Criosaidheanair an cleachdadh gu cumanta airson stòradh cryogenic de loidhnichean cealla agus stuthan bith-eòlasach èiginneach eile, ann an dewars làn de naitridean lionn.

Tha grunn ìrean an sàs ann an gleidheadh ​​​​soirbheachail cheallan ann an nitrigin liùlach. Ged is e reothadh slaodach am prionnsapal bunaiteach, tha an dearbh dhòigh air a chleachdadh an urra ris an t-seòrsa cealla agus an cryoprotectant a thathar a’ cleachdadh. Tha grunn chùisean sàbhailteachd agus cleachdaidhean as fheàrr ri thoirt fa-near nuair a thathar a’ stòradh cheallan aig teòthachd cho ìosal.

Tha an dreuchd seo ag amas air sealladh farsaing a thoirt seachad air mar a tha cryovials air an stòradh ann an nitrigin leaghaidh.

Dè th 'ann an Cryovials

Is e criathraidean beaga le caiptean a th’ ann an cryovials a tha air an dealbhadh airson sampallan leaghaidh a stòradh aig teòthachd gu math ìosal. Bidh iad a’ dèanamh cinnteach nach bi ceallan a tha air an gleidheadh ​​​​ann an cryoprotectant a’ tighinn gu conaltradh dìreach ris an nitrigin leaghaidh, a’ lughdachadh cunnart bristeadh cealla fhad ‘s a tha iad fhathast a’ faighinn buannachd bho fhìor bhuaidh fuarachaidh naitridean leaghan.

Mar as trice bidh na criathraidean rim faighinn ann an raon de mheudan agus deilbh - faodaidh iad a bhith air an snàthadh a-staigh no a-muigh le bonn còmhnard no cruinn. Tha cruthan sterile agus neo-sterile rim faighinn cuideachd.

Cò a chleachdasCyrovialsgus ceallan a stòradh ann an nitrigin leaghan

Bidh raon de deuchainn-lannan SNS agus prìobhaideach, a bharrachd air ionadan rannsachaidh a tha a’ speisealachadh ann am bancaireachd fala corda, bith-eòlas cealla epithelial, imdhun-eòlas agus bith-eòlas bun-cheallan a’ cleachdadh cryovials gus ceallan cryopreserve.

Tha ceallan air an gleidheadh ​​​​san dòigh seo a’ toirt a-steach ceallan B agus T, ceallan CHO, gas hematopoietic agus ceallan progenitor, hibridomas, ceallan intestinal, macrophages, gas mesenchymal agus ceallan progenitor, monocytes, Myeloma, NK Cells agus Pluripotent Stem Cells.

Sealladh farsaing air Mar a Stòras tu Cryovials ann an Nitrigin Liquid

Is e pròiseas a th’ ann an cryopreservation a ghlèidheas ceallan agus structaran bith-eòlasach eile le bhith gan fuarachadh gu teòthachd glè ìosal. Faodar ceallan a stòradh ann an nitrigin leaghaidh airson bhliadhnaichean gun a bhith a 'call comas obrachaidh cealla. Seo dealbh de na modhan-obrach a thathar a’ cleachdadh.

Ullachadh cealla

Bidh an dearbh dhòigh air sampallan ullachadh ag atharrachadh a rèir an seòrsa cealla, ach san fharsaingeachd, bidh na ceallan air an cruinneachadh agus air an centrifuged gus pellet làn cealla a leasachadh. Bidh am peilear seo an uairsin air ath-chuairteachadh anns an supernatant measgaichte le cryoprotectant no meadhan cryopreservation.

Cryopreservation Meadhanach

Tha am meadhan seo air a chleachdadh gus ceallan a ghleidheadh ​​​​anns na h-àrainneachdan aig teòthachd ìosal a bhios iad fo smachd le bhith a’ cur bacadh air cruthachadh criostalan taobh a-staigh agus taobh a-muigh cealla agus mar sin bàs cealla. Is e an dleastanas aca àrainneachd shàbhailte, dìon a thoirt do cheallan is nèapraigean rè pròiseasan reothadh, stòraidh agus leaghadh.

