Τι είναι τα Cryovials;
Κρυογονικά φιαλίδια αποθήκευσηςείναι μικρά, καλυμμένα και κυλινδρικά δοχεία σχεδιασμένα για αποθήκευση και διατήρηση δειγμάτων σε εξαιρετικά χαμηλές θερμοκρασίες. Αν και παραδοσιακά αυτά τα φιαλίδια κατασκευάζονταν από γυαλί, τώρα κατασκευάζονται πολύ πιο συχνά από πολυπροπυλένιο για λόγους ευκολίας και κόστους. Τα Cryovials έχουν σχεδιαστεί προσεκτικά για να αντέχουν σε θερμοκρασίες έως και -196℃ και να φιλοξενούν μια μεγάλη ποικιλία τύπων κυττάρων. Αυτά ποικίλλουν από διαγνωστικά βλαστοκύτταρα, μικροοργανισμούς, πρωτογενή κύτταρα έως εγκατεστημένες κυτταρικές σειρές. Πέρα από αυτό, μπορεί επίσης να υπάρχουν μικροί πολυκύτταροι οργανισμοί που αποθηκεύονται μέσακρυογονικά φιαλίδια αποθήκευσης, καθώς και νουκλεϊκό οξύ και πρωτεΐνες που πρέπει να αποθηκευτούν σε κρυογονικά επίπεδα θερμοκρασίας αποθήκευσης.
Τα κρυογονικά φιαλίδια αποθήκευσης διατίθενται σε διάφορες διαφορετικές μορφές και η εύρεση του σωστού τύπου που ικανοποιεί όλες τις ανάγκες σας θα διασφαλίσει ότι διατηρείτε την ακεραιότητα του δείγματος χωρίς να πληρώνετε υπερβολικά. Διαβάστε το άρθρο μας για να μάθετε περισσότερα σχετικά με τα βασικά ζητήματα αγοράς κατά την επιλογή του σωστού κρυοβιαλίου για την εργαστηριακή σας εφαρμογή.
Ιδιότητες του κρυογονικού φιαλιδίου που πρέπει να ληφθούν υπόψη
Εξωτερικά vs Εσωτερικά νήματα
Οι άνθρωποι συχνά κάνουν αυτήν την επιλογή με βάση τις προσωπικές προτιμήσεις, αλλά στην πραγματικότητα υπάρχουν βασικές λειτουργικές διαφορές που πρέπει να ληφθούν υπόψη μεταξύ των δύο τύπων νημάτων.
Πολλά εργαστήρια συχνά επιλέγουν φιαλίδια με εσωτερικά σπείρωμα για να ελαχιστοποιήσουν τον χώρο αποθήκευσης των σωλήνων για να επιτρέψουν την καλύτερη εφαρμογή στα κουτιά καταψύκτη. Παρόλα αυτά, μπορείτε να θεωρήσετε ότι η επιλογή με εξωτερικό σπείρωμα είναι η καλύτερη επιλογή για εσάς. Θεωρείται ότι ενέχουν μικρότερο κίνδυνο μόλυνσης, λόγω του σχεδιασμού που καθιστά ακόμη πιο δύσκολο για οτιδήποτε άλλο εκτός από το δείγμα να εισέλθει στο φιαλίδιο.
Τα φιαλίδια με εξωτερικό σπείρωμα προτιμώνται γενικά για γονιδιωματικές εφαρμογές, αλλά οποιαδήποτε επιλογή θεωρείται κατάλληλη για βιοτραπεζική και άλλες εφαρμογές υψηλής απόδοσης.
Ένα τελευταίο πράγμα που πρέπει να λάβετε υπόψη σχετικά με το σπείρωμα - εάν το εργαστήριό σας χρησιμοποιεί αυτοματισμό, ίσως χρειαστεί να εξετάσετε ποιο νήμα μπορεί να χρησιμοποιηθεί με τις λαβές οργάνων.
Όγκος αποθήκευσης
Τα κρυογονικά φιαλίδια είναι διαθέσιμα σε διάφορα μεγέθη για να καλύψουν τις περισσότερες ανάγκες, αλλά κυρίως κυμαίνονται μεταξύ 1 mL και 5 mL.
Το κλειδί είναι να βεβαιωθείτε ότι το κρυοβιάκι σας δεν είναι υπερβολικό και ότι υπάρχει επιπλέον διαθέσιμος χώρος, σε περίπτωση που το δείγμα διογκωθεί κατά την κατάψυξη. Στην πράξη, αυτό σημαίνει ότι τα εργαστήρια επιλέγουν φιαλίδια 1 mL όταν αποθηκεύουν δείγματα 0,5 mL κυττάρων σε εναιώρηση σε κρυοπροστατευτικό και φιαλίδια 2,0 mL για 1,0 mL δείγματος. Μια άλλη συμβουλή για να μην γεμίζετε υπερβολικά τα φιαλίδια σας είναι να σας αναγκάσουν να χρησιμοποιήσετε κρυοφιαλίδια με βαθμολογημένες σημάνσεις, που θα φροντίσουν να αποτρέψετε οποιοδήποτε πρήξιμο που θα μπορούσε να προκαλέσει ράγισμα ή διαρροή.
