As reaccións en cadea da polimerase (PCR) son un dos métodos máis coñecidos que se usan nos laboratorios de ciencias da vida.
As placas de PCR prodúcense a partir de plásticos de primeira clase para un excelente procesamento e análise de mostras ou resultados recollidos.
Teñen paredes finas e homoxéneas para proporcionar unha transferencia térmica precisa.
En preparación para aplicacións en tempo real, seccionan minutos de ADN ou ARN e almacénanse en placas de PCR.
As placas de PCR son altamente eficientes no selado térmico e tamén restrinxen o fluxo de calor.
Non obstante, por eficaces e fiables que son as placas de PCR, os erros e as imprecisións axústanse con facilidade ao procesar as mostras.
Polo tanto, se estás interesado en conseguir un bo e de alta calidadePlacas de PCR.É ideal contactar cun fabricante de placas PCR fiable. Con isto estás seguro de conseguir a mellor oferta.
Aquí tes algunhas precaucións a seguir para evitar contaminacións de reactivos ou mostras e evitar que se introduzan imprecisións nos resultados.
Esterilización do entorno
Prodúcense positivos ou negativos incorrectos debido á presenza de impurezas, o que fai dubidar dos resultados.
As impurezas e contaminantes ocorren de diversas formas, como o ADN non relacionado ou aditivos químicos que eventualmente diminúen a eficiencia e eficacia da reacción.
Hai moitas formas de reducir moito a taxa de contaminación da placa de PCR.
Usar puntas de filtro esterilizadas é outra forma útil de evitar que as impurezas se introduzan nas túas mostras a través das pipetas.
Dedicar un conxunto de equipos completamente limpo, composto por pipetas e bastidores, exclusivamente para o uso de PCR. Isto garantirá unha transferencia insignificante de impurezas ou contaminantes polo laboratorio.
Use lixivias, etanol nas pipetas, bastidores e bancos para limpar os contaminantes.
Asigne un espazo reservado para todas as súas reaccións de PCR para minimizar aínda máis a contaminación por partículas.
Use luvas limpas en cada paso e substitúeas con frecuencia.
Placas de PCR
Inspeccione a concentración e pureza do modelo.
Debe manterse a limpeza do banco e do equipamento empregado na análise de mostras coa PCR. É fundamental validar o grao de pureza das mostras antes da súa análise e procesamento.
Xeralmente, os analizadores teñen en conta a concentración e o nivel de pureza das mostras de ADN.
Procure que a relación de absorbancia para 260 nm/280 nm non debe ser inferior a 1,8. Mentres que a lonxitude de onda posterior entre 230 nm e 320 nm úsanse para identificar impurezas.
Nunha instancia, detéctanse sales caotrópicas e outros compostos orgánicos a unha taxa de absorbancia de 230 nm. Mentres que a turbidez nas mostras de ADN tamén se detecta e verifica a unha taxa de absorbancia de 320 nm.
Evite sobrecargar as placas de PCR co produto
Por moito que se desexe executar varios produtos ao mesmo tempo, ten como resultado unha contaminación cruzada das placas de PCR.
Sobrecargar as placas de PCR con residuos de diferentes produtos e dificulta moito a determinación das mostras.
Manter rexistros dos reactivos de PCR alícuotas
Os ciclos continuos de conxelación/desconxelación e o uso frecuente de alícuotas poden danar os reactivos da PCR, as encimas e os DNTP mediante a recristalización.
Procura sempre controlar a taxa de alícuota utilizada durante a preparación das mostras a analizar.
O LIMS preferible é máis axeitado para controlar o inventario e a cantidade de reactivos e mostras conxelados ou desconxelados.
Escolla a mellor temperatura de recocido.
Escoller e usar a temperatura de recocido incorrecta é outro método que os resultados da PCR conteñen erros.
Ás veces, a reacción non sae como estaba previsto. Desérase reducir a temperatura de recocido para facilitar unha reacción exitosa.
Non obstante, a baixada da temperatura aumenta as posibilidades de falsos positivos e a aparición de dímeros de imprimación.
É importante confirmar a análise da curva de fusión cando se usan as placas de PCR xa que é un bo indicador para seleccionar a temperatura de recocido correcta.
O software de deseño de imprimación axuda ao deseño, a provisión da temperatura de recocido correcta e reduce directamente o erro nas placas de PCR.
¿Necesitas unha placa de PCR de alta calidade?
No caso de que estiveras considerando onde atopar un fabricante de confianzaPlacas de PCR. Non busques máis porque estás no lugar indicado.
Por favorprema aquí para contactar connoscopara produtos e servizos de alta calidade a un prezo que non romperá o banco.
Hora de publicación: 30-Oct-2021