Mikropipetti on luultavasti eniten käytetty työkalu laboratoriossa. Tiedemiehet käyttävät niitä useilla eri aloilla, mukaan lukien korkeakoulut, sairaalat ja oikeuslääketieteen laboratoriot sekä lääke- ja rokotekehitys siirtääkseen tarkkoja, hyvin pieniä määriä nestettä.
Vaikka voi olla ärsyttävää ja turhauttavaa havaita ilmakuplia kertakäyttöisen pipetin kärjessä, jos niitä ei havaita tai jätetä huomiotta, sillä voi olla valtava vaikutus tulosten luotettavuuteen ja toistettavuuteen.
Hyvä uutinen on, että on olemassa joitain yksinkertaisia toimenpiteitä, joilla voit estää ilmakuplien muodostumista ja parantaa laboratorion tehokkuutta, käyttäjien tyytyväisyyttä sekä tulosten tarkkuutta.
Alla tutkimme, mitä seurauksia siitä, että pipetin kärkeen tulee ilmakupla, ja mitä sinun pitäisi tehdä seuraavaksi.
Kuplien seurauksetPipetin kärki
Vaikka käyttäisit tarkimpia, huippuluokan, hyvin huollettuja, huollettuja ja kalibroituja pipettejä, laboratoriovirheet voivat vaikuttaa tulostesi luotettavuuteen. Kun kuplia pääsee sisäänkärkisillä voi olla useita tuloksia.
● Kun käyttäjä havaitsee ilmakuplan, hänen on käytettävä aikaa imetyn nesteen asianmukaiseen annostelemiseen, poistettava kärki ja aloitettava prosessi uudelleen.
● Havaitsemattomat ilmakuplat voivat johtaa pieneen tilavuuden siirtoon, mikä muuttaa reaktioseosten pitoisuutta, mikä johtaa epäonnistuneisiin kokeisiin ja kyseenalaisiin tai epäluotettaviin tuloksiin.
Näillä tuloksilla voi olla useita seurauksia (1).
● Vähentynyt laboratoriotehokkuus – Testit ja määritykset on toistettava, mikä aiheuttaa työ- ja materiaalikustannuksia, jotka voivat olla melko suuria.
● Kyseenalaiset tai virheelliset testitulokset – Jos vääriä tuloksia julkaistaan, voi olla vakavampia seurauksia, kuten virhediagnoosi ja huonot potilastulokset.
● Käsikirjoitusten poistaminen lehdistä – Jos vertaiskumppanit eivät pysty kopioimaan tuloksiasi virheellisiä tuloksia aiheuttavien ilmakuplien vuoksi, paperit voidaan poistaa.
Parhaat käytännöt ilmakuplien estämiseksi
Useimmissa tapauksissa pipetin kärkien ilmakuplat johtuvat käyttäjän virheestä. Taustalla on yleensä huono tekniikka, joka johtuu riittämättömästä harjoittelusta tai väsymyksestä.
Pipetointi on taitava toimenpide, joka vaatii 110 % tarkkaavaisuutta, asianmukaista koulutusta ja harjoittelua tasaisten ja tarkkojen tulosten saavuttamiseksi.
Vaikka yleisten pipetointivirheiden vähentämiseksi voit tehdä useita asioita, olemme alla korostaneet joitain parhaita käytäntöjä, joita voidaan käyttää ilmakuplien välttämiseksipipetin kärjet.
Paranna käyttäjätekniikkaa
Pipetoi hitaasti
Jos mäntä vapautetaan liian nopeasti aspiroitaessa, kärkeen voi päästä ilmakuplia. Tämä voi olla erityisen ongelmallista siirrettäessä viskooseja nesteitä. Samanlainen vaikutus voi ilmetä, jos mäntä vapautetaan liian nopeasti annostelun jälkeen.
Välttääksesi ilmakuplien muodostumisen imemisen aikana varmista, että käytät käsikäyttöisten pipettien mäntiä tasaisesti ja säännöllisesti käyttämällä tasaista voimaa.
Käytä oikeaa upotussyvyyttä
Jos pipetin kärkeä ei upota tarpeeksi syvälle nestesäiliön meniskin alle, seurauksena voi olla ilman aspiraatio ja siten kuplien muodostuminen.
Kärjen upottaminen liian syvälle voi kuitenkin imeä enemmän nestettä kohonneen paineen vuoksi tai kärjen ulkopinnalle voi muodostua pisaroita, joten on tärkeää upottaapipetin kärkioikeaan syvyyteen.
Suositeltu syvyys vaihtelee pipetin koon, tyypin ja merkin mukaan. Vaikka valmistajan suosituksia tulee noudattaa, tässä on yleinen opas, jonka tarjoaa National Physical Laboratory.