Βιδωτό καπάκι vs Flip Top
Ο τύπος κορυφής που θα επιλέξετε εξαρτάται κυρίως από το αν θα χρησιμοποιήσετε άζωτο υγρής φάσης ή όχι. Εάν είστε, τότε θα χρειαστείτε κρυοφιαλίδια με βιδωτό πώμα. Αυτό διασφαλίζει ότι δεν μπορούν να ανοίξουν κατά λάθος λόγω κακού χειρισμού ή αλλαγών θερμοκρασίας. Επιπλέον, τα βιδωτά καπάκια επιτρέπουν την ευκολότερη ανάκτηση από κρυογονικά κουτιά και την πιο αποτελεσματική αποθήκευση.
Ωστόσο, εάν δεν χρησιμοποιείτε άζωτο υγρού σταδίου και χρειάζεστε ένα πιο βολικό επάνω μέρος που ανοίγει ευκολότερα, τότε το πορτάκι είναι η καλύτερη επιλογή. Αυτό θα σας εξοικονομήσει πολύ χρόνο, καθώς το άνοιγμα είναι πολύ πιο εύκολο, γεγονός που καθιστά ιδιαίτερα χρήσιμο σε λειτουργίες υψηλότερης απόδοσης και σε εκείνες που χρησιμοποιούν διαδικασίες παρτίδας.
Ασφάλεια σφραγίδων
Ο καλύτερος τρόπος για να διασφαλίσετε μια ασφαλή σφράγιση είναι να βεβαιωθείτε ότι το κρυοειδές καπάκι και το μπουκάλι σας είναι κατασκευασμένα από το ίδιο υλικό. Αυτό θα εξασφαλίσει ότι συρρικνώνονται και διαστέλλονται από κοινού. Εάν κατασκευάζονται με χρήση διαφορετικών υλικών, τότε θα συρρικνώνονται και θα διαστέλλονται με διαφορετικούς ρυθμούς καθώς αλλάζει η θερμοκρασία, προκαλώντας κενά και πιθανή διαρροή και επακόλουθη μόλυνση.
Ορισμένες εταιρείες προσφέρουν διπλές ροδέλες και φλάντζα για το υψηλότερο επίπεδο ασφάλειας δειγμάτων σε κρυοφιαλίδια με εξωτερικό σπείρωμα. Τα κρυοφιαλίδια O-Ring θεωρούνται τα πιο αξιόπιστα για κρυοβιάκια με εσωτερικό σπείρωμα.
Γυαλί vs Πλαστικό
Για ασφάλεια και ευκολία, πολλά εργαστήρια χρησιμοποιούν πλέον πλαστικό, συνήθως πολυπροπυλένιο, αντί για θερμοσφραγιζόμενες γυάλινες αμπούλες. Οι γυάλινες αμπούλες θεωρούνται πλέον ξεπερασμένη επιλογή καθώς κατά τη διάρκεια της διαδικασίας σφράγισης μπορεί να αναπτυχθούν αόρατες διαρροές από οπές, οι οποίες όταν αποψυχθούν μετά την αποθήκευση σε υγρό άζωτο μπορεί να προκαλέσουν έκρηξή τους. Επίσης, δεν είναι τόσο κατάλληλα για τις σύγχρονες τεχνικές επισήμανσης, κάτι που είναι το κλειδί για τη διασφάλιση της ιχνηλασιμότητας του δείγματος.
Self Standing vs Rounded Bottoms
Τα κρυογονικά φιαλίδια είναι διαθέσιμα τόσο ως αυτόνομα με πάτο σε σχήμα αστεριού ή ως στρογγυλεμένο πάτο. Εάν πρέπει να τοποθετήσετε τα φιαλίδια σας σε μια επιφάνεια, τότε φροντίστε να επιλέξετε το αυτόνομο
Ιχνηλασιμότητα και Παρακολούθηση Δειγμάτων
Αυτός ο τομέας κρυογονικής αποθήκευσης συχνά παραβλέπεται, αλλά η παρακολούθηση δειγμάτων και η ιχνηλασιμότητα είναι μια κρίσιμη πτυχή που πρέπει να ληφθεί υπόψη. Τα κρυογονικά δείγματα μπορούν να αποθηκευτούν για πολλά χρόνια, κατά τη διάρκεια των οποίων το προσωπικό μπορεί να αλλάξει και χωρίς να τηρούνται σωστά αρχεία μπορεί να γίνουν μη αναγνωρίσιμα.
