Η μικροπιπέτα είναι ίσως το πιο χρησιμοποιούμενο εργαλείο στο εργαστήριο. Χρησιμοποιούνται από επιστήμονες σε ένα ευρύ φάσμα τομέων, συμπεριλαμβανομένου του ακαδημαϊκού χώρου, των νοσοκομείων και των εργαστηρίων εγκληματολογίας καθώς και της ανάπτυξης φαρμάκων και εμβολίων για τη μεταφορά ακριβών, πολύ μικρών ποσοτήτων υγρού
Αν και μπορεί να είναι ενοχλητικό και απογοητευτικό να εντοπίζετε φυσαλίδες αέρα στο άκρο της πιπέτας μιας χρήσης, εάν δεν εντοπιστούν ή αγνοηθούν, μπορεί να έχει τεράστιο αντίκτυπο στην αξιοπιστία και την αναπαραγωγιμότητα των αποτελεσμάτων.
Τα καλά νέα είναι ότι υπάρχουν μερικά απλά μέτρα που μπορείτε να λάβετε για να αποτρέψετε τις φυσαλίδες αέρα και να βελτιώσετε την απόδοση του εργαστηρίου, την ικανοποίηση του χειριστή καθώς και την ακρίβεια και ακρίβεια των αποτελεσμάτων.
Παρακάτω, διερευνούμε τις συνέπειες της εμφάνισης φυσαλίδας αέρα στο άκρο της πιπέτας σας και τι πρέπει να κάνετε στη συνέχεια.
Η συνέπεια των φυσαλίδων στοΜύτη πιπέτας
Ακόμα κι αν χρησιμοποιείτε τις πιο ακριβείς, κορυφαίες, καλά συντηρημένες, συντηρημένες και βαθμονομημένες πιπέτες, η αξιοπιστία των αποτελεσμάτων σας μπορεί να επηρεαστεί από σφάλματα εργαστηρίου. Όταν μπαίνουν φυσαλίδες στοάκρομπορεί να έχει πολλά αποτελέσματα.
● Όταν ο χρήστης εντοπίσει τη φυσαλίδα αέρα, πρέπει να αφιερώσει χρόνο για να διανείμει κατάλληλα το αναρροφούμενο υγρό, να βγάλει το άκρο και να ξεκινήσει ξανά τη διαδικασία.
● Οι μη ανιχνευμένες φυσαλίδες αέρα μπορεί να οδηγήσουν σε μεταφορά χαμηλού όγκου, μεταβάλλοντας έτσι τη συγκέντρωση των μειγμάτων αντίδρασης, οδηγώντας σε αποτυχημένα πειράματα και αμφισβητήσιμα ή αναξιόπιστα αποτελέσματα.
Αυτά τα αποτελέσματα μπορεί να έχουν πολλές συνέπειες (1).
● Μειωμένη απόδοση του εργαστηρίου – Οι δοκιμές και οι δοκιμές θα πρέπει να επαναληφθούν, με κόστος εργασίας και υλικού, το οποίο μπορεί να είναι αρκετά σημαντικό.
● Αμφισβητούμενα ή λανθασμένα αποτελέσματα δοκιμών – Εάν ανακοινωθούν λανθασμένα αποτελέσματα, μπορεί να υπάρχουν πιο σοβαρές συνέπειες, συμπεριλαμβανομένης της λανθασμένης διάγνωσης και της κακής έκβασης του ασθενούς.
● Ανάκληση χειρογράφων από περιοδικά – Εάν οι ομότιμοι δεν αντιγράψουν τα αποτελέσματά σας λόγω φυσαλίδων αέρα που προκαλούν ανακριβή αποτελέσματα, τα χαρτιά μπορεί να αποσυρθούν.
Βέλτιστες πρακτικές για την πρόληψη των φυσαλίδων αέρα
Στην πλειονότητα των περιπτώσεων οι φυσαλίδες αέρα στα άκρα της πιπέτας προκαλούνται από σφάλμα χειριστή. Η κακή τεχνική λόγω ανεπαρκούς προπόνησης ή κούρασης είναι συνήθως το υποκείμενο πρόβλημα.
Το σιφώνιο είναι μια εξειδικευμένη λειτουργία που απαιτεί 110% προσοχή, σωστή εκπαίδευση και εξάσκηση για να επιτευχθούν συνεπή και ακριβή αποτελέσματα.
Αν και υπάρχουν πολλά πράγματα που μπορείτε να κάνετε για να μειώσετε τα γενικά σφάλματα στο σιφώνιο, παρακάτω έχουμε επισημάνει ορισμένες βέλτιστες πρακτικές που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την αποφυγή φυσαλίδων αέραάκρες πιπέτας.
