La micropipette est probablement l’outil le plus utilisé en laboratoire. Ils sont utilisés par des scientifiques dans un large éventail de secteurs, notamment les laboratoires universitaires, hospitaliers et médico-légaux, ainsi que le développement de médicaments et de vaccins, pour transférer de très petites quantités précises de liquide.
Bien qu'il puisse être ennuyeux et frustrant de repérer des bulles d'air dans la pointe de pipette jetable si elles ne sont pas repérées ou ignorées, cela peut avoir un impact énorme sur la fiabilité et la reproductibilité des résultats.
La bonne nouvelle est qu’il existe quelques mesures simples que vous pouvez prendre pour éviter les bulles d’air et améliorer l’efficacité du laboratoire, la satisfaction des opérateurs ainsi que l’exactitude et la précision des résultats.
Ci-dessous, nous explorons les conséquences d’une bulle d’air dans la pointe de votre pipette et ce que vous devez faire ensuite.
La conséquence des bulles dans lePointe de pipette
Même si vous utilisez les pipettes les plus précises, haut de gamme, bien entretenues, entretenues et étalonnées, la fiabilité de vos résultats peut être affectée par des erreurs de laboratoire. Quand les bulles entrent dans leconseilcela peut avoir plusieurs résultats.
● Lorsque l'utilisateur repère la bulle d'air, il doit passer du temps à distribuer le liquide aspiré de manière appropriée, éjecter l'embout et recommencer le processus.
● Des bulles d'air non détectées peuvent entraîner un faible transfert de volume, modifiant ainsi la concentration des mélanges réactionnels, conduisant à des expériences ratées et à des résultats douteux ou peu fiables.
Ces résultats peuvent avoir plusieurs conséquences (1).
● Diminution de l'efficacité du laboratoire – Les tests et analyses devront être répétés, ce qui entraînera des coûts de main d'œuvre et de matériel, qui peuvent être assez importants.
● Résultats de tests douteux ou incorrects – Si des résultats incorrects sont publiés, il peut y avoir des conséquences plus graves, notamment un diagnostic erroné et de mauvais résultats pour les patients.
● Retrait des manuscrits des journaux – Si les pairs ne parviennent pas à reproduire vos résultats en raison de bulles d'air provoquant des résultats inexacts, les articles peuvent être retirés.
Meilleures pratiques pour éviter les bulles d'air
Dans la majorité des cas, les bulles d’air dans les pointes des pipettes sont causées par une erreur de l’opérateur. Une mauvaise technique due à un entraînement insuffisant ou à la fatigue est généralement le problème sous-jacent.
Le pipetage est une opération qualifiée qui nécessite 110 % d'attention, une formation et une pratique appropriées pour obtenir des résultats cohérents et précis.
Bien qu'il existe plusieurs mesures que vous pouvez prendre pour réduire les erreurs générales de pipetage, nous avons mis en évidence ci-dessous quelques bonnes pratiques qui peuvent être utilisées pour éviter les bulles d'air danspointes de pipettes.
Améliorer la technique utilisateur
Pipeter lentement
Si le piston est relâché trop rapidement lors de l'aspiration, des bulles d'air peuvent s'introduire dans l'embout. Cela peut être particulièrement problématique lors du transfert de liquides visqueux. Un effet similaire peut se produire si le piston est relâché trop rapidement après la distribution.
Pour éviter les bulles d'air lors de l'aspiration, veillez à actionner le piston des pipettes manuelles de manière douce et régulière, en appliquant une force constante.
Utilisez la bonne profondeur d’immersion
Ne pas immerger la pointe de la pipette suffisamment profondément sous le ménisque du réservoir de liquide peut entraîner l'aspiration d'air et donc la formation de bulles.
Cependant, immerger la pointe trop profondément peut aspirer plus de liquide en raison de l'augmentation de la pression ou des gouttelettes peuvent se former à l'extérieur de la pointe. Il est donc important d'immerger la pointe.pointe de pipetteà la bonne profondeur.
La profondeur recommandée varie selon la taille, le type et la marque de la pipette. Bien que les recommandations du fabricant doivent être suivies, voici un guide général fourni par le Laboratoire national de physique.
