Odsiječete livrh pipetekod pipetiranja glicerola? Jesam tijekom doktorata, ali sam morao naučiti da to povećava netočnost i nepreciznost mog pipetiranja. I da budem iskren, kad sam odrezao vrh, mogao sam i glicerol iz boce izravno natočiti u tubu. Stoga sam promijenio svoju tehniku kako bih poboljšao rezultate pipetiranja i dobio pouzdanije i ponovljivije rezultate pri radu s viskoznim tekućinama.
Kategorija tekućina na koju treba obratiti posebnu pozornost pri pipetiranju su viskozne tekućine. Oni se često koriste u laboratoriju, bilo u čistom obliku ili kao komponente pufera. Poznati predstavnici viskoznih tekućina u istraživačkim laboratorijima su glicerol, Triton X-100 i Tween® 20. No, i laboratoriji koji se bave kontrolom kvalitete hrane, kozmetike, farmaceutskih i drugih proizvoda široke potrošnje svakodnevno imaju posla s viskoznim otopinama.
Viskoznost se označava kao dinamička ili kinematička viskoznost. U ovom članku koncentriram se na dinamičku viskoznost tekućina budući da ona opisuje kretanje tekućine. Stupanj viskoznosti naveden je u milipaskalima po sekundi (mPa*s). Uzorci tekućine oko 200 mPa*s, kao što je 85 % glicerol, još uvijek se mogu prenijeti pomoću klasične pipete sa zračnim jastukom. Kada se primjenjuje posebna tehnika, obrnuto pipetiranje, aspiracija mjehurića zraka ili ostataka u vrhu se znatno smanjuje i dovodi do preciznijih rezultata pipetiranja. Ali ipak, to nije najbolje što možemo učiniti za poboljšanje pipetiranja viskoznih tekućina (vidi sl. 1).
Kada se viskoznost povećava, poteškoće se povećavaju. Srednje viskozne otopine do 1000 mPa*s teže je prenijeti klasičnim pipetama na zračnom jastuku. Zbog visokog unutarnjeg trenja molekula, viskozne tekućine imaju vrlo sporo tečenje i pipetiranje se mora izvoditi vrlo sporo i pažljivo. Tehnika obrnutog pipetiranja često nije dovoljna za točan prijenos tekućine i mnogi ljudi važu svoje uzorke. Ova strategija također znači uzimanje u obzir gustoće tekućine kao i laboratorijskih uvjeta kao što su vlažnost i temperatura kako bi se točno izračunao potreban volumen tekućine u težini. Stoga se preporučuju drugi alati za pipetiranje, tzv. alati s pozitivnim istiskivanjem. Imaju vrh s integriranim klipom, baš kao štrcaljka. Stoga se tekućina može lakše aspirirati i raspršiti uz točan prijenos tekućine. Posebna tehnika nije potrebna.
Unatoč tome, i alati s pozitivnim istiskivanjem dosežu granicu s vrlo viskoznim otopinama kao što su tekući med, krema za kožu ili određena mehanička ulja. Ove vrlo zahtjevne tekućine trebaju još jedan poseban alat koji također koristi princip pozitivne istiske, ali dodatno ima optimiziran dizajn za rad s visoko viskoznim otopinama. Ovaj poseban alat uspoređen je s postojećim vrhovima za pozitivno istiskivanje kako bi se dobio prag pri kojem je važno prijeći s normalnog vrha za doziranje na poseban vrh za visoko viskozne otopine. Pokazalo se da se točnost povećava, a sile potrebne za aspiraciju i raspršivanje smanjuju korištenjem posebnog vrha za visoko viskozne tekućine. Za daljnje detaljne informacije i primjere tekućina preuzmite Applicaton Note 376 o optimiziranim performansama za visoko viskozne tekućine.
Vrijeme objave: 23. siječnja 2023