Ինչպես կնքել PCR ափսեը

Ներածություն

PCR թիթեղներ, որը երկար տարիներ լաբորատորիայի հիմնական բաղադրիչն է, ավելի տարածված են դառնում ժամանակակից միջավայրում, քանի որ լաբորատորիաները մեծացնում են իրենց թողունակությունը և ավելի ու ավելի են օգտագործում ավտոմատացումն իրենց աշխատանքային հոսքերում: Այս նպատակներին հասնելը` միաժամանակ պահպանելով փորձերի ճշգրտությունն ու ամբողջականությունը, կարող է դժվար լինել: Ընդհանուր տարածքներից մեկը, որտեղ սխալները կարող են սողալ, դա կնքումն էPCR թիթեղներ, վատ տեխնիկայով, որը թույլ է տալիս գոլորշիացնել նմուշները, փոխելով pH-ը և, հետևաբար, խաթարելով ֆերմենտային ֆունկցիաները և առաջացնելով աղտոտում: Սովորելով կնքել աPCR ափսեճիշտ է վերացնում այդ ռիսկերը և ապահովում է վերարտադրելի արդյունքներ:

Գտեք ճիշտ կնիքը ձեր PCR ափսեի համար

Ափսեների գլխարկներ ընդդեմ ֆիլմի կնիքների ընդդեմ կափարիչների
Կափարիչներլավ միջոց է ձեր ափսեը ամուր կնիքով փակելու համար, միևնույն ժամանակ ձեզ ճկունություն է տալիս շատ հեշտությամբ ապամոնտաժել և նորից փակել ափսեը, ինչպես ձեզ անհրաժեշտ է՝ առանց որևէ թափոնների: Այնուամենայնիվ, գլխարկներն ունեն մի քանի հիմնական թերություններ.

Նախ, դուք ստիպված կլինեք գնել հատուկ գլխարկ, որը համատեղելի է, ինչը նրանց դարձնում է ոչ բազմակողմանի: Դուք պետք է համոզվեք, որ ձեր ընտրած գլխարկը համապատասխանում է ափսեին, որը կախված է դրա արտադրողից, և ընտրեք կամ գմբեթավոր կամ հարթ՝ հիմնվելով ձեր օգտագործած ջերմոցիկլետի վրա:

Երկրորդ, կափարիչները ափսեի վրա դնելը կարող է լինել շատ կրկնվող և հոգնեցուցիչ՝ խաչաձև աղտոտման վտանգով, եթե սխալ գլխարկը սխալ ջրհորի վրա դնեք:

Թեև թաղանթային կնիքները հեռացնելու և փոխարինելու առումով ավելի քիչ ճկուն են, դրանք շատ բազմակողմանի են, քանի որ դրանք կտեղավորվեն ցանկացած տեսակի PCR ափսեի վրա, անկախ նրանից, թե ով է արտադրողը: Նրանք կարող են պարզապես կտրվել չափի մեջ, ինչը նրանց շատ արդյունավետ է դարձնում:

Մեկ այլ տարբերակ ափսեի կափարիչն է: Սրանք ավելի քիչ պաշտպանություն են տալիս, քան կափարիչները և կնիքները, և հիմնականում օգտագործվում են միայն կարճաժամկետ ծածկույթի համար՝ աղտոտումը կանխելու համար:

Օպտիկական ընդդեմ փայլաթիթեղի ֆիլմերի կնիքները

Անկախ նրանից, թե դուք պահանջում եք օպտիկական, հստակ կնիք կամ կնիքալյումինե փայլաթիթեղի ֆիլմձեր ափսեը կնքելը որոշվում է ձեր փորձնական ձևաչափով:Օպտիկական կնքման ֆիլմերթափանցիկ են, որպեսզի թույլ տան դիտարկել նմուշները՝ միաժամանակ պաշտպանելով դրանք և կանխելով գոլորշիացումը: Դրանք նաև հատկապես օգտակար են qPCR փորձարկումներում, որոնք ներառում են ֆլյուորեսցենտության բարձր ճշգրիտ չափումներ անմիջապես թիթեղից, որի դեպքում ձեզ անհրաժեշտ կլինի փակող թաղանթ, որը հնարավորինս քիչ ֆլուորեսցենտ է զտում: Կարևոր է համոզվել, որ ձեր օգտագործած կնիքը կամ կափարիչը օպտիկական հստակության բավական բարձր մակարդակ ունի՝ ապահովելու համար, որ ընթերցումները ճշգրիտ են:

