5 պարզ խորհուրդ PCR թիթեղների հետ աշխատելիս սխալները կանխելու համար

Պոլիմերազային շղթայական ռեակցիաները (PCR) կյանքի գիտության լաբորատորիաներում կիրառվող լայնորեն հայտնի մեթոդներից են:

PCR թիթեղները արտադրվում են առաջին կարգի պլաստմասսայից՝ նմուշների կամ հավաքված արդյունքների գերազանց մշակման և վերլուծության համար:

Նրանք ունեն բարակ և համասեռ պատեր՝ ճշգրիտ ջերմային փոխանցում ապահովելու համար:

Իրական ժամանակի կիրառման համար նախապատրաստվելիս ԴՆԹ-ի կամ ՌՆԹ-ի րոպեական հատվածը առանձնացվում և պահվում է PCR թիթեղներում:

PCR թիթեղները բարձր արդյունավետություն ունեն ջերմային կնքման մեջ և սահմանափակում են նաև ջերմության հոսքը:

Այնուամենայնիվ, որքան արդյունավետ և հուսալի են PCR թիթեղները, սխալներն ու անճշտությունները հեշտությամբ հայտնաբերվում են նմուշների մշակման ժամանակ:

Հետեւաբար, եթե դուք շահագրգռված եք ձեռք բերել լավ եւ բարձր որակPCR թիթեղներ.Իդեալական է կապ հաստատել PCR ափսեի հուսալի արտադրողի հետ: Դրանով դուք վստահ եք, որ կստանաք լավագույն գործարքը:

Ահա մի քանի նախազգուշական միջոցներ, որոնք պետք է հետևել՝ ռեագենտների կամ նմուշների աղտոտումից խուսափելու և արդյունքների մեջ անճշտությունները չհայտնվելու համար:

Շրջապատի ստերիլիզացում
Սխալ դրական կամ բացասական կողմերը առաջանում են կեղտերի առկայության պատճառով, ինչը ձեզ ստիպում է կասկածել արդյունքների վրա:

Կեղտերը և աղտոտիչները առաջանում են տարբեր ձևերով, ինչպիսիք են անկապ ԴՆԹ-ն կամ քիմիական հավելումները, որոնք ի վերջո նվազեցնում են ռեակցիայի արդյունավետությունն ու արդյունավետությունը:

Կան բազմաթիվ եղանակներ՝ զգալիորեն նվազեցնելու PCR ափսեի աղտոտման արագությունը:

Մանրէազերծված ֆիլտրերի ծայրերի օգտագործումը ևս մեկ օգտակար միջոց է՝ կանխելու աղտոտվածությունը ձեր նմուշների մեջ խողովակների միջոցով:

Բացառապես ՊՇՌ-ի օգտագործման համար տրամադրեք ամբողջովին մաքուր սարքավորումների հավաքածու, որը բաղկացած է պիպետներից և դարակաշարերից: Սա կերաշխավորի կեղտերի կամ աղտոտիչների աննշան տեղափոխում լաբորատորիայի շուրջ:

Օգտագործեք սպիտակեցնող նյութեր, էթանոլ խողովակների, դարակների և նստարանների վրա՝ աղտոտիչները մաքրելու համար:

Ձեր բոլոր PCR ռեակցիաների համար հատկացրեք պահպանված տարածք՝ մասնիկներով աղտոտվածությունը հետագայում նվազագույնի հասցնելու համար:

Օգտագործեք մաքուր ձեռնոցներ ամեն քայլափոխի և հաճախակի փոխեք դրանք:

PCR թիթեղներ
Ստուգեք կաղապարի համակենտրոնացումը և մաքրությունը:
ՊՇՌ-ով նմուշները վերլուծելիս օգտագործվող նստարանի և սարքավորումների մաքրությունը պետք է պահպանվի: Նախքան վերլուծությունը և մշակումը անհրաժեշտ է ստուգել նմուշների մաքրության աստիճանը:

Ընդհանուր առմամբ, անալիզատորները հաշվի են առնում ԴՆԹ-ի նմուշների կոնցենտրացիան և մաքրության մակարդակը:

Ձգտեք կլանման հարաբերակցությունը 260նմ/280նմ-ի համար չպետք է լինի 1,8-ից պակաս: Մինչդեռ ալիքի հետագա երկարությունը 230 նմ-ից 320 նմ-ի միջև օգտագործվում է կեղտերը հայտնաբերելու համար:

Օրինակ, քաոտրոպային աղերը և այլ օրգանական միացությունները հայտնաբերվում են 230 նմ կլանման արագությամբ: Մինչդեռ ԴՆԹ-ի նմուշների պղտորությունը նույնպես հայտնաբերվում և ստուգվում է 320 նմ կլանման արագությամբ:

Խուսափեք PCR թիթեղները արտադրանքով գերբեռնելուց
Որքան էլ որ ցանկալի է միաժամանակ մի քանի արտադրանք գործարկել, դա հանգեցնում է PCR թիթեղների խաչաձեւ աղտոտմանը:

PCR թիթեղների ծանրաբեռնումը տարբեր արտադրանքի թափոններով և չափազանց դժվարացնում է նմուշների պարզումը:

Պահպանեք Aliquot PCR ռեագենտների գրառումները
Շարունակական սառեցման/հալման ցիկլերը և մասնակի հաճախակի օգտագործումը կարող են վնասել PCR ռեակտիվները, ֆերմենտները և DNTP-ները՝ վերաբյուրեղացման միջոցով:

Միշտ ձգտեք վերահսկել օգտագործվող չափաբաժնի արագությունը վերլուծության ենթակա նմուշներ պատրաստելիս:

Նախընտրելի LIMS-ն ավելի հարմար է գույքագրումը և սառեցված կամ հալված ռեակտիվների և նմուշների քանակությունը վերահսկելու համար:

Ընտրեք հալման լավագույն ջերմաստիճանը:
Սխալ եռացման ջերմաստիճան ընտրելն ու օգտագործելը ևս մեկ մեթոդ է PCR-ի արդյունքները սխալ են պարունակում:

Երբեմն արձագանքը չի ընթանում այնպես, ինչպես նախատեսված էր: Հաջող ռեակցիան հեշտացնելու համար ցանկալի է նվազեցնել եռացման ջերմաստիճանը:

Այնուամենայնիվ, ջերմաստիճանի իջեցումը մեծացնում է կեղծ պոզիտիվների և այբբենարանի դիմերների տեսքի հավանականությունը:

Կարևոր է հաստատել հալման կորի վերլուծությունը PCR թիթեղները օգտագործելիս, քանի որ դա լավ ցուցանիշ է եռացման ճիշտ ջերմաստիճանը ընտրելու համար:

Primer-ի նախագծման ծրագրային ապահովումը օգնում է նախագծմանը, ճիշտ եռացման ջերմաստիճանի ապահովմանը և ուղղակիորեն նվազեցնում է PCR թիթեղների սխալը:

Բարձրորակ PCR ափսեի կարիք ունեք:
Եթե ​​դուք մտածում եք, թե որտեղ գտնել հուսալի արտադրողPCR թիթեղներ. Այլևս մի փնտրեք, քանի որ ճիշտ տեղում եք:

Սիրովսեղմեք այստեղ՝ մեզ հետ կապվելու համարբարձրորակ ապրանքների և ծառայությունների համար այնպիսի գնով, որը չի խանգարի բանկին: