Que sont les Cryovials ?
Flacons de stockage cryogéniqueCe sont de petits récipients cylindriques, fermés et conçus pour le stockage et la conservation d'échantillons à très basse température. Traditionnellement en verre, ces flacons sont aujourd'hui beaucoup plus souvent fabriqués en polypropylène, pour des raisons de commodité et de coût. Les cryotubes ont été soigneusement conçus pour résister à des températures allant jusqu'à -196 °C et accueillir une grande variété de types cellulaires, allant des cellules souches diagnostiques aux micro-organismes, en passant par les cellules primaires et les lignées cellulaires établies. De plus, de petits organismes multicellulaires peuvent également y être stockés.flacons de stockage cryogénique, ainsi que les acides nucléiques et les protéines qui doivent être stockés à des niveaux de température de stockage cryogénique.
Les flacons de stockage cryogénique existent sous différentes formes. Trouver le modèle adapté à vos besoins vous permettra de préserver l'intégrité de vos échantillons sans surcoût. Consultez notre article pour en savoir plus sur les principaux critères d'achat pour choisir le flacon cryogénique adapté à votre application en laboratoire.
Propriétés du flacon cryogénique à prendre en compte
Filetages externes et internes
Les gens font souvent ce choix en fonction de leurs préférences personnelles, mais il existe en fait des différences fonctionnelles clés à prendre en compte entre les deux types de fils.
De nombreux laboratoires optent souvent pour des flacons à filetage interne afin de minimiser l'espace de stockage des tubes et de faciliter leur insertion dans les congélateurs. Malgré cela, vous pourriez considérer que l'option à filetage externe est la meilleure solution. Ils sont considérés comme présentant un risque de contamination moindre, car leur conception rend encore plus difficile la pénétration d'autres éléments que l'échantillon dans le flacon.
Les flacons à filetage externe sont généralement préférés pour les applications génomiques, mais l'une ou l'autre option est considérée comme adaptée à la biobanque et à d'autres applications à haut débit.
Une dernière chose à prendre en compte concernant le filetage : si votre laboratoire utilise l’automatisation, vous devrez peut-être réfléchir au filetage qui peut être utilisé avec les pinces d’instruments.
Volume de stockage
Les flacons cryogéniques sont disponibles dans une variété de tailles pour couvrir la plupart des besoins, mais ils varient généralement entre une capacité de 1 ml et 5 ml.
L'essentiel est de veiller à ce que votre cryotube ne soit pas trop rempli et à ce qu'il y ait suffisamment d'espace disponible au cas où l'échantillon gonflerait pendant la congélation. En pratique, les laboratoires optent pour des flacons de 1 ml pour stocker des échantillons de 0,5 ml de cellules en suspension dans un cryoprotecteur, et de 2 ml pour 1 ml d'échantillon. Une autre astuce pour éviter de surcharger vos flacons est d'utiliser des cryotubes gradués, ce qui évitera tout gonflement susceptible de provoquer des fissures ou des fuites.
Bouchon à vis ou bouchon à clapet
Le choix du type de bouchon dépend principalement de l'utilisation d'azote en phase liquide. Dans ce cas, il vous faudra des cryotubes à bouchon à vis. Cela garantit qu'ils ne s'ouvriront pas accidentellement suite à une mauvaise manipulation ou à des variations de température. De plus, les bouchons à vis facilitent la récupération des boîtes cryogéniques et optimisent le stockage.
Cependant, si vous n'utilisez pas d'azote liquide et recherchez un bouchon plus pratique et plus facile à ouvrir, un bouchon à clapet est la meilleure option. Il vous fera gagner un temps précieux grâce à sa facilité d'ouverture, ce qui le rend particulièrement utile pour les opérations à haut débit et celles utilisant des procédés par lots.
Sceller la sécurité
La meilleure façon de garantir une étanchéité parfaite est de s'assurer que le bouchon et le flacon de votre cryotube sont fabriqués dans le même matériau. Cela garantira leur rétraction et leur dilatation simultanées. S'ils sont fabriqués avec des matériaux différents, ils se rétracteront et se dilateront à des rythmes différents selon la température, ce qui entraînera des fissures et des fuites potentielles, et donc une contamination.