Opas kärjen upotuksen syvyyteen
Pipetin tilavuus (µl) ja upotussyvyys (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1 000: 2 – 4
- 1 000 – 5 000: 2 – 5
EsimärkäPipetin kärjet
Pipetoitaessa yli 10 µl tilavuuksiapipetin kärjetyleensä esikostutetaan täyttämällä ne useita kertoja annosteltavalla nesteellä ja heittämällä se ulos jätteen tarkkuuden parantamiseksi.
Jos niitä ei esikostuta, seurauksena voi olla ilmakuplia, erityisesti käytettäessä viskooseja tai hydrofobisia nesteitä. Ilmakuplien välttämiseksi varmista, että kastelet kärjet etukäteen, kun pipetoi tilavuutta yli 10 µl.
Käytä käänteisiä pipetointitekniikoita tarvittaessa
Viskoosit aineet: Yleinen ongelma viskoosien aineiden, kuten proteiini- tai nukleiinihappoliuosten, glyserolin ja Tween 20/40/60/80:n pipetoinnissa, on usein muodostuva kuplia käytettäessä eteenpäin suuntautuvaa pipetointitekniikkaa.
Hidas pipetointi käänteispipetointitekniikalla vähentää kuplien muodostumisen riskiä siirrettäessä viskoosia liuosta.
ELISA-tekniikka
Käänteistä pipetointia suositellaan myös, kun pipetoidaan pieniä määriä96-kuoppaiset mikrotestilevytELISA-tekniikoita varten. Kun ilmakuplia vedetään pipettiin tai annostellaan kuoppiin reagensseja lisättäessä, se voi vaikuttaa optisen tiheyden arvoihin ja tuloksiin. Käänteistä pipetointia suositellaan tämän ongelman minimoimiseksi tai poistamiseksi.
Käytä ergonomisia pipettejä
Vanhan tyyliset pipetit, joita ei ole suunniteltu ergonomiaa ajatellen, vaativat enemmän fyysistä rasitusta, väsyt ja pipetointitekniikka heikkenee ja huononee. Yllä mainitut virheet, kuten männän nopea vapautus, voivat esiintyä useammin.
Investoimalla ergonomisempaan ratkaisuun pystyt ylläpitämään erinomaisen tekniikan ja estämään huonosta tekniikasta johtuvien ilmakuplien muodostumisen.
Varaa aikaa henkilökunnan kouluttamiseen
Henkilökunnan säännöllinen koulutus ja arviointi pipetointitekniikoissa voi varmistaa, että käyttäjän virheitä ja ilmakuplien muodostumista vähennetään.
Harkitse lisää automatisoituja ratkaisuja
Kuten edellä todettiin, useimmat ilmakuplat ovat käyttäjän aiheuttamia. Voi olla mahdollista vähentää käyttäjän virheitä ja mukavuutta käyttämällä elektronisia pipettejä tai joustavaa nesteenkäsittelyalustaa, kuten esimAgilent Bravo -nesteenkäsittelyrobotti.
Käytä hyvää laatuaPipetin kärjet
Mikropipetit ostetaan yleensä huolella, mutta usein kertakäyttöisen pipetin kärjen laatuun ei kiinnitetä huomiota. Koska kärjellä on vaikutusta pipetointituloksiin, standardi ISO 8655 vaatii ylimääräisen kalibroinnin, jos käytetään eri valmistajien pipettejä ja kärkiä.
Tämä voi johtua siitä, että monet halvat kärjet voivat näyttää aluksi hyviltä, mutta kun tutkit niitä huolellisesti, niissä voi olla välähdyksiä, ulkonemia, naarmuja ja ilmakuplia tai ne voivat olla taipuneita tai sisältää epäpuhtauksia.
Hyvälaatuisten korkealaatuisesta polypropeenista valmistettujen kärkien ostaminen voi vähentää ilmakuplien esiintymistä.
Lopuksi
Ilmakuplien joutuminen pipetin kärkeen vaikuttaa laboratorion tehokkuuteen sekä tulosten epätarkkuuteen ja epätarkkuuteen. Olemme panneet merkille useita asioita, joita voit tehdä estääksesi ilmakuplien pääsyn sisällepipetin kärki.
Jos kuitenkin huono laatupipetin kärjetaiheuttavat ilmakuplien joutumisen pipetin kärkeen, olet iloinen kuullessani, että meidän universaali sopiipipetin kärjetNe on valmistettu korkeimpien standardien mukaisesti ja ne on valmistettu korkealaatuisesta puhtaasta polypropeenista.
Biolääketieteen yritys Suzhou Acetuottaa korkealaatuisia 10,20,50,100,200,300,1000 ja 1250 µL tilavuuksia universaaleja pipetinkärkiä, 96 kärkeä/teline. Poikkeuksellinen kestävyys – kaikki ACE-kärkitelineet kestävät monikanavaisten pipettien käytön vaatimukset. Steriili, suodatin, RNaasi-/DNaasi-vapaa ja ei-pyrogeeninen.
Tervetuloa tiedustelemaan meiltä lisätietoja.
Postitusaika: 29.12.2022