अपनी प्रयोगशाला के लिए सही क्रायोजेनिक भंडारण शीशी का चयन कैसे करें

क्रायोवियल क्या हैं?

क्रायोजेनिक भंडारण शीशियाँछोटे, ढक्कनदार और बेलनाकार कंटेनर होते हैं जिन्हें अति-निम्न तापमान पर नमूनों के भंडारण और संरक्षण के लिए डिज़ाइन किया गया है। हालाँकि परंपरागत रूप से ये शीशियाँ कांच से बनाई जाती रही हैं, लेकिन अब सुविधा और लागत कारणों से इन्हें आमतौर पर पॉलीप्रोपाइलीन से बनाया जाता है। क्रायोवियल्स को -196℃ तक के न्यूनतम तापमान को झेलने और विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं को समायोजित करने के लिए सावधानीपूर्वक डिजाइन किया गया है। ये निदान स्टेम कोशिकाओं, सूक्ष्मजीवों, प्राथमिक कोशिकाओं से लेकर स्थापित कोशिका रेखाओं तक भिन्न होते हैं। इसके अलावा, छोटे बहुकोशिकीय जीव भी हो सकते हैं जो भीतर संग्रहीत हैंक्रायोजेनिक भंडारण शीशियाँ, साथ ही न्यूक्लिक एसिड और प्रोटीन जिन्हें क्रायोजेनिक भंडारण तापमान स्तर पर संग्रहित करने की आवश्यकता होती है।

क्रायोजेनिक भंडारण शीशियाँ विभिन्न रूपों में आती हैं, और आपकी सभी आवश्यकताओं को पूरा करने वाले सही प्रकार का पता लगाने से यह सुनिश्चित हो जाएगा कि आप बिना अधिक भुगतान किए नमूना अखंडता बनाए रखेंगे। अपने प्रयोगशाला अनुप्रयोग के लिए सही क्रायोवियल का चयन करते समय खरीदारी संबंधी मुख्य बातों के बारे में अधिक जानने के लिए हमारा लेख पढ़ें।

विचार करने योग्य क्रायोजेनिक शीशी के गुण

बाहरी बनाम आंतरिक धागे

लोग अक्सर व्यक्तिगत पसंद के आधार पर यह चुनाव करते हैं, लेकिन वास्तव में दोनों प्रकार के धागों के बीच विचार करने के लिए महत्वपूर्ण कार्यात्मक अंतर हैं।

कई प्रयोगशालाएँ अक्सर फ्रीजर बक्सों में बेहतर फिट की अनुमति देने के लिए ट्यूब भंडारण स्थान को कम करने के लिए आंतरिक रूप से थ्रेडेड शीशियों का विकल्प चुनती हैं। इसके बावजूद, आप यह मान सकते हैं कि बाहरी रूप से थ्रेडेड विकल्प आपके लिए बेहतर विकल्प है। ऐसा माना जाता है कि इनमें संदूषण का जोखिम कम होता है, डिज़ाइन के कारण नमूने के अलावा किसी अन्य चीज़ का शीशी में प्रवेश करना और भी कठिन हो जाता है।

बाहरी रूप से पिरोई गई शीशियों को आम तौर पर जीनोमिक अनुप्रयोगों के लिए पसंद किया जाता है, लेकिन बायोबैंकिंग और अन्य उच्च थ्रूपुट अनुप्रयोगों के लिए किसी भी विकल्प को उपयुक्त माना जाता है।

थ्रेडिंग पर विचार करने वाली एक आखिरी बात - यदि आपकी प्रयोगशाला स्वचालन का उपयोग करती है, तो आपको यह विचार करने की आवश्यकता हो सकती है कि उपकरण ग्रिपर के साथ किस धागे का उपयोग किया जा सकता है।

भंडारण की मात्रा

अधिकांश जरूरतों को पूरा करने के लिए क्रायोजेनिक शीशियाँ विभिन्न आकारों में उपलब्ध हैं, लेकिन अधिकतर उनकी क्षमता 1 एमएल और 5 एमएल के बीच होती है।

