Zer dira kriobialak?
Biltegiratze kriogenikoakLaginak tenperatura baxuetan gordetzeko eta kontserbatzeko diseinatutako ontzi txiki, estali eta zilindrikoak dira. Tradizionalki ontzi hauek beiraz eginak izan badira ere, gaur egun polipropilenoz egin ohi dira erosotasun eta kostu arrazoiengatik. Kriobialak arreta handiz diseinatu dira -196 ℃ bezain baxuak diren tenperaturak jasateko eta zelula mota askori egokitzeko. Hauek diagnostikoko zelula ametatik, mikroorganismoetatik, zelula primarioetatik hasi eta ezarritako zelula-lerroetaraino aldatzen dira. Hortik haratago, zelula anitzeko organismo txikiak ere egon daitezke bertan gordetzen direnakbiltegiratze kriogenikoak, baita azido nukleikoak eta proteinak biltegiratze kriogenikoko tenperatura-mailetan biltegiratu behar direnak ere.
Biltegiratze kriogenikoak hainbat formatan daude, eta zure behar guztiak betetzen dituen mota zuzena aurkitzeak laginaren osotasuna mantentzen duzula bermatuko du gehiegi ordaindu gabe. Irakurri gure artikulua zure laborategiko aplikaziorako kriobial egokia hautatzerakoan erosteko gogoetei buruz gehiago jakiteko.
Kontuan hartu beharreko ontzi kriogenikoaren propietateak
Kanpoko eta Barneko hariak
Jendeak sarritan egiten du aukera hau lehentasun pertsonaletan oinarrituta, baina, egia esan, bi hari moten artean kontuan hartu beharreko funtsezko desberdintasun funtzionalak daude.
Laborategi askok sarritan barneko hariztutako bialak aukeratzen dituzte, hodiak biltegiratzeko lekua minimizatzeko, izozkailu-kutxetan hobeto egokitzeko. Hala eta guztiz ere, kontuan izan dezakezu kanpotik haritako aukera zuretzako aukera hobea dela. Kutsadura-arrisku txikiagoa dutela uste da, diseinua dela eta, lagina ez den beste ezerk ontzian sartzea are zailagoa egiten duelako.
Aplikazio genomikoetarako, oro har, kanpoko hariztatutako bialak hobesten dira, baina aukera biak egokiak dira biobankuetarako eta errendimendu handiko beste aplikazioetarako.
Harigintzan kontuan hartu beharreko azken gauza bat: zure laborategiak automatizazioa erabiltzen badu, baliteke tresna-hazketekin zer hari erabil daitekeen kontuan hartu behar izatea.
Biltegiratze bolumena
Ontzi kriogenikoak hainbat tamainatan daude eskuragarri behar gehienak estaltzeko, baina gehienetan 1 mL eta 5 mL bitarteko edukiera dute.
Gakoa da ziurtatzea zure kriobiala gehiegi bete ez dela eta gela gehigarria dagoela ziurtatzea, lagina izoztuta dagoen bitartean puzten bada. Praktikan, horrek esan nahi du laborategiek 1 ml-ko bidoiak aukeratzen dituztela krioprotektantan esekita dauden 0,5 ml-ko zelulen laginak gordetzen dituztenean, eta 2,0 ml-ko vialak 1,0 ml-ko laginetarako. Zure ontziak gehiegi ez betetzeko beste gomendio bat marka graduatuak dituzten kriobiolak erabiltzea da, hau da, pitzadurak edo isurketak eragin ditzakeen hanturak saihestuko dituzula ziurtatzeko.
Torlojuzko Tapa vs Flip Top
Aukeratzen duzun goiko mota nitrogeno fase likidoa erabiliko duzun ala ezaren araberakoa da batez ere. Bada, torlojudun kriobialak beharko dituzu. Horrek bermatzen du ezin direla ustekabean ireki manipulazio txarra edo tenperatura aldaketen ondorioz. Gainera, torlojuzko tapoiek kaxa kriogenikoetatik errazago berreskuratzeko eta biltegiratze eraginkorragoa ahalbidetzen dute.
Hala ere, etapako nitrogeno likidoa erabiltzen ari ez bazara eta irekitzeko errazagoa den goiko erosoago bat behar baduzu, orduan irauli bat da aukera hobea. Horrek denbora asko aurreztuko dizu, irekitzea askoz errazagoa baita, eta hori bereziki erabilgarria da errendimendu handiagoko eragiketetan eta lote-prozesuak erabiltzen dituztenetan.
Zigiluaren Segurtasuna
Zigilu segurua ziurtatzeko modurik onena zure tapoi kriobiala eta botila biak material berdinarekin eginda daudela ziurtatzea da. Honek batera uzkurtu eta zabaltzen direla ziurtatuko du. Material desberdinak erabiliz egiten badira, orduan uzkurtu eta hedatuko dira abiadura ezberdinetan tenperatura aldatzen den heinean, hutsuneak eta balizko ihesak eta ondorioz kutsadura eraginez.
