Que sont les cryovials ?
Flacons de stockage cryogéniquesont de petits récipients cylindriques et bouchés conçus pour stocker et conserver des échantillons à des températures ultra-basses. Bien que traditionnellement ces flacons soient fabriqués en verre, ils sont désormais beaucoup plus couramment fabriqués en polypropylène pour des raisons de commodité et de coût. Les cryovials ont été soigneusement conçus pour résister à des températures aussi basses que -196 ℃ et pour s'adapter à une grande variété de types de cellules. Celles-ci varient des cellules souches de diagnostic, des micro-organismes, des cellules primaires aux lignées cellulaires établies. Au-delà de cela, il peut également y avoir de petits organismes multicellulaires stockés dansflacons de stockage cryogénique, ainsi que les acides nucléiques et les protéines qui doivent être stockés à des températures de stockage cryogéniques.
Les flacons de stockage cryogénique se présentent sous différentes formes, et trouver le type correct qui répond à tous vos besoins vous garantira le maintien de l'intégrité des échantillons sans payer trop cher. Lisez notre article pour en savoir plus sur les principales considérations d'achat lors de la sélection du flacon cryogénique adapté à votre application de laboratoire.
Propriétés du flacon cryogénique à prendre en compte
Threads externes ou internes
Les gens font souvent ce choix en fonction de leurs préférences personnelles, mais il existe en fait des différences fonctionnelles clés à prendre en compte entre les deux types de fils.
De nombreux laboratoires optent souvent pour des flacons à filetage interne afin de minimiser l'espace de stockage des tubes et de permettre un meilleur ajustement dans les boîtes de congélation. Malgré cela, vous pouvez considérer que l’option à filetage externe est la meilleure option pour vous. Ils sont considérés comme présentant un risque de contamination plus faible, en raison de leur conception qui rend encore plus difficile la pénétration d’autre chose que l’échantillon dans le flacon.
Les flacons à filetage externe sont généralement préférés pour les applications génomiques, mais l’une ou l’autre option est considérée comme adaptée aux biobanques et à d’autres applications à haut débit.
Une dernière chose à considérer concernant le filetage : si votre laboratoire utilise l'automatisation, vous devrez peut-être réfléchir au type de filetage qui peut être utilisé avec les pinces à instruments.
Volume de stockage
Les flacons cryogéniques sont disponibles dans une variété de tailles pour couvrir la plupart des besoins, mais ils varient généralement entre une capacité de 1 ml et 5 ml.
La clé est de s’assurer que votre cryovial n’est pas trop rempli et qu’il y a de l’espace supplémentaire disponible, au cas où l’échantillon gonflerait pendant la congélation. En pratique, cela signifie que les laboratoires optent pour des flacons de 1 mL pour conserver des échantillons de 0,5 mL de cellules en suspension dans du cryoprotecteur, et des flacons de 2,0 mL pour 1,0 mL d’échantillon. Une autre astuce pour ne pas trop remplir vos flacons est de vous faire utiliser des cryotubes avec des marquages gradués, ce qui vous permettra d'éviter tout gonflement qui pourrait provoquer des fissures ou des fuites.
Bouchon à vis ou couvercle rabattable
Le type de couvercle que vous choisissez dépend principalement de l'utilisation ou non de l'azote en phase liquide. Si tel est le cas, vous aurez besoin de flacons cryogéniques à bouchon à vis. Cela garantit qu'ils ne peuvent pas s'ouvrir accidentellement en raison d'une mauvaise manipulation ou de changements de température. De plus, les bouchons à vis permettent une récupération plus facile des boîtes cryogéniques et un stockage plus efficace.
Cependant, si vous n’utilisez pas d’azote liquide et que vous avez besoin d’un couvercle plus pratique et plus facile à ouvrir, un couvercle rabattable est la meilleure option. Cela vous fera gagner beaucoup de temps car son ouverture est beaucoup plus facile, ce qui le rend particulièrement utile dans les opérations à haut débit et celles qui utilisent des processus par lots.
Sécurité des scellés
La meilleure façon de garantir une fermeture sécurisée est de vous assurer que le bouchon et la bouteille de votre cryovial sont tous deux fabriqués à partir du même matériau. Cela garantira qu’ils rétrécissent et s’étendent à l’unisson. S’ils sont fabriqués à partir de matériaux différents, ils rétréciront et se dilateront à des rythmes différents en fonction des changements de température, entraînant des écarts, des fuites potentielles et une contamination qui en résulte.