Βεβαιωθείτε ότι έχετε επιλέξει φιαλίδια που κάνουν την ταυτοποίηση του δείγματος όσο το δυνατόν πιο εύκολη. Τα πράγματα που πρέπει να προσέξετε περιλαμβάνουν:
Μεγάλοι χώροι γραφής για καταγραφή επαρκών λεπτομερειών, ώστε να μπορούν να βρεθούν αρχεία εάν ένα φιαλίδιο βρίσκεται σε εσφαλμένη τοποθεσία – συνήθως η ταυτότητα του κυττάρου, η ημερομηνία παγίωσης και τα αρχικά του υπεύθυνου είναι επαρκή.
Barcodes για να βοηθήσουν τα συστήματα διαχείρισης και παρακολούθησης δειγμάτων
Χρωματιστά καπάκια
Σημείωση για το μέλλον – αναπτύσσονται τσιπ εξαιρετικά ανθεκτικά στο κρύο, τα οποία, όταν τοποθετηθούν σε μεμονωμένα κρυοφιαλίδια, θα μπορούσαν ενδεχομένως να αποθηκεύσουν ένα λεπτομερές θερμικό ιστορικό καθώς και λεπτομερείς πληροφορίες παρτίδας, αποτελέσματα δοκιμών και άλλη σχετική τεκμηρίωση ποιότητας.
Εκτός από την εξέταση των διαφορετικών προδιαγραφών των διαθέσιμων φιαλιδίων, χρειάζεται επίσης να δοθεί κάποια σκέψη στην τεχνική διαδικασία αποθήκευσης κρυοφιαλιδίων σε υγρό άζωτο.
Θερμοκρασία αποθήκευσης
Υπάρχουν διάφορες μέθοδοι αποθήκευσης για την κρυογονική αποθήκευση των δειγμάτων, η καθεμία λειτουργεί σε συγκεκριμένη θερμοκρασία. Οι επιλογές και η θερμοκρασία στην οποία λειτουργούν περιλαμβάνουν:
Υγρή φάση LN2: διατήρηση θερμοκρασίας -196℃
Φάση ατμού LN2: μπορούν να λειτουργούν σε συγκεκριμένες θερμοκρασίες μεταξύ -135°C και -190°C ανάλογα με το μοντέλο.
Καταψύκτες ατμών αζώτου: -20°C έως -150°C
Ο τύπος των κυττάρων που αποθηκεύονται και η προτιμώμενη μέθοδος αποθήκευσης ενός ερευνητή θα καθορίσουν ποια από τις τρεις διαθέσιμες επιλογές χρησιμοποιεί το εργαστήριό σας.
Ωστόσο, λόγω των εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών που χρησιμοποιούνται δεν θα είναι όλοι οι σωλήνες ή τα σχέδια κατάλληλοι ή ασφαλείς. Τα υλικά μπορεί να γίνουν εξαιρετικά εύθραυστα σε εξαιρετικά χαμηλές θερμοκρασίες, η χρήση φιαλιδίου ακατάλληλου για χρήση στην επιλεγμένη θερμοκρασία μπορεί να προκαλέσει θραύση ή ρωγμή του δοχείου κατά την αποθήκευση ή την απόψυξη.
Ελέγξτε προσεκτικά τις συστάσεις των κατασκευαστών σχετικά με τη σωστή χρήση, καθώς ορισμένα κρυογονικά φιαλίδια είναι κατάλληλα για θερμοκρασίες έως -175°C, μερικά -150°C άλλα μόλις 80°C.
Αξίζει επίσης να σημειωθεί ότι πολλοί κατασκευαστές δηλώνουν ότι τα κρυογονικά φιαλίδια τους δεν είναι κατάλληλα για εμβάπτιση στην υγρή φάση. Εάν αυτά τα φιαλίδια φυλάσσονται στην υγρή φάση όταν επιστρέφουν σε θερμοκρασία δωματίου, αυτά τα φιαλίδια ή οι στεγανοποιήσεις τους μπορεί να σπάσουν λόγω ταχείας συσσώρευσης πίεσης που προκαλείται από μικρές διαρροές.
Εάν τα κύτταρα πρόκειται να αποθηκευτούν στην υγρή φάση του υγρού αζώτου, εξετάστε το ενδεχόμενο αποθήκευσης κυττάρων σε κατάλληλα κρυογονικά φιαλίδια σφραγισμένα με θερμότητα σε σωλήνες cryoflex ή αποθήκευση κυττάρων σε γυάλινες αμπούλες που είναι ερμητικά κλειστές.
Ώρα δημοσίευσης: Νοε-25-2022