Što su kriovijale?
Bočice za kriogeno skladištenjesu mali cilindrični spremnici s poklopcem i dizajnirani za pohranjivanje i očuvanje uzoraka na ultra-niskim temperaturama. Iako su se ove bočice tradicionalno izrađivale od stakla, sada se mnogo češće izrađuju od polipropilena zbog praktičnosti i troškova. Krioviale su pomno dizajnirane da izdrže temperature čak do -196 ℃ i da prihvate širok raspon tipova stanica. Oni variraju od dijagnostičkih matičnih stanica, mikroorganizama, primarnih stanica do uspostavljenih staničnih linija. Osim toga, mogu postojati mali višestanični organizmi koji su pohranjeni unutrabočice za kriogeno skladištenje, kao i nukleinske kiseline i proteine koji se moraju čuvati na niskim temperaturama skladištenja.
Bočice za kriogeno skladištenje dolaze u različitim oblicima, a pronalaženje odgovarajućeg tipa koji ispunjava sve vaše potrebe osigurat će vam održavanje integriteta uzorka bez preplaćivanja. Pročitajte naš članak kako biste saznali više o ključnim razmatranjima pri kupnji pri odabiru prave krioviale za vašu laboratorijsku primjenu.
Svojstva kriogene bočice za razmatranje
Vanjske vs unutarnje niti
Ljudi često donose ovaj izbor na temelju osobnih preferencija, ali zapravo postoje ključne funkcionalne razlike koje treba uzeti u obzir između dvije vrste niti.
Mnogi se laboratoriji često odlučuju za bočice s unutarnjim navojem kako bi smanjili prostor za pohranjivanje cijevi kako bi se omogućilo bolje uklapanje u kutije za zamrzavanje. Unatoč tome, možete smatrati da je opcija s vanjskim navojem bolja opcija za vas. Smatra se da nose manji rizik od kontaminacije, zbog dizajna koji čini još težim da išta osim uzorka uđe u bočicu.
Bočice s vanjskim navojem općenito se preferiraju za genomske primjene, ali obje se opcije smatraju prikladnima za biobankarstvo i druge visokoproduktivne primjene.
Posljednja stvar koju treba uzeti u obzir u vezi s navojem - ako vaš laboratorij koristi automatizaciju, možda ćete morati razmotriti koji se navoj može koristiti s hvataljkama instrumenata.
Volumen pohrane
Kriogene bočice dostupne su u različitim veličinama za pokrivanje većine potreba, ali uglavnom se kreću između kapaciteta od 1 mL do 5 mL.
Ključno je osigurati da vaša krioviala nije prepunjena i da ima dodatnog prostora za slučaj da uzorak nabubri tijekom smrzavanja. U praksi to znači da se laboratoriji odlučuju za bočice od 1 mL kada pohranjuju uzorke od 0,5 mL stanica suspendiranih u krioprotektantu, te za bočice od 2,0 mL za 1,0 mL uzorka. Još jedan savjet kako ne prepuniti svoje bočice jest da koristite kriobiale s stupnjevanim oznakama, koje će spriječiti oticanje koje bi moglo uzrokovati pucanje ili curenje.
Čep na navoj protiv preklopnog vrha
Vrsta vrha koju odaberete ovisi uglavnom o tome hoćete li koristiti tekući dušik ili ne. Ako jeste, trebat će vam kriovijele s navojnim čepom. To osigurava da se ne mogu slučajno otvoriti zbog pogrešnog rukovanja ili promjena temperature. Osim toga, čepovi s navojem omogućuju lakše vađenje iz kriogenih kutija i učinkovitije skladištenje.
Međutim, ako ne koristite tekući dušik i trebate praktičniji poklopac koji se lakše otvara, tada je poklopac na preklop bolja opcija. To će vam uštedjeti puno vremena jer ga je mnogo lakše otvoriti, što ga čini osobito korisnim u operacijama veće propusnosti i onima koje koriste skupne procese.
Sigurnost pečata
Najbolji način da osigurate sigurno brtvljenje je da budete sigurni da su vaša kriovijalna kapica i bočica izrađene od istog materijala. To će osigurati da se zajedno skupljaju i šire. Ako su izrađeni od različitih materijala, tada će se skupljati i širiti različitim brzinama s promjenama temperature, vodećim prazninama i potencijalnim curenjem i posljedičnom kontaminacijom.