Certaines entreprises proposent des rondelles et une bride doubles pour le plus haut niveau de sécurité des échantillons sur les cryotubes à filetage externe. Les flacons cryogéniques à joint torique sont considérés comme les plus fiables pour les flacons cryogéniques à filetage interne.
Verre vs plastique
Pour des raisons de sécurité et de commodité, de nombreux laboratoires utilisent désormais du plastique, généralement du polypropylène, au lieu d'ampoules en verre thermoscellables. Les ampoules en verre sont désormais considérées comme un choix obsolète, car pendant le processus de scellage, des fuites invisibles peuvent se développer, ce qui, une fois décongelées après stockage dans l'azote liquide, peut les faire exploser. Ils ne sont pas non plus aussi adaptés aux techniques d’étiquetage modernes, essentielles pour garantir la traçabilité des échantillons.
Fonds autoportants ou arrondis
Les flacons cryogéniques sont disponibles sous forme autonome avec des fonds en forme d'étoile ou sous forme de fonds arrondis. Si vous devez placer vos flacons sur une surface, assurez-vous de choisir le modèle autonome.
Traçabilité et suivi des échantillons
Ce domaine du stockage cryogénique est souvent négligé, mais le suivi et la traçabilité des échantillons sont un aspect crucial à prendre en compte. Les échantillons cryogéniques peuvent être conservés pendant de nombreuses années, au cours desquelles le personnel peut changer et, sans dossiers correctement tenus, ils peuvent devenir non identifiables.
Assurez-vous de choisir des flacons qui rendent l’identification des échantillons aussi simple que possible. Les éléments à surveiller incluent :
De grandes zones d'écriture pour enregistrer suffisamment de détails afin que les enregistrements puissent être retrouvés si un flacon se trouve à un endroit incorrect – généralement l'identité de la cellule, la date de gel et les initiales de la personne responsable sont suffisantes.
Codes-barres pour faciliter la gestion des échantillons et les systèmes de suivi
Casquettes colorées
Une note pour l'avenir : des puces ultra-résistantes au froid sont en cours de développement qui, lorsqu'elles sont installées dans des flacons cryogéniques individuels, pourraient potentiellement stocker un historique thermique détaillé ainsi que des informations détaillées sur les lots, des résultats de tests et d'autres documents de qualité pertinents.
En plus de prendre en compte les différentes spécifications des flacons disponibles, il convient également de réfléchir au processus technique de stockage des flacons cryogéniques dans l'azote liquide.
Température de stockage
Il existe plusieurs méthodes de stockage pour le stockage cryogénique des échantillons, chacune fonctionnant à une température spécifique. Les options et la température à laquelle elles fonctionnent incluent :
Phase liquide LN2 : maintenir une température de -196℃
Phase vapeur LN2 : sont capables de fonctionner dans des plages de températures spécifiques comprises entre -135°C et -190°C selon le modèle.
Congélateurs à vapeur d'azote : -20°C à -150°C
Le type de cellules stockées et la méthode de stockage préférée du chercheur détermineront laquelle des trois options disponibles votre laboratoire utilise.
Cependant, en raison des températures extrêmement basses utilisées, tous les tubes ou modèles ne seront pas adaptés ou sûrs. Les matériaux peuvent devenir extrêmement cassants à des températures extrêmement basses. L'utilisation d'un flacon non adapté à une utilisation à la température choisie pourrait provoquer l'éclatement ou la fissuration du récipient pendant le stockage ou la décongélation.
Vérifiez attentivement les recommandations du fabricant concernant l'utilisation correcte, car certains flacons cryogéniques sont adaptés à des températures aussi basses que -175°C, certains -150°C, d'autres seulement 80°C.
Il convient également de noter que de nombreux fabricants déclarent que leurs flacons cryogéniques ne sont pas adaptés à une immersion en phase liquide. Si ces flacons sont stockés en phase liquide lors du retour à température ambiante, ces flacons ou leurs bouchons peuvent se briser en raison d'une accumulation rapide de pression provoquée par de petites fuites.
Si les cellules doivent être conservées dans la phase liquide de l'azote liquide, envisagez de les conserver dans des flacons cryogéniques appropriés, thermoscellés dans des tubes cryoflex, ou de les conserver dans des ampoules en verre hermétiquement fermées.
Heure de publication : 25 novembre 2022