Áirítear le caighdeánú na bpróiseas a n-uasmhéadú agus bunú agus comhchuibhiú ina dhiaidh sin, rud a cheadaíonn an fheidhmíocht is fearr go fadtéarmach – neamhspleách ar an úsáideoir. Cinntíonn caighdeánú torthaí ardchaighdeáin, chomh maith lena n-atáirgtheacht agus a n-inchomparáideacht.
Is é sprioc PCR (clasaiceach) ná toradh iontaofa in-atáirgthe a ghiniúint. I gcás iarratas áirithe, toradh anTáirge PCRábhartha freisin. Maidir leis na frithghníomhartha seo, ní mór cúram a ghlacadh chun a chinntiú nach gcuirtear isteach ar shamplaí agus go bhfanann sreabhadh oibre PCR cobhsaí. Go sonrach, is ionann é seo agus íoslaghdú a dhéanamh ar thabhairt isteach éilliúcháin a d'fhéadfadh torthaí bréagacha dearfacha nó diúltacha bréagacha a bheith mar thoradh orthu nó fiú bac a chur ar imoibriú PCR. Ina theannta sin, ba cheart go mbeadh na coinníollacha imoibrithe chomh comhionann agus is féidir do gach sampla aonair laistigh de rith agus ba cheart go mbeidís inaistrithe chuig imoibrithe ina dhiaidh sin (ar an modh céanna). Tagraíonn sé seo do chomhdhéanamh na n-imoibrithe chomh maith leis an gcineál rialaithe teochta sa rothaire. Tá earráidí úsáideora, ar ndóigh, le seachaint oiread agus is féidir.
Thíos, léireoimid na dúshláin atá romhainn le linn ullmhúcháin agus le linn ré PCR – agus na cineálacha cur chuige maidir le réitigh atá ann maidir le hionstraimí agus tomhaltáin a úsáidtear chun sreafaí oibre PCR a chaighdeánú.
Ullmhúchán imoibrithe
Cuimsíonn dáileadh na gcomhpháirteanna imoibrithe isteach i soithí PCR, nó plátaí, faoi seach, dúshláin iolracha nach mór a shárú:
Coinníollacha imoibrithe
Tá dáileoga beacht agus beacht na gcomhpháirteanna aonair fíor-riachtanach nuair a bhíonn sé mar aidhm ag na coinníollacha imoibrithe is comhionann agus is féidir. Chomh maith le dea-theicníc píobaireachta, tá sé ríthábhachtach an uirlis cheart a roghnú. Is minic a bhíonn substaintí i máistir-mheascáin PCR a mhéadaíonn slaodacht nó a ghineann cúr. Le linn an phróisis phíobáin, bíonn fliuchadh substaintiúil ar anleideanna pípéad, rud a laghdóidh cruinneas píbéireachta. Is féidir feabhas a chur ar chruinneas agus ar chruinneas an phróisis phíobáin trí úsáid a bhaint as córais dáileacháin dhíreacha nó leideanna malartacha pípéad nach bhfuil chomh seans maith go fliuchadh.
Éilliúcháin
Le linn an phróisis dáileacháin, gintear aerasóil a d'fhéadfadh sampla eile a éilliú le linn na chéad chéim eile den phíbéad má cheadaítear dóibh teacht ar an taobh istigh den phípéad. Is féidir é seo a chosc trí leideanna scagaire nó córais díláithrithe díreacha a úsáid.
Earraí inchaite marleideanna, ní fhéadfaidh substaintí a chuireann isteach ar an sampla nó a fhalsaíonn an toradh a bheith i soithí agus plátaí a úsáidtear sa sreabhadh oibre PCR. Ina measc seo tá DNA, DNases, RNases agus coscairí PCR, chomh maith le comhpháirteanna a d’fhéadfadh a bheith ag láisteadh ón ábhar le linn an imoibrithe – substaintí ar a dtugtar ábhair láisteála.