Tha meadhan leithid plasma reòta ùr (FFP), fuasgladh plasmalyte heparinized no fuasglaidhean gun serum, gun cho-phàirtean bheathaichean air a mheasgachadh le cryoprotectants leithid dimethyl sulfoxide (DMSO) no glycerol.

Tha am peilear sampall ath-leaghte air a thoirt a-steach do cryovials polypropylene leithidCompanaidh Bith-mheidigeach Suzhou Ace Cryogenic Storage Vials.

Tha e cudromach gun a bhith a 'toirt cus de na cryovials oir àrdaichidh seo an cunnart gun tèid sgàineadh agus gun tèid susbaint a leigeil ma sgaoil (1).

Ìre reothadh fo smachd

San fharsaingeachd, thathas a’ cleachdadh ìre reothaidh fo smachd slaodach airson ceallan a ghleidheadh ​​​​gu soirbheachail.

Às deidh sampaill a bhith air an toirt a-steach do vials cryogenic, thèid an cur air deigh fhliuch no ann am fuaradair 4 ℃ agus tha am modh reothadh air tòiseachadh taobh a-staigh 5 mionaidean. Mar stiùireadh coitcheann, tha ceallan air am fuarachadh aig ìre -1 gu -3 gach mionaid (2). Tha seo air a choileanadh le bhith a’ cleachdadh inneal-fuarachaidh prògramaichte no le bhith a’ cur criathragan ann am bogsa inslithe air a chuir ann an reothadair ìre fo smachd -70 ° C gu -90 ° C.

Gluasad gu Liquid Nitrogen

Bidh na criathraidean cryogenic reòta an uairsin air an gluasad gu tanca nitrigin leaghaidh airson amannan neo-chinnteach fhad ‘s a tha teòthachd nas ìsle na -135 ℃ air a chumail suas.

Gheibhear na teodhachd ultra-ìosal seo le bhith air a bhogadh ann an nitrigin ìre leaghan no bhalbhaichean.

Ìre leaghan no ceò?

Tha fios gu bheil stòradh ann an nitrigin ìre liùlach a 'cumail suas an teòthachd fhuar le cunbhalachd iomlan, ach gu tric chan eilear a' moladh airson na h-adhbharan a leanas:

• An fheum air meudan mòra (doimhneachd) de nitrigin leaghaidh a dh’ fhaodadh a bhith na chunnart. Is e fìor chunnart a th’ ann an losgadh no asphyxiation air sgàth seo.
• Cùisean clàraichte de thar-thruailleadh le riochdairean gabhaltach leithid aspergillus, hep B agus sgaoileadh viral tron ​​​​mheadhan nitrigin leaghaidh (2,3)
• An comas gun tèid nitrigin leaghaidh a-steach do na criathraidean aig àm bogaidh. Nuair a thèid a thoirt air falbh bho stòradh agus a bhlàthachadh gu teòthachd an t-seòmair, bidh na nitrigin a 'leudachadh gu luath. Mar thoradh air an sin, faodaidh an vial crìonadh nuair a thèid a thoirt air falbh bho stòradh nitrigin leaghaidh, a 'cruthachadh cunnart bho sprùilleach itealaich agus a bhith fosgailte don t-susbaint (1, 4).

Airson na h-adhbharan sin, tha stòradh teòthachd ultra-ìosal mar as trice ann an nitrogen ìre vapor. Nuair a dh’ fheumar sampaill a stòradh anns an ìre leaghaidh, bu chòir tubing cryoflex sònraichte a chleachdadh.

Is e an eas-bhuannachd don ìre bhalbhaichean gum faod caisead teòthachd dìreach tachairt agus mar thoradh air sin bidh atharrachadh teòthachd eadar -135 ℃ agus -190 ℃. Feumaidh seo sgrùdadh cùramach agus dìcheallach air na h-ìrean nitrigin leaghaidh agus atharrachaidhean teòthachd (5).

Tha mòran de luchd-saothrachaidh a’ moladh gu bheil cryovials freagarrach airson an stòradh sìos gu -135 ℃ no airson an cleachdadh anns an ìre bhalbhaichean a-mhàin.

