PCR Workflows (Ingancin inganci ta hanyar daidaitawa)

Matsakaicin matakan aiwatar da ingantawa da kuma jituwa, da jituwa, bada izinin kyakkyawan aiki - mai zaman kanta da mai amfani. Tabbataccen yanayin yana tabbatar da sakamako mai inganci, da kuma lokacin haifuwa.

Manufar (classic) PCR shine ƙarni na amintattu da sakamako haifuwa. Ga wasu aikace-aikace, yawan amfanin ƙasa naPCR samfurinshima ya dace. Ga waɗannan halayen, dole ne a ɗauki kulawa don tabbatar da cewa ba a daidaita samfuran ba kuma ba a tsayar da aikin komputa ba. Musamman, wannan fassara don rage yawan gabatar da gurbata wanda zai iya haifar da sakamako mai kyau ko na karya sakamakon PCR. Bugu da ƙari, yanayin amsawa ya zama daidai gwargwadon iko ga kowane samfurin mutum kuma ya fi dacewa ga abubuwan da suka biyo baya (na wannan hanyar). Wannan yana nufin tsarin halayen halayen harma da nau'in sarrafa zafin jiki a cikin keke. Kuskuren mai amfani, ba shakka, za a guji gwargwadon iko.

A ƙasa, za mu nuna matsalolin da ake ci karo da su yayin shiri da kuma tafiye-tafiye zuwa mafita da kuma abubuwan da ake amfani da su don daidaitattun ayyukan aikin PCR.

Shiri na Zabi

Abubuwan da aka yi da abubuwan da aka yi cikin kayan aikin da suka shafi PCR-ECR, ko faranti, bi da bi, sun ƙunshi kalubalen da yawa waɗanda dole ne a shawo kansu:

Yanayin dauki

Ainihin da tabbataccen dosing na abubuwan da aka gyara na mutum shine ba makawa lokacin da nufin mafi yawan lokuta yanayin da zai yiwu. Baya ga ingantaccen dabarar butetting, zaɓi kayan aikin dama yana da mahimmanci. PCR Masters-Haɗu yana ɗauke da abubuwa masu yawa wanda ke ƙaruwa da danko ko samar da kumfa. A lokacin aiwatar da bututun, waɗannan suna haifar da ingantaccen rigar rigarPipette Nasihu, don haka rage daidaito na bututu. Yin amfani da tsarin kai tsaye ko kuma zaɓin bututun bututun da ba su da ƙarfi ga rigar iya inganta daidaito da tsarin aikin bututun.

Gurbatawa

A lokacin aiwatar da aiki, ana samar da Aerosols wanda, idan an yarda ya kai ga bututun, zai iya lalata wani samfurin yayin matakin bututun mai gaba. Ana iya hana wannan ta amfani da tukwici ko tsarin motsa jiki kai tsaye.
Dauko kamartukwici, tasoshin da aka yi amfani da faranti da faranti waɗanda aka yi amfani da su a cikin aikin bakin ciki dole ne su ƙunshi abubuwa masu sasantawa ko gurbata sakamakon. Waɗannan sun haɗa da DNA, DNases, rnases da masu hana su, da kuma kayan haɗin da zasu iya yin tsalle daga kayan lokacin da aka amsa - abubuwa da aka sani da su.

Kuskuren mai amfani

Ana sarrafa samfurori, mafi girma hadarin kuskure. Zai iya sauƙin faruwa cewa samfurin shine pipetted cikin jirgin da ba daidai ba ko ba daidai ba. Wannan haɗarin na iya rage sosai ta hanyar alamomin rijiyoyin rijiyoyin. Ta hanyar atomatik na matakai na rarraba, "Fascor", watau, kurakurai da bambancin-mai amfani, musamman ma ƙara haihuwa. Wannan na bukatar farantin wahalar kwanciyar hankali don yin aiki a cikin wani aiki. An haɗa sunayen barcin da aka haɗe suna ba da ƙarin zaɓuɓɓuka - wanda ke sauƙaƙa samfurin samfurin a duk tsawon tsari.

Shirye-shirye na thermocycler

Shirya kayan aiki na iya tabbatar da zama lokacin shaƙatawa lokaci har da kuskure-yiwuwa. Daban-daban fasalolin da ke tattare da kayan aikin plery suna aiki tare don sauƙaƙa wannan tsari mataki kuma, mafi mahimmanci, don sanya shi lafiya:
Saƙon sauƙi da kuma jagora mai amfani mai kyau shine tushen ingantaccen shirye-shirye. Gina kan wannan tushe, gwamnatin mai kariya ta sirri zai hana shirye-shiryen mutum daga wasu masu amfani suka canza. Idan rike da yawa (na nau'in guda ɗaya) ana amfani da shi, yana da amfani idan za'a iya canjawa shirin kai tsaye daga wani kayan aiki ɗaya ko haɗi. Software na kwamfuta yana ba da damar Tsakiyar Shirye-shiryen shirye-shirye, haƙƙin mai amfani da takardu a kwamfuta.

Injin dinCR

A lokacin Run, ana samar da DNA a cikin jirgin ruwan da aka yi, inda za a sanya kowane samfurin ya zama daidai, yanayin da ya dace. Abubuwan da ke biye sun dace don aiwatarwa:

Sarrafa zazzabi

Madalla da kyau daidai a cikin sarrafa zazzabi da kuma daidaito na rumbun wasan cakin sune tushen ma har ma da kwanakin zazzabi na kowane samfurori. Babban ingancin tsawa da sanyaya abubuwa (abubuwan da aka yi) abubuwa), da kuma yadda ake haɗa haɗarin yanayin da aka sani da "Edge sakamako"

Fipaporation

A maida hankali ne game da mutum abubuwan da aka gyara bai kamata ya canza a kan hanya na amsawa ba saboda fitarwa. In ba haka ba, yana yiwuwa kadanPCR samfurinAna iya haifar da shi, ko babu ko kaɗan. Saboda haka yana da mahimmanci a rage farashin sama ta hanyar tabbatar da kyakkyawan hatimi. A wannan yanayin, murfi mai zafi da hatimin makullin jirgin ruwa yayi aiki da hannu a hannu. Zaɓuɓɓukan rufe fuska daban-daban donPCR faranti (Haɗin: Labari na hatimi), inda aka sami mafi kyawun hatimi ta hanyar hatimin zafi. Sauran ƙulli na iya zama daidai, muddin dai ana iya daidaita lambar murfin murfi na murfin cycler ɗin da aka zaɓa.

Tsarin aiwatarwa yana cikin wurin don kariya daidai da sakamako na haifuwa a cikin dogon lokaci. Wannan ya hada da kiyaye kayan aiki na yau da kullun don tabbatar da cewa koyaushe yana cikin kyakkyawan yanayin aiki. Dukkanin abubuwanda zasu iya zama da inganci a kan duk kuri'a da aka samar, kuma tabbas samar da ingantattu dole ne a tabbatar.

 


Lokaci: Nuwamba-29-2022