De standerdisearring fan prosessen omfettet har optimisaasje en folgjende oprjochting en harmonisaasje, wêrtroch lange termyn optimale prestaasjes hawwe - ûnôfhinklik fan 'e brûker. Standerdisaasje soarget foar resultaten fan hege kwaliteit, lykas ek har reprodusearberens en fergelykberens.
It doel fan (klassike) PCR is de generaasje fan in betrouber en reprodusearbere resultaat. Foar bepaalde applikaasjes, de opbringst fan 'ePCR-produktis ek relevant. Foar dizze reaksjes moatte soarch moatte wurde nommen om te soargjen dat samples net kompromitteare binne en dat de PCR-workflow stabyl bliuwt. Spesifyk oerset dit om de yntroduksje fan 'e ynlieding te minimalisearjen dy't koe liede ta falske positive of falske negative resultaten of sels de PCR-reaksje ynhibit. Fierder soe de reaksje-omstannichheden sa identyk wêze moatte foar elk yndividuele stekproef binnen in run en wês ek nei folgjende reaksjes (fan deselde metoade). Dit ferwiist nei de gearstalling fan 'e reaksjes, lykas oan it soarte temperatuerkontrôle yn' e sykler. Brûkerfouten, moatte fansels safolle mooglik wurde foarkommen.
Hjirûnder bewize wy de útdagings dy't wurde tsjinkaam by tarieding en troch de run fan in PCR - en de oanpak oan oplossingen dy't bestiet oangeande ynstruminten en konsumearders dy't brûkt wurde foar de standerdisearring fan 'e PCR-workflows.
Reaksje tarieding
De dispensing fan reaksjekomponinten yn PCR-skippen, of platen, omfettet respektivelik meardere útdagings dy't moatte wurde oerwûn:
Reaksje betingsten
It krekte en krekte dosearjen fan 'e yndividuele komponinten is ûnmisber as jo rjochte binne foar de meast identike reaksje-omstannichheden mooglik. Njonken in goede pipetting-technyk is it selektearjen fan it juste ark kritysk. PCR Master-miks befetsje faak stoffen dy't viskositeit fergrutsje of skuon generearje. Tidens it pipettingsproses, dizze foarsprong ta substansjeel wetting fan 'ePipette tips, dus ferminderjen fan pipetting krektens. It gebrûk fan direkte dispensen systemen as alternative pipette-tips dy't minder benijd binne om de krektens en presys fan it pipettingproses te ferbetterjen.
Folamonnaasjes
Tidens it dispensenproses wurde Aerosols generearre dat, as tastien om de binnenkant fan 'e pipette te berikken, kin potinsjeel in oare stekproef kontaminearje tidens de folgjende pipetting stap. Dit kin wurde foarkommen troch filter-tips of direkte Displacement-systemen te brûken.
Konsuminten lykasTips, skippen en platen dy't wurde brûkt yn 'e PCR-workflow moatte gjin stoffen befetsje dy't it stekproef kompromitte of befrijt it resultaat. Dizze omfetsje DNA, Dnases, rnases en PCR-ynhibitoaren, lykas komponinten dy't komponinten kinne potensjeel út it materiaal hawwe yn 'e reaksje yn' e reaksje yn 'e reaksje.
Brûkersflater
De mear samples wurde ferwurke, hoe heger it flaterrisiko. It kin maklik barre dat in stekproef is pipet yn 'e ferkearde skip of de ferkearde goed. Dit risiko kin oanmerklik fermindere wurde troch maklik te markearjen fan 'e boarnen. Troch de automatisearring fan útjaan fan stappen, de "minsklike faktor", dat freget flaters en brûker-relatearre fariaasjes, binne minimalisearre, dus tanimmende reprozukens, foaral yn 't gefal fan' e lytse reaksjevolumen. Dit fereasket platen fan foldwaande dimensearre stabiliteit om te wurkjen yn in wurkstasjon. Befestige Barcodes leverje ekstra masine-lêsberens, dy't de sample tracking oer it heule proses ferienfâldiget.
Programmearring fan 'e thermocycler
Programmering in ynstrumint kin om tiid-konsumearje te wêzen as flater-benadere. Ferskillende PCR Thermyske Cycler-funksjes wurkje gear om dizze prosesstap te ferienfâldigjen en, it wichtichste, om it feilich te meitsjen:
Maklike operaasje en goede brûkers begelieding binne de basis fan effisjinte programmearring. Bouwe op dizze stifting, Wachtwurd-beskerme brûkersbestjoerder sil foarkomme dat jo eigen programma's wurde feroare troch oare brûkers. As meardere cyclers (fan itselde type) yn gebrûk binne, is it foardielich as in programma direkt kin wurde oerdroegen fan it iene ynstrumint nei de oare fia USB of Konnektivität. COMPUTER SOFTWARE Skeakelt Sintraal en feilige administraasje fan programma's, brûkersrjochten en dokuminten op in kompjûter yn te skeakeljen.
PCR Run
Tidens de run is DNA te fersterkjen yn 'e reaksjeskip, wêr't elk stekproef ûnderwurpen moat wurde ûnderwurpen oan identike, konsistente reaksje omstannichheden. De folgjende aspekten binne relevant foar it proses:
Temperatuerkontrôle
Prachtige krektens yn temperatuerkontrôle en homogeniteit fan it Cycler-blok binne de basis foar sels temperatuer conditioning fan alle samples. De hege kwaliteit fan 'e ferwaarming en koelende eleminten), lykas de manier wêrop dizze ferbûn binne mei it blok, binne de beslutende faktoaren dy't it risiko sille bepale dat it risiko-ôfwiking bekend as it "Ed-effekt"
Villaporation
De konsintraasjes fan 'e komponinten fan' e yndividuele reaksje moatte net feroarje oer de rin fan 'e reaksje fanwege ferdamping. Oars is it mooglik dat heul lytsPCR-produktkin wurde generearre, as hielendal net. It is dêrom krúsjaal om ferdamping te minimalisearjen troch te soargjen foar in feilige segel. Yn dit gefal, it ferwaarmde deksel fan 'e thermocycler en it segel fan it skip fan it skip hân hân yn hân. FERSKILLENDE SEALING OPTIONS BINNE BESKIKBAAR FOARPCR-platen (kepling: Sealing artikel), wêrtroch de bêste segel wurdt berikt troch hjittegeling. Oare slutingen kinne ek geskikt wêze, salang't de kontaktdruk fan 'e syklier-lid kin wurde oanpast oan' e selekteare segel.
FeroaringSûndersjoneel is yn plak om krekte en reprodusearbere resultaten te beskermjen yn 'e lange termyn. Dit omfettet regelmjittich ûnderhâld fan 'e apparatuer om te soargjen dat it altyd yn goede wurkjende tastân is. Alle gearstallingen moatte wêze fan konsekwint hege kwaliteit oer alle produsearre in protte produsearre, en har betroubere beskikberens moatte garandearre wurde.
Posttiid: Nov-29-2022