Las reacciones en cadena de la polimerasa (PCR) son uno de los métodos más conocidos que se utilizan en los laboratorios de ciencias biológicas.
Las placas de PCR están fabricadas con plásticos de primera calidad para un excelente procesamiento y análisis de muestras o resultados recopilados.
Tienen paredes delgadas y homogéneas para proporcionar una transferencia térmica precisa.
En preparación para aplicaciones en tiempo real, se aíslan y almacenan pequeñas secciones de ADN o ARN en placas de PCR.
Las placas de PCR son muy eficientes en el termosellado y también restringen el flujo de calor.
Sin embargo, por muy efectivas y confiables que sean las placas de PCR, los errores y las imprecisiones desaparecen fácilmente al procesar las muestras.
Por lo tanto, si está interesado en conseguir una buena y alta calidadPlacas PCR.Lo ideal es ponerse en contacto con un fabricante confiable de placas de PCR. Con esto tienes la seguridad de conseguir la mejor oferta.
A continuación se detallan algunas precauciones a seguir para evitar la contaminación de reactivos o muestras y evitar que se introduzcan imprecisiones en los resultados.
Esterilizando el entorno
Se producen positivos o negativos incorrectos debido a la presencia de impurezas, lo que hace dudar de los resultados.
Las impurezas y los contaminantes se presentan en diversas formas, como ADN no relacionado o aditivos químicos que eventualmente disminuyen la eficiencia y eficacia de la reacción.
Existen numerosas formas de reducir en gran medida la tasa de contaminación de la placa de PCR.
El uso de puntas con filtro esterilizadas es otra forma útil de evitar que las impurezas entren en las muestras a través de las pipetas.
Dedicar un equipo completamente limpio, compuesto por pipetas y gradillas, exclusivamente para el uso de PCR. Esto garantizará una transferencia insignificante de impurezas o contaminantes alrededor del laboratorio.
Utilice lejías y etanol en las pipetas, rejillas y bancos para limpiar los contaminantes.
Asigne un espacio reservado para todas sus reacciones de PCR para minimizar aún más la contaminación por partículas.
Utilice guantes limpios en cada paso y reemplácelos con frecuencia.
placas de PCR
Inspeccionar la concentración y pureza de la plantilla.
Se debe mantener la limpieza de la mesa y del equipo utilizado al analizar muestras con la PCR. Es fundamental validar el grado de pureza de las muestras antes del análisis y procesamiento.
Generalmente, los analizadores tienen en cuenta la concentración y el nivel de pureza de las muestras de ADN.
Esfuércese por que la relación de absorbancia para 260 nm/280 nm no debe ser inferior a 1,8. Mientras que para identificar impurezas se utilizan longitudes de onda posteriores entre 230 nm y 320 nm.
En un caso, se detectan sales caotrópicas y otros compuestos orgánicos a una tasa de absorbancia de 230 nm. Mientras que la turbidez en las muestras de ADN también se detecta y verifica a una tasa de absorbancia de 320 nm.
Evite sobrecargar las placas PCR con producto
Por mucho que se desee procesar varios productos simultáneamente, se produce una contaminación cruzada de las placas de PCR.
La sobrecarga de las placas de PCR con diferentes productos desperdicia y hace que sea extremadamente difícil determinar las muestras.
Mantenga registros de alícuotas de reactivos de PCR
Los ciclos continuos de congelación/descongelación y el uso frecuente de alícuotas pueden dañar los reactivos de PCR, las enzimas y los DNTP mediante la recristalización.
Esfuércese siempre por controlar la tasa de alícuota utilizada mientras prepara las muestras para analizarlas.
El LIMS preferible es más adecuado para controlar el inventario y la cantidad de reactivos y muestras congeladas o descongeladas.
Elija la mejor temperatura de recocido.
Seleccionar y utilizar la temperatura de recocido incorrecta es otro método más que contiene errores en los resultados de la PCR.
A veces, la reacción no sale según lo planeado. Se desea reducir la temperatura de recocido para facilitar una reacción exitosa.
Sin embargo, reducir la temperatura aumenta las posibilidades de que se produzcan falsos positivos y que aparezcan dímeros de cebador.
Es importante confirmar el análisis de la curva de fusión cuando se utilizan placas de PCR, ya que es un buen indicador para seleccionar la temperatura de recocido correcta.
El software de diseño de cebadores ayuda con el diseño y proporciona la temperatura de recocido adecuada que reduce directamente el error en las placas de PCR.
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Hora de publicación: 30 de octubre de 2021