A 'leaghadh do cheallan Cryopeded

Tha cuideam air a’ phròiseas leaghaidh airson cultar reòta, agus tha feum air làimhseachadh agus innleachd cheart gus dèanamh cinnteach à ion-obrachadh, ath-bheothachadh agus gnìomhachd nan ceallan as fheàrr. Bidh na dearbh phròtacalan leaghaidh an urra ri seòrsachan cealla sònraichte. Ach, tha leaghadh luath air a mheas àbhaisteach gu:

• Lùghdaich buaidh sam bith air ath-bheothachadh cealla
• Cuidich le bhith a’ lughdachadh na h-ùine nochdaidh do na solutes a tha an làthair anns na meadhanan reòta
• Lùghdaich milleadh sam bith le ath-chriostalachadh deigh

Bidh amaran uisge, amaran grìogagan, no ionnstramaidean fèin-ghluasadach sònraichte air an cleachdadh gu cumanta airson sampallan a leaghadh.

Mar as trice bidh loidhne cealla 1 air a leaghadh aig aon àm airson 1-2 mionaid, le bhith a’ gluasad gu socair ann an amar uisge 37 ℃ gus am bi dìreach beagan deigh air fhàgail san vial mus tèid an nighe ann am meadhan fàis ro-bhlàth.

Airson cuid de cheallan leithid embryos sùbh-craoibhe, tha blàthachadh slaodach deatamach airson a bhith beò.

Tha na ceallan a-nis deiseil airson cultar cealla, iomallachd cealla, no a thaobh bun-cheallan haematopoietic - sgrùdaidhean ion-obrachaidh gus ionracas nan bun-cheallan tabhartais a ghealltainn ro leigheas myeloablative.

Tha e na chleachdadh àbhaisteach cuibhreannan beaga a ghabhail den sampall ro-nighe a chaidh a chleachdadh gus cunntadh cealla a dhèanamh gus dùmhlachd cealla a dhearbhadh airson plating ann an cultar. Faodaidh tu an uairsin toraidhean modhan aonaranachd cealla a mheasadh agus comasachd cealla a dhearbhadh.

Cleachdaidhean as Fheàrr airson Stòradh Cryovials

Tha an cryopreservation soirbheachail de shamhlaichean air an stòradh ann an cryovials an crochadh air mòran eileamaidean anns a 'phròtacal a' gabhail a-steach stòradh ceart agus cumail chlàran.

• Roinn ceallan eadar àiteachan stòraidh- Ma cheadaicheas meud, roinn ceallan eadar criathraidean agus stòradh iad ann an àiteachan eadar-dhealaichte gus an cunnart bho chall sampall a lughdachadh mar thoradh air fàilligeadh uidheamachd.
• Cuir casg air tar-thruailleadh- Tagh criathragan cryogenic sterile aon-chleachdadh no autoclave mus tèid a chleachdadh às deidh sin
• Cleachd vials de mheud iomchaidh airson do cheallan- thig criathragan ann an raon de mheudan eadar 1 agus 5ml. Seachain cus lìonadh vials gus an cunnart bho sgàineadh a lughdachadh.
• Tagh criathragan cryogenic air an snàthadh a-staigh no a-muigh- Bidh cuid de dh’ oilthighean a ’moladh criathraidean le snàithlean a-staigh airson ceumannan sàbhailteachd - faodaidh iad cuideachd casg a chuir air truailleadh aig àm lìonadh no nuair a tha iad air an stòradh anns na naitridean leaghaidh.
• Cuir casg air aodion- Cleachd ròin dà-stealladh air an cumadh a-steach don chaip sgriubha no fàinneachan O gus casg a chuir air aodion agus truailleadh.
• Cleachd còdan-bàr 2D agus vials leubail- gus dèanamh cinnteach à lorg, bidh criathraidean le raointean sgrìobhaidh mòra a’ comasachadh gach vial a bhith air a chomharrachadh gu leòr. Faodaidh còdan-bàr 2D cuideachadh le stiùireadh stòraidh agus cumail chlàran. Tha caiptean le còd dath feumail airson aithneachadh nas fhasa.
• Cumail suas stòraidh iomchaidh- Gus dèanamh cinnteach nach tèid ceallan a chall, bu chòir do shoithichean stòraidh sùil a chumail gu cunbhalach air teòthachd agus ìrean nitrigin leaghaidh. Bu chòir innealan-rabhaidh a chuir a-steach gus rabhadh a thoirt do luchd-cleachdaidh mu mhearachdan.

