Pehea e paipu ai i nā puke liʻiliʻi me nā paipu lima lima lima

Ke kau ʻia nei ka manaʻo nui i ka hōʻemi ʻana i nā reagents a me nā kumukūʻai, koi nui nā puke liʻiliʻi, no ka laʻana, no ka hoʻomākaukau ʻana i ka PCR Mastermix a i ʻole ka hopena enzyme. Akā ʻo ka paipu ʻana i nā puke liʻiliʻi mai 0.2 - 5 µL e hoʻonoho i nā pilikia hou no ka pololei a me ka pololei o ka pipetting. He mea nui kēia mau mea:

1. ʻO ka nui o ka paipu a me ka piko: E koho mau i ka pipette me ka leo haʻahaʻa haʻahaʻa loa i hiki a me ka piko liʻiliʻi loa e mālama i ka cushion ea me ka liʻiliʻi. I ka paipu 'ana i 1 µL e la'a, koho i ka paipu 0.25 – 2.5 µL a me ka piko pili ma mua o ka paipu 1 - 10 µL.
2. ʻO ka calibration a me ka mālama ʻana: He mea nui ia e hoʻopaʻa pono ʻia a mālama ʻia kāu pipettes. ʻO nā hoʻololi liʻiliʻi a me nā ʻāpana haʻihaʻi ma luna o ka pipette e alakaʻi i ka piʻi nui ʻana i nā waiwai hewa ʻōnaehana a me ka random. Pono e hana ʻia kahi calibration e like me ISO 8655 i hoʻokahi makahiki.
3. ʻO nā paipu hoʻoneʻe maikaʻi: E nānā inā loaʻa iā ʻoe kahi pipette hoʻoneʻe maikaʻi me ka haʻahaʻa o ka leo i kāu lab. Ma keʻano laulā, ke hoʻohana nei i kēia ʻano pipette e alakaʻi i kahi hopena pipetting ʻoi aku ka maikaʻi ma ke ʻano o ka pololei a me ka pololei ma mua o nā pipette air-cushion maʻamau.
4. E ho'āʻo e hoʻohana i nā puke ʻoi aku ka nui: E noʻonoʻo paha ʻoe e hoʻoheheʻe i kāu hāpana e pipette i nā puke nui me ka nui like i ka hopena hope. Hiki i kēia ke hōʻemi i nā hewa paipu me ka liʻiliʻi liʻiliʻi.

Ma waho aʻe o kahi mea hana maikaʻi, pono e loaʻa i ka mea noiʻi kahi ʻenehana pipetting maikaʻi loa. E nānā pono i nā ʻanuʻu:

1. Manaʻo hoʻopili: Mai hoʻopaʻa i ka pipette ma ka piko no ka mea e hōʻino paha kēia i ka hopena maikaʻi no ka hoʻohuli ʻana i ke kukui wai a hōʻino paha i ka puka. E hoʻohana wale i ke kaomi māmā i ka wā e hoʻopili ai i kahi piko a hoʻohana i ka pipette me kahi pahu puna i hoʻopiha ʻia.
2. Paʻa i ka pipette: Mai hoʻopaʻa i ka pipette ma kou lima i ka wā e kali ana i ka centrifuge, cycler, etc. ʻO ka loko o ka pipette e wela a alakaʻi i ka cushion ea e hoʻonui i ka hopena o ka hoʻokaʻawale ʻana mai ka leo i hoʻonohonoho ʻia i ka pipetting.
3. Ma mua o ka hoʻomaʻamaʻa ʻana: ʻO ka hoʻohaʻahaʻa ʻana o ka ea i loko o ka piko a me ka pipette e hoʻomākaukau i ka piko no ka laʻana a pale i ka evaporation i ka wā e ʻimi ai i ka leo hoʻololi.
4. Aspiration Vertical: He mea koʻikoʻi kēia i ka lawelawe ʻana i nā puke liʻiliʻi e pale i ka hopena capillary e kū mai ana ke paʻa ka pipette ma kahi kihi.
5. Ka hohonu hohonu: E hoʻokomo i ka piko i mea liʻiliʻi e hiki ai ke pale aku i ke komo ʻana o ka wai i ka piko ma muli o ka hopena capillary. Rula o ka manamana nui: ʻO ka liʻiliʻi o ka piko a me ka leo, ʻo ia ka haʻahaʻa o ka hohonu kaiapuni. Manaʻo mākou i ka 2 mm kiʻekiʻe loa i ka wā e paipu ana i nā puke liʻiliʻi.
6. ʻO ka hāʻawi ʻana ma ke kihi 45°: Hoʻopaʻa ʻia ke kahe maikaʻi loa o ka wai ke paʻa ka pipette ma kahi kihi 45°.
7. Hoʻopili i ka paia o ka moku a i ʻole ka ʻili wai: Hiki ke hāʻawi pono ʻia nā puke liʻiliʻi i ka wā e paʻa ai ka piko i ka paia o ka moku, a i ʻole i loko o ka wai. Hiki ke hāʻawi pololei ʻia ka hāʻule hope loa mai ka piko.
8. Puhi: Pono ka puhi ʻana ma hope o ka hāʻawi ʻana i nā puke haʻahaʻa e hoʻokuʻu i ka hāʻule hope loa o ka wai i ka piko. Pono e hana ʻia ka puhi ʻana i ka paia o ka moku. E makaʻala ʻaʻole e lawe mai i nā ʻōhū ea i loko o ka laʻana i ka wā e hana ana i ka puhi ʻana ma ka ʻili wai.