Certaines entreprises proposent des joints doubles et une bride pour une sécurité optimale des échantillons sur les tubes cryogéniques à filetage externe. Les tubes cryogéniques à joint torique sont considérés comme les plus fiables pour les tubes cryogéniques à filetage interne.
Verre vs plastique
Pour des raisons de sécurité et de commodité, de nombreux laboratoires utilisent désormais des ampoules en plastique, généralement en polypropylène, plutôt que des ampoules en verre thermoscellables. Ces dernières sont aujourd'hui considérées comme obsolètes, car lors du scellage, des fuites invisibles, de type micro-trous, peuvent se former et exploser après décongélation dans l'azote liquide. Elles ne sont pas non plus adaptées aux techniques modernes d'étiquetage, pourtant essentielles à la traçabilité des échantillons.
Autoportant vs. Fond arrondi
Les flacons cryogéniques sont disponibles en version autoportante avec fond étoilé ou arrondi. Si vous devez les poser sur une surface, privilégiez la version autoportante.
Traçabilité et suivi des échantillons
Ce domaine du stockage cryogénique est souvent négligé, mais le suivi et la traçabilité des échantillons sont essentiels. Les échantillons cryogéniques peuvent être conservés pendant de nombreuses années, période pendant laquelle le personnel peut changer et, sans registres correctement tenus, ils peuvent devenir impossibles à identifier.
Assurez-vous de choisir des flacons facilitant l'identification des échantillons. Voici quelques points à prendre en compte :
De grandes zones d'écriture permettent d'enregistrer suffisamment de détails pour que les enregistrements puissent être retrouvés si un flacon est situé à un endroit incorrect – généralement, l'identité de la cellule, la date de congélation et les initiales de la personne responsable sont suffisantes.
Codes-barres pour faciliter la gestion des échantillons et les systèmes de suivi
Bouchons colorés
Une note pour l’avenir : des puces ultra-résistantes au froid sont en cours de développement. Une fois installées dans des cryotubes individuels, elles pourraient potentiellement stocker un historique thermique détaillé ainsi que des informations détaillées sur les lots, des résultats de tests et d’autres documents de qualité pertinents.
Outre la prise en compte des différentes spécifications des flacons disponibles, il convient également de réfléchir au processus technique de stockage des cryotubes dans l’azote liquide.
Température de stockage
Il existe plusieurs méthodes de stockage cryogénique des échantillons, chacune fonctionnant à une température spécifique. Les options et la température de fonctionnement sont les suivantes :
LN2 en phase liquide : maintenir une température de -196℃
LN2 en phase vapeur : sont capables de fonctionner à des plages de température spécifiques comprises entre -135°C et -190°C selon le modèle.
Congélateurs à vapeur d'azote : -20°C à -150°C
Le type de cellules stockées et la méthode de stockage préférée du chercheur détermineront laquelle des trois options disponibles votre laboratoire utilisera.
Cependant, en raison des températures extrêmement basses utilisées, tous les tubes ou modèles ne sont pas adaptés ou sûrs. Les matériaux peuvent devenir extrêmement cassants à des températures extrêmement basses ; l'utilisation d'un flacon inadapté à la température choisie pourrait provoquer son éclatement ou sa fissuration lors du stockage ou de la décongélation.
Vérifiez attentivement les recommandations des fabricants concernant l'utilisation appropriée, car certains flacons cryogéniques conviennent à des températures aussi basses que -175°C, certains à -150°C, d'autres seulement à 80°C.
Il convient également de noter que de nombreux fabricants indiquent que leurs flacons cryogéniques ne conviennent pas à l'immersion en phase liquide. Si ces flacons sont stockés dans cette phase liquide après leur retour à température ambiante, ils ou leurs bouchons peuvent se briser en raison d'une montée en pression rapide causée par de petites fuites.
Si les cellules doivent être stockées dans la phase liquide de l'azote liquide, envisagez de stocker les cellules dans des flacons cryogéniques appropriés thermoscellés dans des tubes cryoflex ou de stocker les cellules dans des ampoules en verre hermétiquement fermées.
Date de publication : 25 novembre 2022