Cov txheej txheem ntawm cov txheej txheem suav nrog lawv qhov kev ua kom zoo dua qub thiab kev tsim kho tom ntej thiab kev sib haum xeeb, tso cai rau kev ua haujlwm ntev mus ntev - ywj siab ntawm tus neeg siv. Standardization ua kom cov txiaj ntsig zoo, nrog rau lawv cov khoom tsim tawm thiab kev sib piv.
Lub hom phiaj ntawm (classic) PCR yog tiam ntawm kev txhim khu kev qha thiab rov tsim dua tshiab. Rau qee yam kev siv, cov tawm los ntawm covPCR khoomkuj muaj feem xyuam. Rau cov kev tshwm sim no, yuav tsum tau saib xyuas kom ntseeg tau tias cov qauv tsis raug cuam tshuam thiab tias PCR workflow tseem ruaj khov. Tshwj xeeb, qhov no txhais tau tias txo qis qhov kev taw qhia ntawm cov kab mob sib kis uas tuaj yeem ua rau muaj qhov tsis zoo lossis tsis muaj qhov tsis zoo lossis txawm tias inhibit PCR cov tshuaj tiv thaiv. Tsis tas li ntawd, cov tshuaj tiv thaiv yuav tsum zoo ib yam li qhov ua tau rau txhua tus qauv hauv ib qho kev khiav thiab tseem tuaj yeem hloov mus rau cov kev tshwm sim tom ntej (ntawm tib txoj kev). Qhov no yog hais txog qhov muaj pes tsawg leeg ntawm cov tshuaj tiv thaiv nrog rau hom kev tswj qhov kub thiab txias hauv lub cycler. Cov neeg siv yuam kev, ntawm chav kawm, yuav tsum zam kom ntau li ntau tau.
Hauv qab no, peb yuav qhia txog cov teeb meem uas tau ntsib thaum npaj thiab thoob plaws hauv kev ua haujlwm ntawm PCR - thiab cov txheej txheem rau cov kev daws teeb meem uas muaj nyob nrog rau cov cuab yeej siv thiab cov khoom siv siv rau kev ua qauv ntawm PCR workflows.
Kev npaj tshuaj tiv thaiv
Kev xa tawm cov tshuaj tiv thaiv rau hauv PCR-cov nkoj, lossis cov phaj, feem, muaj ntau yam kev sib tw uas yuav tsum tau kov yeej:
Cov xwm txheej tshwm sim
Qhov tseeb thiab meej koob tshuaj ntawm tus kheej cov khoom yog qhov tseem ceeb thaum tsom rau cov xwm txheej zoo sib xws tshaj plaws. Ntxiv nrog rau cov txheej txheem zoo pipetting, xaiv cov cuab yeej zoo yog qhov tseem ceeb. PCR master-mixes nquag muaj cov tshuaj uas ua rau kom muaj viscosity lossis ua npuas dej. Thaum lub sij hawm pipetting txheej txheem, cov no ua rau muaj ntau wetting ntawm lubcov lus qhia pipette, yog li txo qhov raug pipetting. Kev siv cov tshuab xa ncaj qha lossis lwm cov lus qhia pipette uas tsis tshua muaj kev ntub dej tuaj yeem txhim kho qhov tseeb thiab qhov tseeb ntawm cov txheej txheem pipetting.
Cov kab mob sib kis
Thaum lub sij hawm dispensing txheej txheem, aerosols yog generated uas, yog hais tias tso cai mus txog rau hauv lub pipette, muaj peev xwm yuav kis tau lwm tus qauv nyob rau hauv lub tom ntej no pipetting kauj ruam. Qhov no tuaj yeem tiv thaiv tau los ntawm kev siv cov lus qhia lim lossis cov tshuab xa tawm ncaj qha.
Consumables xws litswv yim, cov hlab ntsha thiab daim hlau uas siv rau hauv PCR workflow yuav tsum tsis muaj cov khoom uas cuam tshuam cov qauv los yog cuav qhov tshwm sim. Cov no suav nrog DNA, DNases, RNases thiab PCR inhibitors, nrog rau cov khoom uas muaj peev xwm ua kom muaj dej los ntawm cov khoom thaum cov tshuaj tiv thaiv - cov khoom hu ua leachables.