Guide sur la profondeur d'immersion de la pointe
Volume de la pipette (µl) et profondeur d'immersion (mm)
- 1 – 100 : 2 – 3
- 100 – 1 000 : 2 – 4
- 1 000 – 5 000 : 2 – 5
Pré-MouilléPointes de pipettes
Lors du pipetage de volumes supérieurs à 10 µlpointes de pipettessont généralement pré-humidifiés en les remplissant plusieurs fois avec le liquide distribué et en l'expulsant pour améliorer la précision.
Ne pas les pré-humidifier peut entraîner la formation de bulles d'air, en particulier lors de l'utilisation de liquides visqueux ou hydrophobes. Pour éviter les bulles d'air, assurez-vous de pré-humidifier les pointes lorsque vous pipetez un volume supérieur à 10 µl.
Utiliser des techniques de pipetage inversé si cela est approprié
Substances visqueuses : Un problème courant lors du pipetage de substances visqueuses telles que les solutions de protéines ou d'acides nucléiques, le glycérol et le Tween 20/40/60/80 est la formation fréquente de bulles lorsque la technique de pipetage direct est utilisée.
Pipeter lentement, en utilisant la technique de pipetage inversé, réduit le risque de formation de bulles lors du transfert de solutions visqueuses.
Technique ELISA
Le pipetage inversé est également recommandé lors du pipetage de petits volumes dansMicroplaques de test 96 puitspour les techniques ELISA. Lorsque des bulles d'air sont aspirées dans la pipette ou distribuées dans des puits lors de l'ajout de réactifs, cela peut influencer les valeurs de densité optique et les résultats. Le pipetage inversé est recommandé pour minimiser ou éliminer ce problème.
Utiliser des pipettes ergonomiques
Les pipettes à l'ancienne qui n'ont pas été conçues dans un souci d'ergonomie nécessitent plus d'efforts physiques, vous vous fatiguez et votre technique de pipetage devient bâclée et médiocre. Les erreurs mentionnées ci-dessus, telles que la libération rapide du piston, peuvent survenir plus fréquemment.
En investissant dans une solution plus ergonomique, vous pourrez conserver une excellente technique et éviter la formation de bulles d’air dues à une mauvaise technique.
Prenez le temps de former le personnel
La formation et l'évaluation régulières du personnel aux techniques de pipetage peuvent garantir que les erreurs de l'opérateur et la formation de bulles d'air sont réduites.
Envisagez des solutions plus automatisées
Comme indiqué ci-dessus, la plupart des bulles d'air sont provoquées par l'opérateur. Il peut être possible de réduire les erreurs et le confort de l'opérateur en utilisant des pipettes électroniques ou une plate-forme flexible de manipulation de liquides telle que laRobot de manipulation de liquides Agilent Bravo.
Utiliser une bonne qualitéPointes de pipettes
Les micropipettes sont généralement achetées avec soin, mais la qualité de la pointe de pipette jetable est souvent négligée. En raison de l'influence d'une pointe sur les résultats de pipetage, la norme ISO 8655 exige un étalonnage supplémentaire si des pipettes et des pointes de fabricants différents sont utilisées.
Cela peut être dû au fait que de nombreux embouts bon marché peuvent paraître beaux au départ, mais lorsque vous les étudiez attentivement, ils peuvent présenter des éclairs, des saillies, des rayures et des bulles d'air, ou être pliés ou contenir des impuretés.
L'achat d'embouts de bonne qualité en polypropylène de haute qualité peut réduire l'apparition de bulles d'air.
Pour conclure
La présence de bulles d'air dans la pointe de votre pipette a un impact sur l'efficacité du laboratoire ainsi que sur l'imprécision et l'imprécision des résultats. Nous avons noté plusieurs mesures que vous pouvez prendre pour éviter que des bulles d'air ne pénètrent dans lepointe de pipette.
Cependant, si la mauvaise qualitépointes de pipettesprovoquent la pénétration de bulles d'air dans la pointe de votre pipette, vous serez heureux de savoir que notre ajustement universelpointes de pipettessont fabriqués selon les normes les plus élevées et sont fabriqués en polypropylène pur de première qualité.
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Heure de publication : 29 décembre 2022