Laboratorijski stručnjaci mogu svaki dan provesti sate držeći mikropipetu, a poboljšanje učinkovitosti pipetiranja i osiguravanje pouzdanih rezultata često je izazov. Odabir prave mikropipete za bilo koju primjenu ključan je za uspjeh laboratorijskog rada; ne samo da osigurava izvedbu bilo kojeg eksperimenta, već također povećava učinkovitost. Razumijevanje potreba tijeka pipetiranja omogućuje korisnicima odabir točnih i ponovljivih pipeta, ali postoje mnogi drugi čimbenici koje treba uzeti u obzir kako bi se poboljšali rezultati pipetiranja i zajamčio uspjeh eksperimenti.
Općenito govoreći, tekućine spadaju u tri glavne kategorije: vodene, viskozne i hlapljive. Većina tekućina je na bazi vode, što čini pipete za istiskivanje zraka prvim izborom za mnoge. Dok većina tekućina dobro funkcionira s ovom vrstom pipete, volumetrijske pipete treba izabrati kada rad s vrlo viskoznim ili hlapljivim tekućinama. Razlike između ovih vrsta pipeta prikazane su na slici 1. Također je važno koristiti ispravnu tehniku pipetiranja – bez obzira tekućeg tipa – za izvrsne rezultate.
Dva najkritičnija parametra koji utječu na rezultate pipetiranja su točnost i preciznost (Slika 2). Kako bi se postigla maksimalna točnost, preciznost i pouzdanost pipetiranja, treba imati na umu nekoliko kriterija. Kao pravilo, korisnik uvijek treba odabrati najmanju pipetu koji može podnijeti željeni volumen prijenosa. Ovo je važno jer se točnost smanjuje kako se postavljeni volumen približava minimalnom volumenu pipete. Na primjer, ako dozirate 50 µl s pipetom od 5000 µl, rezultati mogu biti loši. Bolji rezultati mogu se dobiti s pipetama od 300 µl, dok pipete od 50 µl daju najbolje rezultate. Osim toga, volumen postavljen na tradicionalnim ručnim pipetama može se promijeniti tijekom pipetiranja zbog slučajnog okretanja klip. Zbog toga su neki proizvođači pipeta razvili dizajn za zaključavanje prilagodbe volumena kako bi spriječili nenamjerne promjene tijekom pipetiranja kako bi se dodatno osigurala točnost. Kalibracija je još jedan važan aspekt koji pomaže jamčiti pouzdane rezultate demonstrirajući točnost i preciznost pipete. Ovaj bi postupak trebao biti jednostavan za korisnika; na primjer, neke elektroničke pipete mogu postaviti podsjetnike za kalibraciju ili spremiti povijest kalibracije. Ne treba uzeti u obzir samo pipete. Ako se vrh pipete olabavi, iscuri ili padne, može uzrokovati različite probleme. Ovaj uobičajeni problem u laboratoriju često je uzrokovano upotrebom vrhova pipete opće namjene, koji često zahtijevaju "lupkanje". Ovaj proces rasteže rub vrha pipete i može uzrokovati vrh curi ili se zaturi, ili čak uzrokuje da vrh potpuno padne s pipete. Odabir visokokvalitetne mikropipete dizajnirane sa specifičnim vrhovima osigurava sigurniju vezu, pruža višu razinu pouzdanosti i bolje rezultate. Osim toga, nešto tako jednostavno kao pipete i vrhovi označeni bojama također mogu pomoći korisnicima da osiguraju odabir ispravnih vrhova za svoje pipete.
U okruženju visoke propusnosti važno je biti što učinkovitiji uz održavanje pouzdanosti i dosljednosti procesa pipetiranja. Postoji mnogo načina za poboljšanje učinkovitosti pipetiranja, uključujući upotrebu višekanalnih i/ili elektroničkih pipeta. Ovi svestrani instrumenti često nude nekoliko različitih načina pipetiranja—kao što je obrnuto pipetiranje, varijabilno doziranje, programirana serijska razrjeđivanja i više—kako bi se postupak pojednostavio. Na primjer, postupci poput ponovljeno doziranje idealno je za doziranje više alikvota istog volumena bez ponovnog punjenja vrha. Korištenje jednokanalnih pipeta za prijenos uzoraka između različitih formata laboratorijskog pribora može brzo postati vrlo zamorno i sklono pogreškama. Višekanalne pipete omogućuju prijenos više uzoraka odjednom u treptaj oka. Ovo ne samo da povećava učinkovitost, već pomaže u sprječavanju pogrešaka pipetiranja i ozljeda od ponavljajućeg naprezanja (RSI). Neke pipete čak imaju mogućnost mijenjanja razmaka vrhova tijekom pipetiranja, omogućujući paralelne prijenose više uzoraka između različitih veličina i formata laboratorijskog pribora, štedeći sate vremena (Slika 3).
Laboratorijski stručnjaci obično provode sate dnevno pipetirajući. To može uzrokovati nelagodu, a u težim slučajevima čak i ozljedu šake ili ruke. Najbolji savjet za izbjegavanje ovih potencijalnih rizika je smanjiti vrijeme držanja pipete na najkraće moguće vrijeme .Osim toga, korisnici bi trebali odabrati laganu i dobro uravnoteženu mikropipetu s masom u sredini za bolju stabilnost. Pipeta bi trebala udobno stajati u rukama ljevaka i dešnjaka korisnici, imaju dobar dizajn za držanje i prilagođavaju glasnoću što je udobnije i brže moguće kako bi se izbjeglo nepotrebno pomicanje. Također, vrhovi su važni, budući da umetanje i izbacivanje vrha često zahtijeva više sile od pipetiranja i postoji potencijalni rizik od ozljeda, posebno u postavkama visoke propusnosti. Vrhovi pipeta trebali bi sjednuti na mjesto uz minimalnu silu, osigurati sigurnu vezu i jednako ih je lako izbaciti.
Prilikom odabira prave mikropipete za vašu primjenu, važno je sagledati svaki aspekt vašeg tijeka rada. Uzimajući u obzir pipetu, njezine karakteristike, vrstu i volumen tekućine koja se pipetira te korištene vrhove, znanstvenici mogu jamčiti točne, precizne i pouzdane rezultate uz održavanje produktivnosti i smanjenje rizika od ozljeda.
U ovom izdanju, obnavljanje osnovnih analita procjenjuje se pomoću HPLC-MS pomoću SPE mikroploča s jakom kationskom izmjenom miješanog načina rada. Prednosti SEC-MALLS-a u biofarmaceutskim primjenama…
International Labmate Limited Oak Court Business Center Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH Ujedinjeno Kraljevstvo
Vrijeme objave: 10. lipnja 2022