Mis on krüoviaalid?
Krüogeensed säilitusviaalidon väikesed, korgiga ja silindrilised mahutid, mis on mõeldud proovide hoidmiseks ja säilitamiseks ülimadalatel temperatuuridel. Kuigi traditsiooniliselt on need viaalid valmistatud klaasist, valmistatakse need nüüd mugavuse ja kulude huvides palju sagedamini polüpropüleenist. Krüoviaalid on hoolikalt kavandatud taluma kuni -196 ℃ temperatuuri ja mahutama mitmesuguseid rakutüüpe. Need varieeruvad diagnoositud tüvirakkudest, mikroorganismidest, primaarsetest rakkudest kuni väljakujunenud rakuliinideni. Peale selle võivad selle sees olla ka väikesed mitmerakulised organismidkrüogeensed säilitusviaalid, samuti nukleiinhappeid ja valke, mida tuleb säilitada krüogeense säilitustemperatuuri tasemel.
Krüogeenseid säilitusviaale on mitmel erineval kujul ja kõikidele teie vajadustele vastava õige tüübi leidmine tagab proovi terviklikkuse ilma üle maksmata. Lugege läbi meie artikkel, et saada lisateavet peamiste ostukaalutluste kohta laborirakenduse jaoks sobiva krüoviaali valimisel.
Krüogeense viaali omadused, mida tuleb arvestada
Välised vs sisemised lõimed
Inimesed teevad selle valiku sageli isiklike eelistuste põhjal, kuid tegelikult on nende kahe niiditüübi vahel olulised funktsionaalsed erinevused.
Paljud laborid valivad sageli sisekeermega viaalid, et minimeerida torude hoiuruumi, et võimaldada paremini sobituda sügavkülma kastidesse. Sellest hoolimata võite arvata, et väliskeermega variant on teie jaoks parem valik. Neid peetakse väiksema saastumise riskiga konstruktsiooni tõttu, mis muudab millegi muu kui proovi viaali sisenemise veelgi raskemaks.
Genoomiliste rakenduste jaoks eelistatakse üldiselt väliskeermega viaale, kuid kumbagi varianti peetakse sobivaks biopanganduse ja muude suure läbilaskevõimega rakenduste jaoks.
Viimane asi, mida keermestamise puhul kaaluda – kui teie laboris kasutatakse automatiseerimist, peate võib-olla kaaluma, millist niiti saab instrumendi haaratsidega kasutada.
Salvestusmaht
Enamiku vajaduste rahuldamiseks on saadaval erineva suurusega krüogeensed viaalid, kuid enamasti jäävad need vahemikku 1–5 ml.
Peamine on veenduda, et teie krüoviaal ei oleks ületäitunud ja et seal oleks rohkem ruumi, juhuks, kui proov külmumisel paisub. Praktikas tähendab see, et laborid valivad 0,5 ml rakkude proovide hoidmisel krüoprotektandis suspendeeritud 1 ml viaalid ja 1,0 ml proovi jaoks 2,0 ml viaalid. Veel üks näpunäide viaalide mitte ületäitmiseks on panna kasutama gradueeritud märgistusega krüoviaale, mis hoiavad ära turse, mis võib põhjustada pragunemist või lekkimist.
Keeratav kork vs Flip Top
Valitud katte tüüp sõltub peamiselt sellest, kas kasutate vedelfaasi lämmastikku või mitte. Kui olete, siis vajate keeratava kaanega krüoviaale. See tagab, et need ei saa vale käsitsemise või temperatuurimuutuste tõttu kogemata avaneda. Lisaks võimaldavad keeratavad korgid krüogeensetest kastidest hõlpsamini välja võtta ja tõhusamalt ladustada.
Kui te aga ei kasuta vedelat lämmastikku ja vajate mugavamat katet, mida on lihtsam avada, on klappkate parem valik. See säästab palju aega, kuna seda on palju lihtsam avada, mistõttu on see eriti kasulik suurema läbilaskevõimega operatsioonide ja pakettprotsesse kasutavate operatsioonide puhul.
Pitseri turvalisus
Parim viis turvalise tihendi tagamiseks on veenduda, et teie krüoviaali kork ja pudel on mõlemad valmistatud samast materjalist. See tagab nende kokkutõmbumise ja laienemise. Kui need on valmistatud erinevatest materjalidest, kahanevad ja paisuvad need temperatuuri muutudes erineva kiirusega, tekitades lünki ja võimalikku leket ja sellest tulenevat saastumist.