मुख्य बात यह सुनिश्चित करना है कि आपका क्रायोवियल अधिक न भरा हो और यदि जमने के दौरान नमूना फूल जाए तो अतिरिक्त जगह उपलब्ध हो। व्यवहार में, इसका मतलब यह है कि क्रायोप्रोटेक्टेंट में निलंबित कोशिकाओं के 0.5 एमएल के नमूने संग्रहीत करते समय प्रयोगशालाएं 1 एमएल शीशियों का चयन करती हैं, और 1.0 एमएल नमूने के लिए 2.0 एमएल शीशियों का चयन करती हैं। अपनी शीशियों को जरूरत से ज्यादा न भरने के लिए एक और युक्ति यह है कि आप स्नातक चिह्नों के साथ क्रायोवियल का उपयोग करें, जो यह सुनिश्चित करेगा कि आप किसी भी सूजन को रोकें जो दरार या रिसाव का कारण बन सकती है।

स्क्रू कैप बनाम फ्लिप टॉप

आपके द्वारा चुने गए शीर्ष का प्रकार मुख्य रूप से इस बात पर निर्भर करता है कि आप तरल चरण नाइट्रोजन का उपयोग करेंगे या नहीं। यदि आप हैं, तो आपको स्क्रू कैप्ड क्रायोवियल की आवश्यकता होगी। इससे यह सुनिश्चित होता है कि गलत संचालन या तापमान परिवर्तन के कारण वे गलती से नहीं खुल सकते। इसके अतिरिक्त, स्क्रू कैप क्रायोजेनिक बक्से से आसानी से पुनर्प्राप्ति और अधिक कुशल भंडारण की अनुमति देते हैं।

हालाँकि, यदि आप तरल चरण नाइट्रोजन का उपयोग नहीं कर रहे हैं और अधिक सुविधाजनक टॉप की आवश्यकता है जिसे खोलना आसान हो, तो फ्लिप टॉप बेहतर विकल्प है। इससे आपका काफी समय बचेगा क्योंकि इसे खोलना बहुत आसान है, जो उच्च थ्रूपुट संचालन और बैच प्रक्रियाओं का उपयोग करने वालों के लिए विशेष रूप से उपयोगी है।

सील सुरक्षा

सुरक्षित सील सुनिश्चित करने का सबसे अच्छा तरीका यह सुनिश्चित करना है कि आपकी क्रायोवियल कैप और बोतल दोनों एक ही सामग्री से बनी हों। इससे यह सुनिश्चित होगा कि वे एक साथ सिकुड़ें और विस्तारित हों। यदि वे अलग-अलग सामग्रियों का उपयोग करके बनाए गए हैं, तो तापमान में बदलाव के कारण वे अलग-अलग दरों पर सिकुड़ेंगे और विस्तारित होंगे, जिससे अंतराल और संभावित रिसाव होगा और परिणामस्वरूप संदूषण होगा।

कुछ कंपनियाँ बाहरी रूप से थ्रेडेड क्रायोवियल पर उच्चतम स्तर की नमूना सुरक्षा के लिए दोहरे वॉशर और फ़्लैंज की पेशकश करती हैं। आंतरिक रूप से पिरोए गए क्रायोवियल के लिए ओ-रिंग क्रायोवियल को सबसे विश्वसनीय माना जाता है।

ग्लास बनाम प्लास्टिक

सुरक्षा और सुविधा के लिए, कई प्रयोगशालाएँ अब हीट-सीलेबल ग्लास एम्प्यूल्स के बजाय प्लास्टिक, आमतौर पर पॉलीप्रोपाइलीन का उपयोग करती हैं। ग्लास एम्प्यूल्स को अब एक पुरानी पसंद माना जाता है क्योंकि सीलिंग प्रक्रिया के दौरान अदृश्य पिनहोल लीक विकसित हो सकता है, जो तरल नाइट्रोजन में भंडारण के बाद पिघलने पर उनमें विस्फोट हो सकता है। वे आधुनिक लेबलिंग तकनीकों के लिए भी उपयुक्त नहीं हैं, जो नमूना ट्रेसबिलिटी सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है।

सेल्फ स्टैंडिंग बनाम राउंडेड बॉटम्स

क्रायोजेनिक शीशियाँ तारे के आकार की तली के साथ स्व-खड़ी, या गोल तली के रूप में उपलब्ध हैं। यदि आपको अपनी शीशियों को किसी सतह पर रखना है तो सेल्फ-स्टैंडिंग का चयन करना सुनिश्चित करें

पता लगाने की क्षमता और नमूना ट्रैकिंग

क्रायोजेनिक भंडारण के इस क्षेत्र को अक्सर नजरअंदाज कर दिया जाता है लेकिन नमूना ट्रैकिंग और पता लगाने की क्षमता पर विचार करना एक महत्वपूर्ण पहलू है। क्रायोजेनिक नमूनों को कई वर्षों तक संग्रहीत किया जा सकता है, जिस समयावधि में कर्मचारी बदल सकते हैं और उचित रूप से बनाए गए रिकॉर्ड के बिना वे अज्ञात हो सकते हैं।

