Ինչպես փոխանցել փոքր ծավալներ ձեռքի մեխանիկական խողովակներով

0,2-ից մինչև 5 µL ծավալների պիպերթավորման ժամանակ, խողովակների տեղադրման ճշգրտությունը և ճշգրտությունը կարևորագույն նշանակություն ունեն, քանի որ փոքր ծավալների դեպքում սխալներն ավելի ակնհայտ են դառնում:

Քանի որ ավելի շատ ուշադրություն է դարձվում ռեակտիվների և ծախսերի կրճատմանը, ավելի փոքր ծավալները մեծ պահանջարկ ունեն, օրինակ՝ PCR Mastermix կամ ֆերմենտային ռեակցիաների պատրաստման համար: Սակայն 0,2 – 5 µL փոքր ծավալների պիպերթավորումը նոր մարտահրավերներ է դնում պիպերտավորման ճշգրտության և ճշգրտության համար: Հետևյալ կետերը կարևոր են.

  1. Պիպետտի և ծայրի չափը. Միշտ ընտրեք պիպետը հնարավորինս նվազագույն անվանական ծավալով և ամենափոքր ծայրով, որպեսզի օդային բարձը հնարավորինս փոքր լինի: 1 մկլ պիպետտավորելիս, օրինակ, ընտրեք 0,25 – 2,5 մկլ պիպետտ և համապատասխան ծայր, քան 1 – 10 մկլ պիպետտ:
  2. Չափորոշում և սպասարկում. Կարևոր է, որ ձեր պիպետները պատշաճ չափորոշված ​​լինեն և պահպանվեն: Պիպետտի վրա փոքր ճշգրտումները և կոտրված մասերը հանգեցնում են համակարգված և պատահական սխալի արժեքների զանգվածային աճի: ISO 8655-ի համաձայն չափաբերումը պետք է կատարվի տարին մեկ անգամ:
  3. Դրական տեղաշարժման պիպետներ. Ստուգեք, թե արդյոք ձեր լաբորատորիայում ունեք դրական տեղաշարժի պիպետ՝ ցածր ծավալի միջակայքով: Ընդհանուր առմամբ, այս տեսակի պիպետտի օգտագործումը հանգեցնում է ավելի լավ պիպետտավորման արդյունքի ճշգրտության և ճշգրտության առումով, քան դասական օդային բարձի խողովակների դեպքում:
  4. Փորձեք օգտագործել ավելի մեծ ծավալներ. Դուք կարող եք դիտարկել ձեր նմուշը նոսրացնելը, որպեսզի վերջնական ռեակցիայի ժամանակ նույն քանակով ավելի մեծ ծավալներ հաղորդեք: Սա կարող է նվազեցնել pipetting սխալները շատ փոքր նմուշի ծավալներով:

Բացի լավ գործիքից, հետազոտողը պետք է ունենա շատ լավ խողովակաշարային տեխնիկա: Հատուկ ուշադրություն դարձրեք հետևյալ քայլերին.

  1. Ծայրի կցորդ. Մի խցկեք պիպետտը ծայրի վրա, քանի որ դա կարող է վնասել բարակ ծայրի ծայրը և առաջացնել հեղուկ ճառագայթի վերահղում կամ վնասել բացվածքը: Միայն թեթև ճնշում գործադրեք ծայրը ամրացնելիս և օգտագործեք պիպետտ՝ զսպանակով բեռնված ծայրի կոնով:
  2. Պիպետտը պահելը. Մի պահեք պիպետտը ձեռքում, երբ սպասում եք ցենտրիֆուգին, ցիկլերին և այլն: Պիպետտի ներսը կտաքանա և կհանգեցնի օդային բարձի ընդլայնմանը, ինչը կհանգեցնի շեղումների սահմանված ծավալից, երբ խողովակը տեղադրում է:
  3. Նախնական թրջում. Օդի խոնավացումը ծայրի և պիպետտի ներսում պատրաստում է ծայրը նմուշի համար և խուսափում է գոլորշիացումից՝ փոխանցման ծավալը ձգելիս:
  4. Ուղղահայաց ձգում. սա շատ կարևոր է փոքր ծավալների հետ աշխատելիս՝ խուսափելու մազանոթային ազդեցությունից, որն առաջանում է, երբ խողովակը պահվում է անկյան տակ:
  5. Ընկղման խորություն. մազանոթային էֆեկտի պատճառով ծայրը հնարավորինս քիչ ընկղմեք՝ կանխելու համար հեղուկի մուտքը ծայրին: Հիմնական կանոն. Որքան փոքր է ծայրը և ծավալը, այնքան ցածր է ընկղմման խորությունը: Մենք խորհուրդ ենք տալիս առավելագույնը 2 մմ փոքր ծավալներով խողովակներ փոխանցելիս:
  6. Բաշխում 45° անկյան տակ. հեղուկի օպտիմալ արտահոսքը երաշխավորված է, երբ խողովակը պահվում է 45° անկյան տակ:
  7. Կապ անոթի պատի կամ հեղուկի մակերեսի հետ. Փոքր ծավալները կարող են պատշաճ կերպով բաժանվել միայն այն դեպքում, երբ ծայրը պահվում է նավի պատին կամ ընկղմվում է հեղուկի մեջ: Նույնիսկ ծայրից վերջին կաթիլը կարող է ճշգրիտ կերպով տարածվել:
  8. Փչում. ցածր ծավալներ բաժանելուց հետո փչելը պարտադիր է ծայրում առկա հեղուկի նույնիսկ վերջին կաթիլը թափելու համար: Փչումը պետք է իրականացվի նաև նավի պատի դեմ: Հեղուկի մակերեսին փչելիս զգույշ եղեք, որպեսզի նմուշի մեջ օդային փուչիկները չմտցնեն:

 

QQ截图20210218103304


Հրապարակման ժամանակը` Փետրվար-18-2021