Βελτιώστε την τεχνική χρήστη
Πιπέτα αργά
Εάν το έμβολο απελευθερωθεί πολύ γρήγορα κατά την αναρρόφηση, μπορούν να εισαχθούν φυσαλίδες αέρα στο άκρο. Αυτό μπορεί να είναι ιδιαίτερα προβληματικό κατά τη μεταφορά παχύρρευστων υγρών. Παρόμοιο αποτέλεσμα μπορεί να συμβεί εάν το έμβολο απελευθερωθεί πολύ γρήγορα μετά τη διανομή.
Για να αποφύγετε τις φυσαλίδες αέρα κατά την αναρρόφηση, φροντίστε να λειτουργείτε το έμβολο των χειροκίνητων πιπετών με ομαλό και κανονικό τρόπο, εφαρμόζοντας σταθερή δύναμη.
Χρησιμοποιήστε το σωστό βάθος βύθισης
Η αποτυχία βύθισης του ρύγχους της πιπέτας αρκετά βαθιά κάτω από τον μηνίσκο της δεξαμενής υγρού μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την αναρρόφηση αέρα και, κατά συνέπεια, το σχηματισμό φυσαλίδων.
Ωστόσο, η βύθιση του άκρου πολύ βαθιά μπορεί να αναρροφήσει περισσότερο υγρό λόγω της αυξημένης πίεσης ή μπορεί να εμφανιστούν σταγονίδια στο εξωτερικό του άκρου, επομένως είναι σημαντικό να βυθίσετε τορύγχος πιπέταςστο σωστό βάθος.
Το συνιστώμενο βάθος ποικίλλει μεταξύ μεγέθους πιπέτας, τύπου και μάρκας. Αν και οι συστάσεις του κατασκευαστή πρέπει να ακολουθούνται, ακολουθεί ένας γενικός οδηγός που παρέχεται από το Εθνικό Εργαστήριο Φυσικής.
Οδηγός για την εμβάπτιση στο βάθος της άκρης
Όγκος πιπέτας (μl) & Βάθος βύθισης (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Προ-ΥγρόΣυμβουλές πιπέτας
Όταν μεταφέρετε με πιπέτα όγκους μεγαλύτερους από 10 μlάκρες πιπέταςσυνήθως προδιαβρέχονται γεμίζοντάς τα πολλές φορές με το υγρό που διανέμεται και αποβάλλοντάς το στα απόβλητα για βελτίωση της ακρίβειας.
Η αποτυχία να τα προ-βρέξετε μπορεί να προκαλέσει φυσαλίδες αέρα, ειδικά όταν χρησιμοποιείτε παχύρρευστα ή υδρόφοβα υγρά. Για να αποφύγετε τις φυσαλίδες αέρα, βεβαιωθείτε ότι έχετε προ-βρέξει τα άκρα όταν εκπέμπετε με πιπέτα όγκο μεγαλύτερο από 10µl.
Χρησιμοποιήστε τεχνικές ανάστροφης πιπέτας εάν είναι κατάλληλες
Παχύρρευστοι Ουσίες: Ένα κοινό πρόβλημα κατά τη διοχέτευση με πιπέτα ιξωδών ουσιών όπως διαλύματα πρωτεϊνών ή νουκλεϊκών οξέων, γλυκερόλη και Tween 20/40/60/80 είναι ο συχνός σχηματισμός φυσαλίδων όταν χρησιμοποιείται η τεχνική προώθησης με πιπέτα.
Το αργό σιφώνιο με τη χρήση της τεχνικής ανάστροφης πιπέτας μειώνει τον κίνδυνο σχηματισμού φυσαλίδων κατά τη μεταφορά παχύρρευστων διαλυμάτων.
Τεχνική ELISA
Αντίστροφη πιπέτα συνιστάται επίσης όταν εισάγετε μικρούς όγκουςΜικροδοκιμές 96 πηγαδιώνγια τεχνικές ELISA. Όταν οι φυσαλίδες αέρα έλκονται μέσα στην πιπέτα ή διανέμονται σε φρεάτια κατά την προσθήκη αντιδραστηρίων, μπορεί να επηρεάσει τις τιμές της οπτικής πυκνότητας και τα αποτελέσματα. Συνιστάται η ανάστροφη εισαγωγή με πιπέτα για την ελαχιστοποίηση ή την εξάλειψη αυτού του ζητήματος.