Mõned ettevõtted pakuvad väliskeermega krüoviaalide proovide kõrgeima turvalisuse tagamiseks topeltseibe ja äärikut. O-rõngaga krüoviaale peetakse sisekeermega krüoviaalide jaoks kõige usaldusväärsemaks.
Klaas vs plast
Ohutuse ja mugavuse huvides kasutavad paljud laborid kuumsuletavate klaasampullite asemel plastikut, tavaliselt polüpropüleeni. Klaasampulle peetakse tänapäeval vananenud valikuks, kuna sulgemisprotsessi käigus võivad tekkida nähtamatud nööpaugulekked, mis pärast vedelas lämmastikus hoidmist ülessulatamisel võivad põhjustada nende plahvatuse. Samuti ei sobi need nii kaasaegsete märgistamistehnikate jaoks, mis on proovide jälgitavuse tagamise võti.
Iseseisev vs ümara põhjaga
Krüogeensed viaalid on saadaval nii eraldiseisvatena, tähekujulise põhjaga kui ka ümarate põhjadega. Kui peate asetama viaalid pinnale, valige kindlasti eraldiseisev
Jälgitavus ja proovide jälgimine
Seda krüogeense ladustamise valdkonda jäetakse sageli tähelepanuta, kuid proovide jälgimine ja jälgitavus on otsustava tähtsusega aspekt. Krüogeenseid proove saab säilitada mitu aastat, selle aja jooksul võivad töötajad vahetuda ja ilma nõuetekohaselt hooldatud dokumentideta võivad need muutuda tuvastamatuks.
Valige kindlasti viaalid, mis muudavad proovi tuvastamise võimalikult lihtsaks. Asjad, millele peaksite tähelepanu pöörama, hõlmavad järgmist:
Suured kirjutusalad piisavate üksikasjade salvestamiseks, nii et kirjeid oleks võimalik leida, kui viaal asub vales kohas – tavaliselt piisab raku identiteedist, külmutatud kuupäevast ja vastutava isiku initsiaalidest.
Vöötkoodid näidiste haldamise ja jälgimissüsteemide abistamiseks
Värvilised mütsid
Märkus tulevikuks – töötatakse välja ülikülmakindlaid kiipe, mis üksikutesse krüoviaalidesse paigaldatuna võivad potentsiaalselt salvestada üksikasjalikku termilist ajalugu ning üksikasjalikku teavet partiide kohta, katsetulemusi ja muud asjakohast kvaliteedidokumentatsiooni.
Lisaks saadaolevate viaalide erinevate spetsifikatsioonide arvestamisele tuleb mõelda ka krüoviaalide vedelas lämmastikus säilitamise tehnilisele protsessile.
Säilitustemperatuur
Proovide krüogeenseks säilitamiseks on mitu säilitusmeetodit, millest igaüks töötab kindlal temperatuuril. Valikud ja nende töötemperatuur on järgmised:
Vedelfaas LN2: hoidke temperatuuri -196 ℃
Aurufaas LN2: olenevalt mudelist on võimelised töötama teatud temperatuurivahemikus -135°C kuni -190°C.
Lämmastikuauruga sügavkülmikud: -20°C kuni -150°C
Säilitatavate rakkude tüüp ja teadlase eelistatud salvestusmeetod määravad kindlaks, millist kolmest saadaolevast valikust teie labor kasutab.
Kuid kasutatavate äärmiselt madalate temperatuuride tõttu ei ole kõik torud või konstruktsioonid sobivad ega ohutud. Materjalid võivad muutuda äärmiselt hapraks väga madalatel temperatuuridel. Kui kasutate viaali, mis ei sobi teie valitud temperatuuril kasutamiseks, võib anum ladustamise või sulatamise ajal puruneda või praguneda.
Kontrollige hoolikalt tootjate soovitusi õige kasutamise kohta, kuna mõned krüogeensed viaalid sobivad kasutamiseks nii madalatel temperatuuridel kui -175 °C, mõned -150 °C, teised vaid 80 °C.
Samuti väärib märkimist, et paljud tootjad väidavad, et nende krüogeensed viaalid ei sobi vedelas faasis sukeldamiseks. Kui neid viaale hoitakse toatemperatuurile tagasi minnes vedelas faasis, võivad need viaalid või nende korgitihendid puruneda väikeste lekete põhjustatud kiire rõhu suurenemise tõttu.
Kui rakke tuleb säilitada vedela lämmastiku vedelas faasis, kaaluge rakkude säilitamist sobivates krüogeensetes viaalides, mis on kuumsuletud krüofleksitorudesse, või rakkude säilitamist klaasampullides, mis on hermeetiliselt suletud.
Postitusaeg: 25.11.2022