La micropipette es probablemente la herramienta más utilizada en el laboratorio. Los científicos utilizan en una amplia gama de sectores, incluidos los laboratorios de academia, hospital y forense, así como desarrollo de drogas y vacunas para transferir cantidades precisas de líquido muy pequeñas
Si bien puede ser molesto y frustrante detectar burbujas de aire en la punta de pipeta desechable si no son vistos o ignorados, puede tener un gran impacto en la confiabilidad y la reproducibilidad de los resultados.
La buena noticia es que hay algunas medidas simples que puede tomar para prevenir burbujas de aire y mejorar la eficiencia del laboratorio, la satisfacción del operador, así como la precisión y precisión de los resultados.
A continuación, exploramos la consecuencia de obtener una burbuja de aire en la punta de su pipeta y lo que debe hacer a continuación.
La consecuencia de las burbujas en elPunta de pipeta
Incluso si utiliza las pipetas más precisas, en la parte superior de la gama, bien mantenida, con servicio y calibrado, la confiabilidad de sus resultados puede verse afectada por los errores de laboratorio. Cuando las burbujas entran en elconsejoPuede tener varios resultados.
● Cuando el usuario ve la burbuja de aire, debe pasar tiempo dispensando el líquido aspirado adecuadamente, expulse la punta y comience el proceso nuevamente.
● Las burbujas de aire no detectadas pueden dar lugar a una transferencia de volumen de baja volumen, alterando así la concentración de mezclas de reacción que conducen a experimentos fallidos y resultados cuestionables o poco confiables.
Estos resultados pueden tener varias consecuencias (1).
● Disminución de la eficiencia del laboratorio: las pruebas y los ensayos deberán repetirse, incurrir en los costos de mano de obra y materiales, lo que puede ser bastante sustancial.
● Resultados de las pruebas cuestionables o incorrectos: si se liberan resultados incorrectos, puede haber consecuencias más graves, incluido el diagnóstico erróneo y los malos resultados del paciente.
● Retracción de manuscritos de revistas: si los pares no pueden replicar sus resultados debido a burbujas de aire que causan resultados inexactos se pueden retirar los documentos.
Las mejores prácticas para prevenir burbujas de aire
En la mayoría de los casos, las burbujas de aire en las puntas de las pipetas son causadas por el error del operador. La mala técnica debido al entrenamiento o la fatiga insuficientes suele ser el problema subyacente.
La pipeteo es una operación calificada que requiere un 110% de atención, capacitación y práctica adecuadas para lograr resultados consistentes y precisos.
Si bien hay varias cosas que puede hacer para reducir los errores generales de pipeteo, a continuación hemos destacado algunas mejores prácticas que se pueden emplear para evitar burbujas de aire enconsejos de pipeta.
Mejorar la técnica del usuario
Pipeta lentamente
Si el émbolo se libera demasiado rápido cuando se aspira, las burbujas de aire se pueden introducir en la punta. Esto puede ser especialmente problemático al transferir líquidos viscosos. Un efecto similar puede ocurrir si el émbolo se libera demasiado rápido después de dispensar.
Para evitar burbujas de aire al aspirarse, tenga cuidado de operar el pistón de pipetas manuales de manera suave y regular, aplicando una fuerza consistente.
Use la profundidad de inmersión correcta
No sumergir la punta de la pipeta lo suficientemente profunda debajo del menisco del depósito líquido puede provocar la aspiración del aire y, por lo tanto, la formación de burbujas.
Sin embargo, sumergir la punta demasiado profundo puede aspirar más líquido debido al aumento de la presión o las gotas pueden ocurrir en el exterior de la punta, por lo que es importante sumergir elpunta de pipetaa la profundidad correcta.
La profundidad recomendada varía entre el tamaño de la pipeta, el tipo y la marca. Si bien las recomendaciones del fabricante deben seguirse aquí hay una guía general proporcionada por el Laboratorio Nacional Físico.
Guía para la profundidad de la inmersión de la punta
Volumen de pipeta (µl) y profundidad de inmersión (mm)
- 1 - 100: 2 - 3
- 100 - 1,000: 2 - 4
- 1,000 - 5,000: 2 - 5
PreviamenteConsejos de pipeta
Al pipetear volúmenes de más de 10 µlconsejos de pipetaPor lo general, son prefirentes llenándolos varias veces con el líquido dispensado y expulsando a los desperdicios para mejorar la precisión.
La falla previa a las pulgadas puede provocar burbujas de aire, especialmente cuando se usa líquidos viscosos o hidrofóbicos. Para evitar las burbujas de aire, asegúrese de hacer las puntas previas al volumen de pipeteo superior a 10 µl.
Use técnicas de pipeteo inversa si es apropiado
Sustancias viscosas: un problema común al pipetear sustancias viscosas como soluciones de proteínas o ácidos nucleicos, glicerol y Tween 20/40/60/80 es la formación frecuente de burbujas cuando se usa la técnica de pipeteo hacia adelante.
La pipa lentamente, el uso de la técnica de pipeteo inversa reduce el riesgo de formación de burbujas al transferir soluciones viscosas.
Técnica ELISA
También se recomienda la pipeteo inversa al pipetear pequeños volúmenes en96 placas de prueba de micro pozopara técnicas ELISA. Cuando las burbujas de aire se dibujan en la pipeta o se dispensan en pozos al agregar reactivos, puede influir en los valores de densidad óptica y los resultados. Se recomienda la pipeteo inversa para minimizar o eliminar este problema.
Usar pipetas ergonómicas
Las pipetas de estilo antiguo que no han sido diseñadas con la ergonomía en mente requieren más esfuerzo físico, se cansa y su técnica de pipetización se vuelve descuidada y pobre. Los errores mencionados anteriormente, como la liberación rápida del émbolo, pueden ocurrir con mayor frecuencia.
Al invertir en una solución más ergonómica, podrá mantener una excelente técnica y prevenir la formación de burbujas de aire debido a una técnica deficiente.
Tómese el tiempo para capacitar al personal
La capacitación y la evaluación regularmente del personal en las técnicas de pipeteo puede garantizar que se reduzcan el error del operador y la formación de burbujas de aire.
Considere más soluciones automatizadas
Como se señaló anteriormente, la mayoría de las burbujas de aire son causadas por el operador. Es posible reducir el error y la comodidad del operador mediante el uso de pipetas electrónicas o una plataforma de manejo de líquido flexible como elAgilent Bravo Liquid Manejo Robot.
Use la buena calidadConsejos de pipeta
Las micropipetas generalmente se compran con cuidado, pero a menudo se piensa poco a la calidad de la punta de pipeta desechable. Debido a la influencia que tiene una punta en los resultados de pipeteo, el StandardISO 8655 requiere una calibración adicional si se utilizan pipetas y puntas de diferentes fabricantes.
Esto podría deberse a que muchos consejos baratos pueden verse bien inicialmente, pero cuando los estudia con cuidado, pueden tener destellos, protuberancias, rasguños y burbujas de aire, o estar doblados o contener impurezas.
Comprar consejos de buena calidad hechos de polipropileno de alto grado puede reducir la aparición de burbujas de aire.
Para concluir
Obtener burbujas de aire en la punta de su pipeta tiene un impacto en la eficiencia del laboratorio, así como la inexactitud y la imprecisión de resultados. Hemos notado varias cosas que puede hacer para evitar que las burbujas de aire entren en elpunta de pipeta.
Sin embargo, si es mala calidadconsejos de pipetaestán haciendo que las burbujas de aire se metan en la punta de su pipeta, le complacerá saber que nuestro ajuste universalconsejos de pipetaestán hechos con los más altos estándares y se realizan con polipropileno puro de grado premium.
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Tiempo de publicación: diciembre-29-2022