पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) डीएनए टुकड़ों के प्रवर्धन के लिए आणविक जीव विज्ञान में व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक है। पीसीआर में विकृतीकरण, एनीलिंग और विस्तार सहित कई चरण शामिल हैं। इस तकनीक की सफलता काफी हद तक उपयोग की जाने वाली पीसीआर प्लेटों और ट्यूबों की गुणवत्ता पर निर्भर करती है। आपके आवेदन के लिए उपयुक्त पीसीआर प्लेट और ट्यूब का चयन करते समय विचार करने के लिए कई कारक हैं। विचार करने के लिए यहां कुछ प्रमुख कारक दिए गए हैं:
1. क्षमतापीसीआर प्लेटेंऔर ट्यूब विभिन्न आकारों और क्षमताओं में आते हैं। आकार और क्षमता का चुनाव काफी हद तक डीएनए की मात्रा पर निर्भर करता है जिसे एक ही प्रतिक्रिया में बढ़ाने की आवश्यकता होती है। उदाहरण के लिए, यदि आपको डीएनए की थोड़ी मात्रा को बढ़ाना है, तो आप एक छोटी ट्यूब चुन सकते हैं। यदि बड़ी मात्रा में डीएनए को प्रवर्धित करने की आवश्यकता है, तो बड़ी क्षमता वाली प्लेट का चयन किया जा सकता है।
2. सामग्री पीसीआर प्लेटें और ट्यूब विभिन्न सामग्रियों जैसे पॉलीप्रोपाइलीन, पॉली कार्बोनेट या ऐक्रेलिक से बनाई जा सकती हैं। पॉलीप्रोपाइलीन अपने रासायनिक और गर्मी प्रतिरोधी होने के कारण सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली सामग्री है। यह अन्य सामग्रियों की तुलना में कम महंगा भी है। पॉलीकार्बोनेट और ऐक्रेलिक अधिक महंगे हैं, लेकिन उनमें बेहतर ऑप्टिकल स्पष्टता है और वास्तविक समय पीसीआर के लिए आदर्श हैं।
3. तापीय चालकता पीसीआर में कई तापीय चक्र शामिल होते हैं, जिसके लिए प्रतिक्रिया मिश्रण को तेजी से गर्म करने और ठंडा करने की आवश्यकता होती है। इसलिए, प्रतिक्रिया मिश्रण का एक समान ताप और शीतलन सुनिश्चित करने के लिए पीसीआर प्लेटों और ट्यूबों में अच्छी तापीय चालकता होनी चाहिए। पतली दीवारों और सपाट सतहों वाली प्लेटें गर्मी हस्तांतरण को अधिकतम करने के लिए आदर्श होती हैं।
4. अनुकूलता पीसीआर प्लेट और ट्यूब आपके द्वारा उपयोग किए जा रहे थर्मल साइक्लर के साथ संगत होने चाहिए। प्लेटों और ट्यूबों को डीएनए अंशों के प्रवर्धन के लिए आवश्यक उच्च तापमान का सामना करने में सक्षम होना चाहिए। अनुशंसित प्लेटों और ट्यूबों के लिए हमेशा थर्मल साइक्लर निर्माता से परामर्श लें।
5. सील प्रतिक्रिया मिश्रण के संदूषण को रोकने के लिए एक टाइट सील महत्वपूर्ण है। पीसीआर प्लेटों और ट्यूबों को विभिन्न तरीकों जैसे हीट सील, चिपकने वाली फिल्म या ढक्कन का उपयोग करके सील किया जा सकता है। हीट सीलिंग सबसे सुरक्षित तरीका है और संदूषण के खिलाफ एक मजबूत बाधा प्रदान करता है।
6. स्टरलाइज़ेशन पीसीआर प्लेट और ट्यूब किसी भी संदूषक से मुक्त होने चाहिए जो प्रतिक्रिया में हस्तक्षेप कर सकते हैं। इसलिए, उपयोग से पहले उन्हें कीटाणुरहित किया जाना चाहिए। ऐसी प्लेटों और ट्यूबों का चयन करना महत्वपूर्ण है जो स्टरलाइज़ करने में आसान हों और रासायनिक और गर्मी स्टरलाइज़ेशन विधियों के प्रति प्रतिरोधी हों।
संक्षेप में, सफल डीएनए प्रवर्धन के लिए सही पीसीआर प्लेट और ट्यूब चुनना महत्वपूर्ण है। चुनाव काफी हद तक अनुप्रयोग के प्रकार, प्रवर्धित डीएनए की मात्रा और थर्मल साइक्लर्स के साथ अनुकूलता पर निर्भर करता है।
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पोस्ट समय: मई-17-2023