Նրբաթիթեղի թաղանթները հարմար են ցանկացած նմուշների համար, որոնք զգայուն են լույսի նկատմամբ կամ պետք է պահվեն 80°C-ից ցածր ջերմաստիճանում: Այդ իսկ պատճառով, երկարաժամկետ պահպանման համար նախատեսված նմուշների մեծ մասը կպահանջի փայլաթիթեղի թաղանթ: Փայլաթիթեղի թաղանթները նույնպես թափանցելի են, ինչը օգտակար է կա՛մ առանձին հորեր հետազոտելու, կա՛մ ասեղներով նմուշները տեղափոխելու համար: Սա կարող է տեղի ունենալ ձեռքով կամ որպես ռոբոտային հարթակի մաս:

Հաշվի առեք նաև, որ ագրեսիվ նյութերը, որոնք ներառում են թթուներ, հիմքեր կամ լուծիչներ, կպահանջեն կնիք, որը կարող է դիմակայել դրանց, որի դեպքում փայլաթիթեղի կնիքը, հավանաբար, ավելի նպատակահարմար է:

Կպչուն ընդդեմ ջերմային կնքման ֆիլմի
Կպչուն ֆիլմի կնիքներըդրանք շատ պարզ են և հեշտությամբ կիրառվում են: Ձեզ անհրաժեշտ է միայն, որ օգտագործողը կիրառի կնիքը ափսեի վրա և օգտագործի պարզ ապլիկատոր գործիք՝ ներքև սեղմելու և ամուր կնիք ձևավորելու համար:

Ջերմային կնիքները ավելի առաջադեմ են՝ ապահովելով ավելի երկարատև կնիք, որը նվազեցնում է գոլորշիացման արագությունը՝ համեմատած սովորական կպչուն կնիքի հետ: Այս տարբերակը տեղին է, եթե ցանկանում եք նմուշներ պահել երկարաժամկետ հեռանկարում, թեև սա ունի ափսե կնքման սարքավորումների լրացուցիչ պահանջ:

Ինչպես կնքել PCR ափսեը

Ափսեի կնքման մեթոդ

Ինքնասոսնձվող

1. Համոզվեք, որ դուք աշխատում եք հարթ և կայուն աշխատանքային մակերեսի վրա

2. Հեռացրեք ֆիլմը իր փաթեթավորումից և հեռացրեք թիկունքը

3. Զգուշորեն դրեք կնիքը ափսեի վրա՝ միաժամանակ համոզվելով, որ բոլոր հորերը ծածկված են

4. Օգտագործեք ապլիկատոր գործիք՝ ափսեի վրա ճնշում գործադրելու համար: Սկսեք մի ծայրից և անցեք մյուս ծայրին՝ հավասարաչափ սեղմելով

5. Կրկնեք սա մի քանի անգամ

6. Օգտագործեք ձեր ապլիկատորը արտաքին հորերի շուրջը, որպեսզի համոզվեք, որ դրանք նույնպես պատշաճ կերպով կնքված են:

Ջերմային կնիքներ

Ջերմային կնիքները աշխատում են՝ թաղանթը հալեցնելով յուրաքանչյուր հորի եզրին, ափսե կնքողի օգնությամբ: Ջերմամեկուսիչը գործարկելու համար տեսեք սարքավորման արտադրողի կողմից տրված հրահանգները: Համոզվեք, որ արտադրողը, որից դուք ստանում եք ձեր սարքավորումը, հեղինակավոր է, քանի որ շատ կարևոր է, որ կնիքը լինի պատշաճ, արդյունավետ և անջրանցիկ:

Ափսե կնքման վերին խորհուրդներ

ա. Կնիքի վրա ճնշում գործադրելիս անցեք ինչպես հորիզոնական, այնպես էլ ուղղահայաց ուղղություններով, որպեսզի ապահովեք պատշաճ կնիքը

բ. Միշտ լավ պրակտիկա է փորձարկել այն, ինչ անում եք, և սա չի տարբերվում ափսեի կնքումից: Փորձեք դատարկ ափսեով, նախքան նմուշների հետ օգտագործելը:

գ. Փորձարկելիս հանեք կնիքը և տեսեք, որ սոսինձը պատշաճ կերպով կպել է, առանց բացերի: Առաջին հղումային փաստաթղթում կա դրա տեսողական ներկայացում: Եթե ​​դուք պատշաճ կերպով չեք կնքել ափսեը, ապա կնիքը հեռացնելիս բացեր կլինեն, որտեղ սոսինձը լիովին չի կպել թիթեղին:

դ. Նմուշների առաքման և փոխադրման համար կարող եք օգտակար լինել փայլաթիթեղի կնիքի վերևում պլաստիկ կնիք դնելը լրացուցիչ պաշտպանության համար (հատկապես ծակելուց):

ե. Միշտ համոզվեք, որ թաղանթը քսելիս չկան կնճիռներ կամ կնճիռներ. դրանք կառաջացնեն արտահոսք և գոլորշիացում: