Nola pipeta bolumen txikiak eskuko eskuzko pipetekin

Erreaktiboak eta kostuak murrizten ari diren ardatzagoa da, bolumen txikiagoak eskari handiak dira, adibidez, PCR maismix edo entzima erreakzioak prestatzeko. Baina bolumen txikiak 0,2 - 5 μl-tik pipaiak erronka berriak ezartzen ditu pipetatzeko zehaztasuna eta zehaztasuna lortzeko. Puntu hauek ezinbestekoak dira:

1. Pipeta eta punta-tamaina: aukeratu beti pipeta ahalik eta bolumen txikienarekin eta ahalik eta txikiena airearen kuxina ahalik eta txikiena izan dadin. Pipetatzen denean 1 μl adibidez, aukeratu 0,25 - 2,5 μL pipeta eta bat datozen punta 1 - 10 μL pipeta baino.
2. Kalibrazioa eta mantenimendua: ezinbestekoa da zure pipetak behar bezala kalibratu eta mantentzea. Egokitzapen txikiek eta piezetan hautsitako piezek errore sistematiko eta ausazko balioen igoera masiboa ekarri dute. Urtean behin egin behar da ISO 8655-en araberako kalibrazioa.
3. Desplazamendu positiboak Pipettes: egiaztatu zure laborategian bolumen baxuko tartea duen desplazamendu pipeta positiboa baduzu. Oro har, pipeta mota hau erabiltzeak pipetazio hobeak ekarriko ditu zehaztasun eta zehaztasunari dagokionez, aire-kuxin klasikoko pipetekin baino.
4. Saiatu bolumen handiagoak erabiltzen: zure lagina azken erreakzioan kantitate berdina duten bolumen handiagoak diluitzea pentsa dezakezu. Honek lagin-bolumen oso txikiak dituzten hoditeria akatsak murriztu ditzake.

Tresna onaz gain, ikertzaileak oso kanalizazio teknika ona izan behar du. Arreta berezia jarri urrats hauei:

1. Aholkuaren eranskina: Ez ezazu pipeta putzuan puntara arte, punta finaren amaiera kaltetu dezake, likido-habeak birzuzenketa edo kaltetzea kaltetu dezake. Argi-presioa aplikatu aholku bat eransten denean eta erabili pipeta udaberrian kargatutako punta kono batekin.
2. Pipeta eusten: ez eduki eskuko pipeta eskuan, zentrifuga, zikloa eta abar zain dauden bitartean, pipetaren barrualdea berotu egingo da eta aireko kuxina eramango du pipetatzerakoan ezarritako bolumenaren desbideratzeak zabaltzeko.
3. Aurrez bustitzea: puntaren eta pipeten barruko airearen hezetasunak laginaren punta prestatzen du eta lurruntzea ekiditen du transferentzia bolumena nahi denean.
4. Aspirazio bertikala: oso garrantzitsua da bolumen txikiak manipulatzean pipeta angeluan mantentzen denean gertatzen den efektu kapilarra ekiditeko.
5. Murgiltze sakonera: murgildu punta ahalik eta gutxien saihesteko likidoa punta ekiditeko, efektu kapilarroaren ondorioz. Araua Gehienez 2 mm gomendatzen ditugu bolumen txikiak pipetatzerakoan.
6. 45 ° angeluan botatzea: likidoaren fluxu optimoa bermatzen da pipeta 45 ° angeluan egiten denean.
7. Harremanetarako ontzi horman edo likidoaren gainazalera: bolumen txikiak behar bezala botatzen dira puntak ontziaren hormaren kontra egiten denean edo likidoan murgilduta. Aholkutik azken jaitsiera zehaztasunez bota daiteke.
8. Kolpea: kolpe bat derrigorrezkoa da bolumen baxuak bota ondoren, puntan dagoen likidoaren azken tanta bat botatzeko. Kolpea ontziaren hormaren aurka ere egin behar da. Kontuz ibili aireko burbuilak laginean ez ekartzea likidoaren gainazalean kolpe bat egitean.