Kako zatvoriti PCR ploču

Uvod

PCR ploče, glavni dio laboratorija dugi niz godina, postaju još rašireniji u modernom okruženju kako laboratoriji povećavaju svoju propusnost i sve više koriste automatizaciju unutar svojih radnih procesa. Postizanje ovih ciljeva uz očuvanje točnosti i integriteta eksperimenata može biti teško. Jedno od uobičajenih područja u koje se mogu uvući pogreške je brtvljenjePCR ploče, s lošom tehnikom koja dopušta isparavanje uzoraka, mijenja pH i stoga ometa enzimske funkcije i izaziva kontaminaciju. Učenje pečata aPCR pločaispravno uklanja te rizike i osigurava ponovljive rezultate.

Pronađite pravi pečat za svoju PCR ploču

Poklopci ploča naspram filmskih brtvi naspram poklopaca
kapedobar su način za čvrsto brtvljenje vaše ploče, dok vam i dalje daje fleksibilnost da vrlo jednostavno otpečatite i ponovno zatvorite ploču prema potrebi bez ikakvog otpada. Međutim, kape imaju nekoliko ključnih nedostataka.

Prvo, morat ćete kupiti odgovarajuću kapu koja je kompatibilna, što ih čini nesvestranim. Morat ćete se pobrinuti da kapa koju odaberete odgovara ploči, što ovisi o proizvođaču, i odaberite kupolastu ili ravnu na temelju termociklera koji koristite.

Drugo, nanošenje čepova na ploču može biti vrlo ponavljajuće i zamorno, s rizikom od unakrsne kontaminacije ako stavite krivi čep na krivu jažicu.

Dok su filmske brtve manje fleksibilne u smislu uklanjanja i zamjene, vrlo su svestrane jer odgovaraju bilo kojoj vrsti PCR ploče, bez obzira na to tko je proizvođač. Mogu se jednostavno izrezati na mjeru, što ih čini vrlo učinkovitima.

Druga mogućnost je poklopac tanjura. Oni nude manju zaštitu od čepova i brtvila i uglavnom se koriste samo za kratkotrajno pokrivanje kako bi se spriječila kontaminacija.

Optičko brtvljenje u odnosu na foliju

Bilo da vam je potrebna optička, prozirna brtva ilifilm od aluminijske folijeza zatvaranje vaše ploče odlučuje vaš eksperimentalni format.Filmovi za optičko brtvljenjeprozirni su kako bi vam omogućili promatranje uzoraka, a istovremeno ih zaštitili i spriječili isparavanje. Također su posebno korisni u qPCR eksperimentima koji uključuju vrlo precizna mjerenja fluorescencije izravno s ploče, u kojem slučaju trebat će vam film za brtvljenje koji filtrira što je moguće manje fluorescencije. Važno je osigurati da pečat ili kapica koju koristite ima dovoljno visoku razinu optičke jasnoće kako bi očitanja bila točna.

Folije su prikladne za sve uzorke koji su osjetljivi na svjetlo ili se čuvaju na temperaturi ispod 80°C. Iz tog razloga, većina uzoraka namijenjenih dugoročnom skladištenju zahtijevat će foliju. Folije se također mogu probušiti, što je korisno ili za ispitivanje pojedinačnih jažica ili za prijenos uzoraka iglama. To se može dogoditi ručno ili kao dio robotske platforme.

Također uzmite u obzir da će agresivne tvari koje uključuju kiseline, baze ili otapala zahtijevati brtvu koja ih može izdržati, u kojem slučaju je brtva od folije vjerojatno prikladnija.

Ljepilo naspram filma za toplinsko brtvljenje
Brtve ljepljivom folijomvrlo su jednostavni i lako se primjenjuju. Sve što trebate je da korisnik nanese pečat na ploču i upotrijebi jednostavan alat za nanošenje kako bi pritisnuo prema dolje i napravio čvrsto brtvljenje.

Toplinske brtve su naprednije, osiguravaju dugotrajniju brtvu koja ima smanjene stope isparavanja u usporedbi s konvencionalnim ljepljivim brtvama. Ova je opcija prikladna ako želite dugoročno pohraniti uzorke, iako to dolazi s dodatnim zahtjevom za opremu za pečaćenje ploča.

Kako zatvoriti PCR ploču

Metoda brtvljenja ploče

Samoljepljiva

1. Provjerite radite li na ravnoj i stabilnoj radnoj površini

2. Izvadite foliju iz pakiranja i uklonite podlogu

3. Pažljivo postavite brtvu na ploču, pritom pazeći da su sve jažice pokrivene

4. Upotrijebite alat za nanošenje da pritisnete ploču. Počnite od jednog kraja i prijeđite na drugi, ravnomjerno pritiskajući

5. Ponovite ovo više puta

6. Prođite aplikatorom oko vanjskih jažica kako biste bili sigurni da su i one dobro zatvorene.

Toplinske brtve

Toplinsko brtvljenje funkcionira tako da se film topi na rubu svake jažice, uz pomoć ploče za brtvljenje. Za rad uređaja za toplinsko spajanje, pogledajte upute proizvođača opreme. Provjerite je li proizvođač od kojeg nabavljate svoju opremu ugledan, jer je vrlo važno da je brtva ispravna, učinkovita i vodonepropusna.

Gornji savjeti za brtvljenje ploča

a. Kada vršite pritisak na brtvu, idite u vodoravnom i okomitom smjeru kako biste osigurali pravilno brtvljenje

b. Uvijek je dobra praksa pokrenuti probni rad bez obzira na to što radite, a to nije ništa drugačije s brtvljenjem ploča. Testirajte s praznom pločom prije nego što upotrijebite onu s uzorcima.

c. Prilikom testiranja skinite pečat i provjerite je li ljepilo pravilno zalijepljeno, bez praznina. Postoji vizualni prikaz toga u prvom referentnom dokumentu. Ako niste pravilno zalijepili ploču, kada uklonite ploču, ostat će praznine na kojima se ljepilo nije u potpunosti zalijepilo za ploču.

d. Za otpremu i transport uzoraka, možda će vam biti od pomoći primijeniti plastični pečat na vrh folije za dodatnu zaštitu (osobito od probijanja).

e. Uvijek provjerite da nema neravnina ili nabora prilikom nanošenja filma – oni će uzrokovati curenje i isparavanje