Neke tvrtke nude dvostruke podloške i prirubnicu za najvišu razinu sigurnosti uzorka na kriovijalama s vanjskim navojem. Krioviale s O-prstenom smatraju se najpouzdanijima za kriovijale s unutarnjim navojem.
Staklo protiv plastike
Zbog sigurnosti i praktičnosti, mnogi laboratoriji sada koriste plastiku, obično polipropilen, umjesto staklenih ampula koje se mogu zavariti toplinom. Staklene ampule sada se smatraju zastarjelim izborom budući da se tijekom procesa zatvaranja mogu pojaviti nevidljiva curenja, koja kada se odmrznu nakon skladištenja u tekućem dušiku mogu uzrokovati njihovu eksploziju. Također nisu toliko prikladni za moderne tehnike označavanja, što je ključno za osiguranje sljedivosti uzorka.
Samostojeći vs zaobljena dna
Kriogene bočice dostupne su kao samostojeće sa dnom u obliku zvijezde ili kao zaobljene dna. Ako trebate postaviti bočice na površinu, svakako odaberite samostojeće
Sljedivost i praćenje uzoraka
Ovo područje kriogenog skladištenja često se zanemaruje, ali praćenje uzoraka i sljedivost je ključni aspekt koji treba uzeti u obzir. Kriogeni uzorci mogu se pohranjivati godinama, tijekom kojeg vremenskog razdoblja osoblje se može promijeniti i bez pravilnog održavanja evidencije mogu postati neidentificirani.
Svakako odaberite bočice koje identifikuju uzorak što je moguće lakše. Stvari na koje trebate paziti uključuju:
Velika područja za pisanje za bilježenje dovoljno pojedinosti kako bi se zapisi mogli pronaći ako se bočica nalazi na netočnom mjestu – obično su odgovarajući identitet ćelije, datum zamrzavanja i inicijali odgovorne osobe.
Crtični kodovi za pomoć pri upravljanju uzorcima i sustavima praćenja
Kapice u boji
Napomena za budućnost – razvijaju se čipovi otporni na ultra hladnoću koji bi, kada se postave unutar pojedinačnih krioviala, potencijalno mogli pohraniti detaljnu toplinsku povijest kao i detaljne informacije o serijama, rezultate ispitivanja i drugu relevantnu dokumentaciju o kvaliteti.
Uz razmatranje različitih specifikacija dostupnih bočica, također je potrebno malo razmisliti o tehničkom procesu pohranjivanja krioviala u tekućem dušiku.
Temperatura skladištenja
Postoji nekoliko metoda za kriogeno skladištenje uzoraka, a svaka radi na određenoj temperaturi. Opcije i temperatura na kojoj rade uključuju:
Tekuća faza LN2: održavajte temperaturu od -196 ℃
Parna faza LN2: mogu raditi na određenim temperaturnim rasponima između -135°C i -190°C, ovisno o modelu.
Zamrzivači s dušikovom parom: -20°C do -150°C
Vrsta stanica koje se pohranjuju i metoda pohranjivanja koju istraživač preferira odredit će koju od tri dostupne opcije koristi vaš laboratorij.
Međutim, zbog iznimno niskih temperatura koje se koriste, neće sve cijevi ili dizajni biti prikladni ili sigurni. Materijali mogu postati izuzetno lomljivi na ekstremno niskim temperaturama, korištenje bočice koja nije prikladna za upotrebu na odabranoj temperaturi može uzrokovati razbijanje ili pucanje posude tijekom skladištenja ili odmrzavanja.
Pažljivo provjerite preporuke proizvođača o pravilnoj uporabi jer su neke kriogene bočice prikladne za temperature do -175°C, neke -150°C, druge samo 80°C.
Također je vrijedno napomenuti da mnogi proizvođači navode da njihove kriogene bočice nisu prikladne za uranjanje u tekuću fazu. Ako se te bočice pohrane u tekućoj fazi pri vraćanju na sobnu temperaturu, te se bočice ili njihove brtve na poklopcima mogu razbiti zbog brzog povećanja tlaka uzrokovanog malim curenjem.
Ako se stanice pohranjuju u tekućoj fazi tekućeg dušika, razmislite o pohranjivanju stanica u odgovarajućim kriogenim bočicama toplinski zatvorenim u cryoflex cijevima ili o pohranjivanju stanica u staklenim ampulama koje su hermetički zatvorene.
Vrijeme objave: 25. studenoga 2022