Ceumannan Sàbhailteachd

Tha nitrigin leaghan air a thighinn gu bhith na chleachdadh cumanta ann an rannsachadh an latha an-diugh ach tha cunnart ann gun tèid droch leòn a dhèanamh ma thèid a chleachdadh gu ceàrr.

Bu chòir uidheamachd dìon pearsanta iomchaidh (PPE) a chaitheamh gus an cunnart bho reothadh, losgadh agus droch thachartasan eile a lughdachadh nuair a thathar a’ làimhseachadh nitrigin leaghaidh. Caith

• Miotagan cryogenic
• Còta obair-lann
• Sgiath aghaidh làn dìon-buaidh a tha cuideachd a’ còmhdach amhach
• Brògan dùinte
• Splashproof aparan plastaig

Bu chòir innealan fuarachaidh nitrigin leaghaidh a bhith air an cur ann an ceàrnaidhean le deagh fhionnarachadh gus an cunnart bho asphyxiation a lughdachadh - bidh naitridean a theich a’ gluasad agus a’ cuir às do ocsaidean àile. Bu chòir siostaman rabhaidh ìosal ocsaidean a bhith aig stòran mòr.

Tha e air leth freagarrach a bhith ag obair ann an càraidean nuair a thathar a’ làimhseachadh nitrigin leaghaidh agus bu chòir casg a chuir air a chleachdadh taobh a-muigh uairean obrach àbhaisteach.

Cryovials gus taic a thoirt don t-sruth-obrach agad

Tha companaidh Suzhou Ace Biomedical a’ tabhann taghadh farsaing de thoraidhean a choinnicheas ri na feumalachdan cryopreservation agad airson diofar sheòrsaichean cheallan. Tha am pasgan a’ toirt a-steach raon de phìoban a bharrachd air raon de cryovials sterile.

Is iad na cryovials againn:

• Cap sgriubha lab 0.5mL 1.5mL 2.0mL criathragan cryovial crióigineach Cryotube bonn cònach le gasket

  ● Sònrachadh 0.5ml, 1.5ml, 2.0ml, le sgiort no gun sgiort
  ● Tha dealbhadh cianail no fèin-sheasmhach, sterile no neo-sterile an dà chuid rim faighinn
  ● Tha pìoban caip sgriubha air an dèanamh de polypropylene ìre meidigeach
  ● Faodar PP Cryotube Vials a reothadh a-rithist agus a leaghadh
  ● Faodaidh dealbhadh a' chaip air an taobh a-muigh lùghdachadh a dhèanamh air coltachd truailleadh rè làimhseachadh sampall.
  ● Cap sgriubha pìoban cryogenic Snàithleanan sgriubha uile-choitcheann airson an cleachdadh
  ● Tiùban a 'freagairt rotors as cumanta
  ● Bidh tiùban o-ring tiùb cryogenic a’ freagairt air bogsaichean reòthadair àbhaisteach 1-òirleach is 2-òirleach, 48 tobar, 81 tobar, 96 tobar agus 100 tobar
  ● Autoclavable gu 121 ° C agus reothadh gu -86 ° C

  PÀIRT NO	Stuth	LUACHMHOR	CAPCOLOR	PCS/BAG	BAGS/CÙIS
  ACHD 05-BL-N	PP	0.5ML	Dubh, Buidhe, Gorm, Dearg, Purpaidh, Geal	500	10
  ACHD 15-BL-N	PP	1.5ML	Dubh, Buidhe, Gorm, Dearg, Purpaidh, Geal	500	10
  ACHD15-BL-NW	PP	1.5ML	Dubh, Buidhe, Gorm, Dearg, Purpaidh, Geal	500	10
  ACHD20-BL-N	PP	2.0ML	Dubh, Buidhe, Gorm, Dearg, Purpaidh, Geal	500	10