Que son os crioviales?
Frascos de almacenamento crioxénicoson recipientes pequenos, tapados e cilíndricos deseñados para almacenar e conservar mostras a temperaturas ultrabaixas. Aínda que tradicionalmente estes frascos estaban feitos de vidro, agora son moito máis comúns de polipropileno por razóns de comodidade e custo. Os criofrascos foron coidadosamente deseñados para soportar temperaturas de ata -196 ℃ e para albergar unha ampla variedade de tipos de células. Estes varían desde células nai de diagnóstico, microorganismos e células primarias ata liñas celulares establecidas. Ademais diso, tamén pode haber pequenos organismos multicelulares que se almacenan no seu interior.frascos de almacenamento crioxénico, así como ácidos nucleicos e proteínas que precisan ser almacenados a niveis de temperatura de almacenamento crioxénico.
Os frascos de almacenamento crioxénico veñen en varias formas diferentes, e atopar o tipo correcto que satisfaga todas as túas necesidades garantirá que manteñas a integridade da mostra sen pagar de máis. Le o noso artigo para obter máis información sobre as consideracións de compra clave ao seleccionar o criofrasco axeitado para a túa aplicación de laboratorio.
Propiedades do frasco crioxénico a ter en conta
Roscas externas vs. internas
A xente adoita escoller segundo as súas preferencias persoais, pero de feito hai diferenzas funcionais clave a ter en conta entre os dous tipos de fíos.
Moitos laboratorios adoitan optar por frascos con rosca interna para minimizar o espazo de almacenamento dos tubos e permitir un mellor axuste nas caixas de conxelación. A pesar disto, pode considerar que a opción con rosca externa é a mellor opción para vostede. Considérase que presentan un menor risco de contaminación debido ao deseño que fai que sexa aínda máis difícil que calquera cousa que non sexa a mostra entre no frasco.
Os frascos con rosca externa son xeralmente preferidos para aplicacións xenómicas, pero calquera das dúas opcións considérase axeitada para biobancos e outras aplicacións de alto rendemento.
Unha última cousa a ter en conta sobre o roscado: se o seu laboratorio emprega automatización, pode que teña que considerar que roscas se poden usar coas pinzas de instrumentos.
Volume de almacenamento
Os frascos crioxénicos están dispoñibles nunha variedade de tamaños para cubrir a maioría das necesidades, pero a maioría varían entre unha capacidade de 1 mL e 5 mL.
A clave é asegurarse de que o criovial non estea demasiado cheo e de que haxa espazo adicional dispoñible, no caso de que a mostra se inche durante a conxelación. Na práctica, isto significa que os laboratorios optan por frascos de 1 mL ao almacenar mostras de 0,5 mL de células suspendidas en crioprotector e frascos de 2,0 mL para 1,0 mL de mostra. Outro consello para non encher demasiado os frascos é usar crioviales con marcas graduadas, o que garantirá que se evite calquera inchazo que poida causar gretas ou fugas.
Tapón de rosca vs. tapa abatible
O tipo de tapa que escolla depende principalmente de se vai usar nitróxeno en fase líquida ou non. Se é así, necesitará criofrascos con tapa de rosca. Isto garante que non se poidan abrir accidentalmente debido a unha mala manipulación ou cambios de temperatura. Ademais, as tapas de rosca permiten unha extracción máis doada das caixas crioxénicas e un almacenamento máis eficiente.
Non obstante, se non empregas nitróxeno en fase líquida e necesitas unha tapa máis cómoda e doada de abrir, entón unha tapa abatible é a mellor opción. Isto aforrarache moito tempo xa que é moito máis doada de abrir, o que a fai especialmente útil en operacións de maior rendemento e aquelas que empregan procesos por lotes.
Seguridade do selo
A mellor maneira de garantir un selado seguro é asegurarse de que a tapa e o frasco crioxénico estean feitos do mesmo material. Isto garantirá que se contraian e expandan ao mesmo tempo. Se están feitos con materiais diferentes, contraeranse e expandiranse a velocidades diferentes a medida que cambia a temperatura, o que provocará fendas e posibles fugas e a consecuente contaminación.
