Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on molekulaarbioloogias laialdaselt kasutatav tehnika DNA fragmentide amplifitseerimiseks. PCR hõlmab mitmeid etappe, sealhulgas denatureerimist, anniilimist ja pikendamist. Selle tehnika edukus sõltub suuresti kasutatavate PCR-plaatide ja katseklaaside kvaliteedist. Rakenduse jaoks sobivate PCR-plaatide ja -torude valimisel tuleb arvestada paljude teguritega. Siin on mõned peamised tegurid, mida tuleks arvesse võtta.
1. MahtPCR plaadidja torusid on erineva suuruse ja võimsusega. Suuruse ja mahu valik sõltub suuresti DNA kogusest, mida on vaja ühes reaktsioonis amplifitseerida. Näiteks kui teil on vaja amplifitseerida väikest kogust DNA-d, võite valida väikese toru. Kui amplifitseerida on vaja suurt kogust DNA-d, saab valida suurema mahutavusega plaadi.
2. Materjal PCR-plaadid ja torud võivad olla valmistatud erinevatest materjalidest, nagu polüpropüleen, polükarbonaat või akrüül. Polüpropüleen on oma keemilise ja kuumakindluse tõttu kõige sagedamini kasutatav materjal. See on ka teiste materjalidega võrreldes odavam. Polükarbonaadid ja akrüülid on kallimad, kuid parema optilise selgusega ja sobivad ideaalselt reaalajas PCR-i jaoks.
3. Soojusjuhtivuse PCR hõlmab mitut soojustsüklit, mis nõuavad reaktsioonisegu kiiret kuumutamist ja jahutamist. Seetõttu peab PCR-plaatidel ja -torudel olema hea soojusjuhtivus, et tagada reaktsioonisegu ühtlane kuumutamine ja jahutamine. Õhukeste seinte ja lamedate pindadega plaadid sobivad ideaalselt soojusülekande maksimeerimiseks.
4. Ühilduvus PCR-plaadid ja -tuubid peavad ühilduma teie kasutatava termotsükleriga. Plaadid ja torud peavad taluma kõrgeid temperatuure, mis on vajalikud DNA fragmentide amplifitseerimiseks. Soovitatavate plaatide ja torude osas konsulteerige alati termotsükleri tootjaga.
5. Tihend Tihe tihendus on reaktsioonisegu saastumise vältimiseks ülioluline. PCR-plaate ja torusid saab sulgeda erinevate meetoditega, näiteks kuumtihendite, kleepuvate kilede või kaantega. Kuumtihendamine on kõige turvalisem meetod ja tagab tugeva tõkke saastumise vastu.
6. Steriliseerimine PCR-plaadid ja -tuubid peavad olema vabad saasteainetest, mis võivad reaktsiooni häirida. Seetõttu tuleb need enne kasutamist steriliseerida. Oluline on valida plaadid ja torud, mida on lihtne steriliseerida ning mis on vastupidavad keemilistele ja kuumsteriliseerimismeetoditele.
Kokkuvõtteks võib öelda, et õige PCR-plaadi ja katsutite valimine on eduka DNA amplifikatsiooni jaoks ülioluline. Valik sõltub suuresti rakenduse tüübist, amplifitseeritud DNA kogusest ja ühilduvusest termotsükleritega.
Suzhou Ace Biomedical Technology Co., Ltd. pakub valikut kvaliteetseid PCR-plaate ja torusid erineva suuruse, võimsuse ja materjaliga, mis vastavad iga teadlase vajadustele.
Postitusaeg: mai-17-2023