Earráid úsáideora
Dá mhéad samplaí a phróiseáiltear, is airde an riosca earráide. Is féidir go dtarlódh sé go héasca go gcuirtear sampla isteach sa soitheach mícheart nó sa tobar mícheart. Is féidir an riosca seo a laghdú go mór ach na toibreacha a mharcáil go héasca inaitheanta. Trí chéimeanna dáileacháin a uathoibriú, íoslaghdaítear an “fachtóir daonna”, ie earráidí agus éagsúlachtaí a bhaineann le húsáideoirí, rud a mhéadaíonn in-atáirgtheacht, go háirithe i gcás méideanna beaga imoibrithe. Éilíonn sé seo plátaí de chobhsaíocht toisí leordhóthanach a úsáid i stáisiún oibre. Soláthraíonn barrachóid ceangailte inléiteacht bhreise don mheaisín, rud a shimplíonn rianú samplaí le linn an phróisis iomláin.
Ríomhchlárú an teirmeabúdair
Is féidir le ríomhchlárú ionstraime a bheith am-íditheach agus seans maith le hearráidí. Oibríonn gnéithe éagsúla timthriallta teirmeach PCR le chéile chun an chéim phróisis seo a shimpliú agus, níos tábhachtaí fós, chun é a dhéanamh sábháilte:
Tá oibriú éasca agus dea-threoir úsáideora mar bhunús le ríomhchlárú éifeachtach. Ag tógáil ar an mbunús seo, cuirfidh riarachán úsáideora atá cosanta ag pasfhocal cosc ar a gcuid clár féin a bheith á n-athrú ag úsáideoirí eile. Má tá il-roimthriallóirí (den chineál céanna) in úsáid, is tairbheach é más féidir clár a aistriú go díreach ó ionstraim amháin go hionstraim eile trí USB nó trí nascacht. Cumasaíonn bogearraí ríomhaireachta riarachán lárnach agus slán ar chláir, ar chearta úsáideoirí agus ar dhoiciméid ar ríomhaire.
Rith PCR
Le linn an rith, déantar DNA a aimpliú sa soitheach imoibriúcháin, áit ar cheart coinníollacha imoibrithe comhionanna comhsheasmhacha a chur ar gach sampla. Tá na gnéithe seo a leanas ábhartha don phróiseas:
Rialú teochta
Tá cruinneas den scoth maidir le rialú teochta agus aonchineálacht an bhloc rothaí mar bhunús le haghaidh riochtú teochta fiú na samplaí go léir. Is iad ardcháilíocht na n-eilimintí teasa agus fuaraithe (eilimintí peltier), chomh maith leis an mbealach a nasctar iad seo leis an mbloc, na fachtóirí cinntitheacha a chinnfidh an riosca maidir le neamhréireachtaí teochta ar a dtugtar an "iarmhairt imeall"
Galú
Níor cheart go n-athródh tiúchan na gcomhpháirteanna imoibrithe aonair le linn an imoibrithe de bharr galú. Seachas sin, is féidir go bhfuil an-beagTáirge PCRféadfar é a ghiniúint, nó gan aon cheann ar chor ar bith. Tá sé ríthábhachtach mar sin galú a íoslaghdú trí shéala slán a chinntiú. Sa chás seo, oibríonn clúdach téite an teirm-chúrsóra agus séala an tsoithigh as láimh a chéile. Tá roghanna séalaithe éagsúla ar fáil le haghaidhPlátaí PCR (nasc: alt séalaithe), trína ndéantar an séala is fearr a bhaint amach trí shéalaithe teasa. D'fhéadfadh dúnadh eile a bheith oiriúnach freisin, chomh fada agus is féidir brú teagmhála an chlúdaigh rothaithe a choigeartú go dtí an séala roghnaithe.
Tá caighdeánú próisis i bhfeidhm chun torthaí cruinne agus in-atáirgthe a chosaint san fhadtéarma. Áiríonn sé seo cothabháil rialta an trealaimh chun a chinntiú go mbíonn sé i riocht maith oibre i gcónaí. Ba cheart go mbeadh gach ábhar inchaite ar ardchaighdeán i gcónaí thar gach beart a tháirgtear, agus ní mór a n-infhaighteacht iontaofa a chinntiú.
Am postála: Nov-29-2022