ऐसी शीशियों का चयन करना सुनिश्चित करें जो नमूना पहचान को यथासंभव आसान बनाती हों। जिन चीज़ों पर आपको ध्यान देना चाहिए उनमें शामिल हैं:

पर्याप्त विवरण रिकॉर्ड करने के लिए बड़े लेखन क्षेत्र ताकि यदि कोई शीशी गलत स्थान पर स्थित हो तो रिकॉर्ड पाया जा सके - आमतौर पर सेल की पहचान, तारीख जमे हुए, और जिम्मेदार व्यक्ति के प्रारंभिक अक्षर पर्याप्त होते हैं।

नमूना प्रबंधन और ट्रैकिंग सिस्टम में सहायता के लिए बारकोड

रंगीन टोपियाँ

भविष्य के लिए एक नोट - अल्ट्रा-कोल्ड-प्रतिरोधी चिप्स विकसित किए जा रहे हैं, जो व्यक्तिगत क्रायोवियल के भीतर फिट होने पर, संभावित रूप से एक विस्तृत थर्मल इतिहास के साथ-साथ विस्तृत बैच जानकारी, परीक्षण परिणाम और अन्य प्रासंगिक गुणवत्ता दस्तावेज संग्रहीत कर सकते हैं।

उपलब्ध शीशियों की विभिन्न विशिष्टताओं पर विचार करने के अलावा, तरल नाइट्रोजन में क्रायोवियल के भंडारण की तकनीकी प्रक्रिया पर भी कुछ विचार करने की आवश्यकता है।

भंडारण तापमान

नमूनों के क्रायोजेनिक भंडारण के लिए कई भंडारण विधियाँ हैं, प्रत्येक एक विशिष्ट तापमान पर संचालित होती हैं। विकल्प और जिस तापमान पर वे काम करते हैं उसमें शामिल हैं:

तरल चरण LN2: -196℃ का तापमान बनाए रखें

वाष्प चरण LN2: मॉडल के आधार पर -135°C और -190°C के बीच विशिष्ट तापमान रेंज पर काम करने में सक्षम हैं।

नाइट्रोजन वाष्प फ्रीजर: -20°C से -150°C

संग्रहीत की जाने वाली कोशिकाओं का प्रकार और एक शोधकर्ता की पसंदीदा भंडारण विधि यह निर्धारित करेगी कि आपकी प्रयोगशाला तीन उपलब्ध विकल्पों में से किसका उपयोग करती है।

हालाँकि, अत्यधिक कम तापमान के कारण सभी ट्यूब या डिज़ाइन उपयुक्त या सुरक्षित नहीं होंगे। सामग्री बेहद कम तापमान पर बेहद भंगुर हो सकती है, आपके द्वारा चुने गए तापमान पर उपयोग के लिए उपयुक्त न होने वाली शीशी का उपयोग करने से भंडारण या पिघलने के दौरान बर्तन टूट सकता है या टूट सकता है।

उचित उपयोग पर निर्माताओं की सिफारिशों की सावधानीपूर्वक जांच करें क्योंकि कुछ क्रायोजेनिक शीशियां -175 डिग्री सेल्सियस से कम तापमान के लिए उपयुक्त हैं, कुछ -150 डिग्री सेल्सियस और अन्य केवल 80 डिग्री सेल्सियस के लिए उपयुक्त हैं।

यह भी ध्यान देने योग्य है कि कई निर्माताओं का कहना है कि उनकी क्रायोजेनिक शीशियाँ तरल चरण में विसर्जन के लिए उपयुक्त नहीं हैं। यदि इन शीशियों को तरल चरण में संग्रहीत किया जाता है, तो कमरे के तापमान पर लौटने पर ये शीशियाँ या उनकी कैप सील छोटे रिसाव के कारण दबाव के तेजी से निर्माण के कारण टूट सकती हैं।

यदि कोशिकाओं को तरल नाइट्रोजन के तरल चरण में संग्रहीत किया जाना है, तो कोशिकाओं को उपयुक्त क्रायोजेनिक शीशियों में क्रायोफ्लेक्स टयूबिंग में गर्मी-सीलबंद करके या कोशिकाओं को ग्लास एम्प्यूल्स में संग्रहीत करने पर विचार करें जो भली भांति बंद करके बंद हों।