Algunhas empresas ofrecen arandelas e bridas dobres para obter o máximo nivel de seguridade das mostras en criofrascos con rosca externa. Os criofrascos con xunta tórica considéranse os máis fiables para os criofrascos con rosca interna.
Vidro vs. plástico
Por seguridade e comodidade, moitos laboratorios empregan agora plástico, normalmente polipropileno, en lugar de ampolas de vidro termoselábeis. As ampolas de vidro considéranse agora unha opción desactualizada, xa que durante o proceso de selado poden producirse fugas invisibles por buratos de alfinete que, ao desconxelarse despois do almacenamento en nitróxeno líquido, poden facer que exploten. Tampouco son tan axeitadas para as técnicas modernas de etiquetado, que son fundamentais para garantir a trazabilidade das mostras.
Autoportante vs. fondo redondeado
Os frascos crioxénicos están dispoñibles tanto en versións autoportantes con fondo en forma de estrela como en versións redondeadas. Se precisa colocar os frascos sobre unha superficie, asegúrese de escoller a versión autoportante.
Trazabilidade e seguimento de mostras
Esta área do almacenamento crioxénico adoita pasarse por alto, pero o seguimento e a trazabilidade das mostras son aspectos cruciais a ter en conta. As mostras crioxénicas poden almacenarse durante moitos anos, período durante o cal o persoal pode cambiar e, sen rexistros axeitados, poden volverse inidentificables.
Asegúrate de escoller frascos que faciliten ao máximo a identificación da mostra. Debes ter en conta algúns aspectos:
Áreas de escritura amplas para rexistrar detalles suficientes para que se poidan atopar os rexistros se un vial se atopa nunha localización incorrecta; normalmente, a identidade da cela, a data de conxelación e as iniciais da persoa responsable son suficientes.
Códigos de barras para axudar nos sistemas de xestión e seguimento de mostras
Gorras de cores
Unha nota para o futuro: están a desenvolverse chips ultrarresistentes ao frío que, ao colocarse en criofrascos individuais, poderían almacenar un historial térmico detallado, así como información detallada sobre o lote, resultados das probas e outra documentación de calidade relevante.
Ademais de ter en conta as diferentes especificacións dos frascos dispoñibles, tamén cómpre pensar no proceso técnico de almacenamento de criofrascos en nitróxeno líquido.
Temperatura de almacenamento
Existen varios métodos de almacenamento para o almacenamento crioxénico de mostras, cada un deles funciona a unha temperatura específica. As opcións e a temperatura á que funcionan inclúen:
Fase líquida LN2: manter unha temperatura de -196 ℃
LN2 en fase de vapor: poden funcionar a intervalos de temperatura específicos entre -135 °C e -190 °C dependendo do modelo.
Conxeladores de vapor de nitróxeno: de -20 °C a -150 °C
O tipo de células que se almacenan e o método de almacenamento preferido polo investigador determinarán cal das tres opcións dispoñibles utilizará o seu laboratorio.
Non obstante, debido ás temperaturas extremadamente baixas empregadas, non todos os tubos ou deseños serán axeitados ou seguros. Os materiais poden volverse extremadamente fráxiles a temperaturas extremadamente baixas, polo que o uso dun vial non axeitado para o seu uso á temperatura escollida podería provocar que o recipiente se rompa ou rache durante o almacenamento ou a desconxelación.
Comprobe atentamente as recomendacións dos fabricantes sobre o uso correcto, xa que algúns frascos crioxénicos son axeitados para temperaturas de ata -175 °C, outros de -150 °C e outros só de 80 °C.
Tamén paga a pena sinalar que moitos fabricantes afirman que os seus frascos crioxénicos non son axeitados para a inmersión na fase líquida. Se estes frascos se almacenan na fase líquida ao volver á temperatura ambiente, estes frascos ou os seus selos de tapa poden romperse debido a unha rápida acumulación de presión causada por pequenas fugas.
Se as células se van almacenar na fase líquida de nitróxeno líquido, considérese almacenar as células en frascos crioxénicos axeitados selados por calor en tubos crioflex ou almacenar as células en ampolas de vidro hermeticamente pechadas.
Data de publicación: 25 de novembro de 2022