Menene Ya Kamata A Yi La'akari da Lokacin Bututun PCR Cakuda?

Don samun nasarar haɓaka haɓakawa, ya zama dole cewa abubuwan haɓaka halayen mutum ɗaya suna cikin daidaitaccen taro a cikin kowane shiri. Bugu da ƙari, yana da mahimmanci kada wani gurɓataccen abu ya faru.

Musamman lokacin da yawancin halayen dole ne a saita su, an kafa shi don shirya abin da ake kira mahaɗin master maimakon pipetting kowane reagent daban a cikin kowane jirgin ruwa. Abubuwan haɗin da aka riga aka tsara suna samuwa na kasuwanci, wanda kawai ake ƙara takamaiman abubuwan samfur (primer) da ruwa. A madadin, za a iya shirya mahaɗin maigida da kanka. A cikin bambance-bambancen guda biyu, ana rarraba cakuda ga kowane jirgin ruwa na PCR ba tare da samfuri ba kuma ana ƙara samfurin DNA ɗaya daban a ƙarshen.

Yin amfani da haɗin gwaninta yana da fa'idodi da yawa: Na farko, an rage adadin matakan bututu guda ɗaya. Ta wannan hanyar, duka haɗarin kurakuran masu amfani yayin bututun da kuma haɗarin kamuwa da cuta an rage su kuma, ba shakka, ana adana lokaci. A ka'ida, daidaiton pipetting kuma ya fi girma, tun da ana yin allurai mafi girma. Wannan yana da sauƙin fahimta lokacin duba bayanan fasaha na pipettes: Ƙananan ƙarar ƙarar, mafi girman karkacewar na iya zama . Gaskiyar cewa duk shirye-shiryen sun fito ne daga jirgin ruwa guda ɗaya yana da tasiri mai kyau akan homogeneity (idan an gauraye sosai). Wannan kuma yana inganta haɓakar gwaje-gwajen.

Lokacin shirya mahaɗin maigidan, aƙalla 10% ƙarin ƙarar ya kamata a ƙara (misali idan ana buƙatar shirye-shiryen 10, ƙididdige kan tushen 11), har ma jirgin ruwa na ƙarshe ya cika da kyau. Ta wannan hanyar, (ƙananan) rashin daidaiton bututu, da sakamakon asarar samfurin lokacin da za a iya rama abubuwan da ke ɗauke da sabulu. Abubuwan wanke-wanke suna ƙunshe a cikin mafitacin enzyme kamar su polymerases da manyan haɗe-haɗe, haifar da samuwar kumfa da ragowar a saman ciki na al'ada.pipette tukwici.

Dangane da aikace-aikacen da nau'in ruwan da za a ba da shi, ya kamata a zaɓi ingantacciyar fasahar bututu (1) kuma a zaɓi kayan aikin da suka dace. Don mafita da ke ɗauke da kayan wanka, ana ba da shawarar tsarin ƙaura kai tsaye ko abin da ake kira nasihun pipette "ƙananan riƙewa" a matsayin madadin pipettes na matashin iska. TasirinFarashin ACE PIPETTEdogara ne a kan wani musamman hydrophobic surface. Ruwan da ke ɗauke da kayan wanka ba sa barin fim ɗin da ya rage a ciki da waje, ta yadda za a iya rage asarar mafita.

Bayan madaidaicin adadin duk abubuwan da aka gyara, yana da mahimmanci cewa babu gurɓatar shirye-shiryen da ke faruwa. Bai isa ba don amfani da abubuwan da ake amfani da su na tsafta mai tsafta, saboda tsarin pipetting a cikin bututun iska na iya samar da iska mai iska wanda ya rage a cikin pipette. DNA wanda zai iya ƙunshe a cikin iska za a iya canjawa wuri daga samfurin ɗaya zuwa na gaba a cikin mataki na pipetting na gaba kuma ta haka ya haifar da gurɓata. Tsarin ƙaura kai tsaye da aka ambata a sama na iya rage wannan haɗari. Don pipettes matashin iska yana da ma'ana a yi amfani da nasihu masu tacewa don kare mazugi na pipette ta hanyar riƙe fantsama, iska, da kwayoyin halitta.


Lokacin aikawa: Dec-06-2022