel dengan jarum. Hal ini dapat terjadi secara manual atau sebagai bagian dari platform robot.
Pertimbangkan juga bahwa zat agresif yang mengandung asam, basa, atau pelarut memerlukan segel yang mampu menahannya, dalam hal ini segel foil mungkin lebih tepat.
Film Perekat vs. Penyegelan Panas
Segel film berperekatsangat mudah dan mudah diterapkan. Yang Anda perlukan hanyalah pengguna menempelkan segel pada pelat, dan menggunakan alat aplikator sederhana untuk menekan dan membentuk segel yang rapat.
Segel panas lebih canggih, memberikan segel yang tahan lebih lama dan mengurangi tingkat penguapan dibandingkan segel berperekat konvensional. Opsi ini cocok jika Anda ingin menyimpan sampel dalam jangka panjang, meskipun hal ini memerlukan persyaratan tambahan untuk peralatan penyegelan pelat.
Cara Menyegel Pelat PCR
Metode Penyegelan Pelat
Perekat Diri
1. Pastikan Anda mengerjakan permukaan kerja yang datar dan stabil
2. Keluarkan film dari kemasannya, lalu lepaskan lapisan belakangnya
3. Pasang segel dengan hati-hati pada pelat, sambil memastikan semua lubang tertutup
4. Gunakan alat aplikator untuk memberikan tekanan pada pelat. Mulailah dari satu ujung dan lanjutkan ke ujung lainnya, tekan secara merata
5. Ulangi ini berkali-kali
6. Jalankan aplikator Anda di sekitar lubang luar, untuk memastikan lubang tersebut juga tersegel dengan benar.
Segel Panas
Segel panas bekerja dengan melelehkan film ke tepi masing-masing sumur, dengan bantuan pelat penyegel. Untuk mengoperasikan penyegel panas, lihat petunjuk yang diberikan oleh produsen peralatan. Pastikan produsen tempat Anda membeli peralatan memiliki reputasi baik, karena segelnya harus benar, efektif, dan kedap air.
Ujung Atas Penyegelan Pelat
A. Saat memberikan tekanan pada segel, lakukan arah horizontal dan vertikal untuk memastikan segel yang tepat
B. Itu selalu merupakan praktik yang baik untuk menjalankan uji coba apa pun yang Anda lakukan, dan ini tidak berbeda dengan penyegelan pelat. Uji dengan piring kosong sebelum menggunakan piring yang berisi sampel.
C. Saat pengujian, lepas segelnya dan lihat apakah perekatnya menempel dengan benar, tanpa celah. Ada representasi visual mengenai hal ini dalam dokumen referensi pertama. Jika Anda belum menyegel pelat dengan benar, saat Anda melepas segel akan ada celah yang mana perekat belum menempel sepenuhnya pada pelat.
D. Untuk pengiriman dan pengangkutan sampel, Anda mungkin perlu menerapkan segel plastik di atas segel foil untuk perlindungan ekstra (terutama dari penindikan).
e. Selalu pastikan tidak ada benjolan atau kerutan saat mengaplikasikan film – ini akan menyebabkan kebocoran dan penguapan
Waktu posting: 23 November 2022