Tus neeg siv yuam kev
Cov qauv ua tiav ntau dua, qhov kev pheej hmoo yuam kev ntau dua. Nws tuaj yeem tshwm sim tau yooj yim tias tus qauv yog pipetted mus rau hauv lub nkoj tsis ncaj ncees lawm lossis qhov tsis zoo. Qhov kev pheej hmoo no tuaj yeem txo qis los ntawm kev pom tau yooj yim ntawm cov qhov dej. Los ntawm automation ntawm dispensing cov kauj ruam, "tib neeg yam khoom", piv txwv li, kev ua yuam kev thiab cov neeg siv cov kev hloov pauv, raug txo kom tsawg, yog li ua rau rov tsim dua tshiab, tshwj xeeb tshaj yog nyob rau hauv cov ntaub ntawv ntawm cov tshuaj tiv thaiv me me. Qhov no yuav tsum muaj cov phiaj xwm kev ruaj ntseg txaus los ua haujlwm hauv chaw ua haujlwm. Txuas barcodes muab lub tshuab nyeem ntawv ntxiv, uas yooj yim rau kev taug qab cov qauv thoob plaws hauv tag nrho cov txheej txheem.
Programming ntawm thermocycler
Programming ib qho cuab yeej tuaj yeem ua pov thawj tias siv sijhawm ntev thiab ua yuam kev. Txawv PCR thermal cycler nta ua haujlwm ua ke kom yooj yim cov txheej txheem no thiab, qhov tseem ceeb tshaj plaws, ua kom nws muaj kev nyab xeeb:
Kev ua haujlwm yooj yim thiab kev taw qhia zoo rau cov neeg siv yog lub hauv paus ntawm kev ua haujlwm tau zoo. Tsim los ntawm lub hauv paus no, tus neeg siv kev tiv thaiv tus password yuav tiv thaiv ib tus kheej cov kev pab cuam los ntawm kev hloov pauv los ntawm lwm tus neeg siv. Yog tias siv ntau lub voj voog (ntawm tib hom) siv, nws yog qhov zoo yog tias qhov kev pab cuam tuaj yeem xa ncaj qha los ntawm ib lub twj paj nruag mus rau lwm qhov ntawm USB lossis kev sib txuas. Khoos phis tawj software ua rau lub hauv paus thiab kev ruaj ntseg ntawm cov kev pab cuam, cov neeg siv txoj cai thiab cov ntaub ntawv ntawm lub computer.
PCR khiav
Thaum lub sij hawm khiav, DNA yog amplified nyob rau hauv cov tshuaj tiv thaiv hlab ntsha, qhov twg txhua tus qauv yuav tsum tau mus rau ib tug zoo tib yam, zoo ib yam tshuaj tiv thaiv tej yam kev mob. Cov nram qab no muaj feem xyuam rau cov txheej txheem:
Kev tswj qhov kub thiab txias
Qhov raug zoo heev hauv kev tswj qhov kub thiab txias thiab homogeneity ntawm cycler block yog lub hauv paus rau txawm tias qhov kub thiab txias ntawm tag nrho cov qauv. Qhov zoo ntawm cov cua sov thiab cua txias (peltier ntsiab), nrog rau txoj hauv kev uas cov no txuas nrog lub thaiv, yog cov kev txiav txim siab uas yuav txiav txim siab qhov kev pheej hmoo ntawm qhov kub tsis sib xws hu ua "ntug nyhuv"
Evaporation
Qhov concentrations ntawm tus kheej cov tshuaj tiv thaiv yuav tsum tsis txhob hloov thaum lub sij hawm cov tshuaj tiv thaiv vim evaporation. Txwv tsis pub, nws muaj peev xwm tsawg heevPCR khoomtej zaum yuav raug generated, los yog tsis muaj kiag li. Yog li ntawd, nws yog ib qho tseem ceeb kom txo qis evaporation los ntawm kev ua kom muaj kev ruaj ntseg foob. Nyob rau hauv cov ntaub ntawv no, lub rhuab hau ntawm lub thermocycler thiab lub foob ntawm lub nkoj ua hauj lwm nyob rau hauv tes. Kev xaiv sealing sib txawv muaj rauPCR daim hlau (txuas ntxiv: Cov lus sib khi), uas yog qhov zoo tshaj plaws foob tau ua tiav los ntawm kev sib khi thaum tshav kub kub. Lwm qhov kev kaw kuj tseem tsim nyog, tsuav yog qhov kev sib cuag ntawm lub hau cycler tuaj yeem hloov kho rau lub foob xaiv.
Cov txheej txheem txheej txheem yog nyob rau hauv qhov chaw txhawm rau tiv thaiv qhov tseeb thiab rov tsim dua cov txiaj ntsig hauv lub sijhawm ntev. Qhov no suav nrog kev saib xyuas cov khoom siv tsis tu ncua kom ntseeg tau tias nws ib txwm ua haujlwm zoo. Tag nrho cov khoom siv yuav tsum muaj qhov zoo sib xws ntawm txhua qhov ntau tsim, thiab lawv cov khoom siv tau zoo yuav tsum tau lav.
Post lub sij hawm: Nov-29-2022