Χρησιμοποιήστε εργονομικές πιπέτες
Οι πιπέτες παλαιού τύπου που δεν έχουν σχεδιαστεί με γνώμονα την εργονομία απαιτούν περισσότερη σωματική προσπάθεια, κουράζεστε και η τεχνική σας με πιπέτα γίνεται ατημέλητη και κακή. Τα σφάλματα που αναφέρονται παραπάνω, όπως η γρήγορη απελευθέρωση του εμβόλου, ενδέχεται να συμβαίνουν πιο συχνά.
Επενδύοντας σε μια πιο εργονομική λύση θα μπορέσετε να διατηρήσετε εξαιρετική τεχνική και να αποτρέψετε το σχηματισμό φυσαλίδων αέρα λόγω κακής τεχνικής.
Αφιερώστε χρόνο για να εκπαιδεύσετε το προσωπικό
Η τακτική εκπαίδευση και αξιολόγηση του προσωπικού στις τεχνικές σιφώνισης μπορεί να διασφαλίσει ότι το σφάλμα χειριστή και ο σχηματισμός φυσαλίδων αέρα μειώνονται.
Εξετάστε περισσότερες αυτοματοποιημένες λύσεις
Όπως σημειώθηκε παραπάνω, οι περισσότερες φυσαλίδες αέρα προκαλούνται από τον χειριστή. Μπορεί να είναι δυνατό να μειωθεί το σφάλμα χειριστή και η άνεση χρησιμοποιώντας ηλεκτρονικές πιπέτες ή μια εύκαμπτη πλατφόρμα χειρισμού υγρών, όπως ηAgilent Bravo ρομπότ χειρισμού υγρών.
Χρησιμοποιήστε καλή ποιότηταΣυμβουλές πιπέτας
Οι μικροπιπέτες συνήθως αγοράζονται με προσοχή, αλλά συχνά λίγη σκέψη δίνεται στην ποιότητα του ρύγχους της πιπέτας μιας χρήσης. Λόγω της επιρροής που έχει ένα άκρο στα αποτελέσματα της πιπέτας, το πρότυποISO 8655 απαιτεί επιπλέον βαθμονόμηση εάν χρησιμοποιούνται οι πιπέτες και οι μύτες διαφορετικών κατασκευαστών.
Αυτό μπορεί να οφείλεται στο ότι πολλά φτηνά tips μπορεί να φαίνονται ωραία αρχικά, αλλά όταν τα μελετάτε προσεκτικά μπορεί να έχουν αναλαμπές, προεξοχές, γρατσουνιές και φυσαλίδες αέρα ή να είναι λυγισμένα ή να περιέχουν ακαθαρσίες.
Η αγορά άκρων καλής ποιότητας από πολυπροπυλένιο υψηλής ποιότητας μπορεί να μειώσει την εμφάνιση φυσαλίδων αέρα.
Για να ολοκληρώσω
Η λήψη φυσαλίδων αέρα στο άκρο της πιπέτας σας έχει αντίκτυπο στην αποτελεσματικότητα του εργαστηρίου καθώς και στην ανακρίβεια και την ανακρίβεια των αποτελεσμάτων. Έχουμε σημειώσει πολλά πράγματα που μπορείτε να κάνετε για να αποφύγετε να εισχωρήσουν φυσαλίδες αέραρύγχος πιπέτας.
Ωστόσο, εάν είναι κακής ποιότηταςάκρες πιπέταςπροκαλούν φυσαλίδες αέρα να εισχωρήσουν στο άκρο της πιπέτας σας, θα χαρείτε να μάθετε ότι η καθολική μας εφαρμογήάκρες πιπέταςείναι κατασκευασμένα με τα υψηλότερα πρότυπα και είναι κατασκευασμένα από καθαρό πολυπροπυλένιο υψηλής ποιότητας.
Suzhou Ace Βιοϊατρική εταιρείαπαράγουν υψηλής ποιότητας 10,20,50,100,200,300,1000 και 1250 µL όγκων γενικής χρήσης άκρες πιπέτας, 96 άκρες/ράφι. Εξαιρετική ανθεκτικότητα – όλα τα ράφια μύτης ACE ανταποκρίνονται στις απαιτήσεις χρήσης με πολυκάναλες πιπέτες. Αποστειρωμένο, φίλτρο, χωρίς RNase-/DNase και μη πυρετογόνο.
Καλώς ήρθατε να μας ρωτήσετε για περισσότερες λεπτομέρειες.
Ώρα δημοσίευσης: Δεκ-29-2022