Zenbait konpainiak garbigailu eta brida bikoitzak eskaintzen dituzte laginaren segurtasun maila gorenerako kanpoko hariztatutako kriobioietan. O-Ring kriobialak barneko hariztatutako kriobialetarako fidagarrienak dira.
Beira vs Plastikoa
Segurtasunerako eta erosotasunerako, gaur egun laborategi askok plastikoa erabiltzen dute, normalean polipropilenoa, beroz zigilatzeko kristalezko anpulen ordez. Gaur egun, beirazko anpulak aukera zaharkitutzat hartzen dira, zigilatzeko prozesuan zehar zulo ikusezinak diren ihesak sor daitezkeelako, nitrogeno likidoan biltegiratu ondoren desizoztu ondoren lehertu egin daitezkeenak. Etiketatze-teknika modernoetarako ere ez dira hain egokiak, eta hori funtsezkoa da laginaren trazabilitatea bermatzeko.
Norberak zutik eta behealde biribilduak
Ontzi kriogenikoak eskuragarri daude bai auto-zutik gisa izar formako hondoekin, bai hondo biribildu gisa. Zure ontziak gainazal batean jarri behar badituzu, ziurtatu auto-zutik aukeratu duzula
Trazabilitatea eta Laginaren Jarraipena
Biltegiratze kriogenikoaren arlo hau askotan ahaztu egiten da, baina laginaren jarraipena eta trazabilitatea kontuan hartu beharreko alderdi erabakigarria da. Lagin kriogenikoak urte askotan gorde daitezke, eta denbora tarte horretan langileak alda daitezke eta behar bezala mantendutako erregistrorik gabe identifikaezinak izan daitezke.
Ziurtatu laginaren identifikazioa ahalik eta errazena egiten duten bidoiak aukeratzen dituzula. Kontu egin behar dituzun gauzek honako hauek dira:
Idazketa-eremu handiak xehetasun nahikoak erregistratzeko, erregistroak aurkitu ahal izateko ontzi bat leku oker batean kokatzen bada - normalean zelula-identitatea, data izoztua eta arduradunaren inizialak egokiak dira.
Barra-kodeak laginak kudeatzeko eta jarraitzeko sistemak laguntzeko
Koloretako txapelak
Etorkizunerako ohar bat - hotzarekiko erresistenteak diren txipak garatzen ari dira, kriobial indibidualetan sartzen direnean, historia termiko zehatza eta loteen informazio zehatza, proben emaitzak eta kalitatezko beste dokumentazio garrantzitsua gorde ditzaketenak.
Eskuragarri dauden ontzien zehaztapen desberdinak kontuan hartzeaz gain, kriobialak nitrogeno likidoan gordetzeko prozesu teknikoari buruz ere pentsatu behar da.
Biltegiratze Tenperatura
Laginak biltegiratze kriogenikorako hainbat biltegiratze metodo daude, bakoitzak tenperatura zehatz batean funtzionatzen du. Aukerak eta funtzionatzen duten tenperatura honako hauek dira:
LN2 fase likidoa: mantendu -196 ℃-ko tenperatura
Lurrun fasea LN2: modeloaren arabera -135°C eta -190°C arteko tenperatura-tarte zehatzetan jarduteko gai dira.
Nitrogeno-lurruneko izozkailuak: -20°C eta -150°C artean
Biltegiratzen ari den zelula motak eta ikertzaile batek nahiago duen biltegiratze-metodoak zehaztuko du zure laborategiak erabilgarri dauden hiru aukeretatik zein den.
Hala ere, erabiltzen diren tenperatura oso baxuak direla eta, hodi edo diseinu guztiak ez dira egokiak edo seguruak izango. Materialak oso hauskorrak izan daitezke oso tenperatura baxuetan; zuk aukeratutako tenperaturan erabiltzeko egokia ez den ontzi bat erabiltzeak ontzia hautsi edo pitzatzea eragin dezake biltegiratu edo desizoztean.
Begiratu arretaz fabrikatzaileen gomendioak erabilera egokiari buruz, ontzi kriogeniko batzuk -175 °C-ko tenperatura baxuetarako egokiak baitira, batzuk -150 °C beste batzuk 80 °C besterik ez.
Azpimarratzekoa da, halaber, fabrikatzaile askok adierazten dutela euren ontzi kriogenikoak ez direla egokiak fase likidoan murgiltzeko. Onda hauek giro-tenperaturara itzultzean fase likidoan gordetzen badira, ontzi horiek edo haien tapoi-zigiluak hautsi egin daitezke, ihes txikiek eragindako presioa azkar pilatzearen ondorioz.
Nitrogeno likidoaren fase likidoan zelulak biltegiratu behar badira, kontuan hartu zelulak cryoflex hodietan bero-zigilatutako ontzi kriogeniko egokietan gordetzea edo hermetikoki itxita dauden beirazko anpuletan gordetzea.
Argitalpenaren ordua: 2022-12-25