Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη τεχνική στη μοριακή βιολογία για την ενίσχυση των θραυσμάτων DNA. Η PCR περιλαμβάνει διάφορα βήματα, συμπεριλαμβανομένης της μετουσίωσης, της ανόπτησης και της επέκτασης. Η επιτυχία αυτής της τεχνικής εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από την ποιότητα των πλακών PCR και των σωλήνων που χρησιμοποιούνται. Υπάρχουν πολλοί παράγοντες που πρέπει να ληφθούν υπόψη κατά την επιλογή των κατάλληλων πλακών και σωλήνων PCR για την εφαρμογή σας. Εδώ είναι ορισμένοι βασικοί παράγοντες που πρέπει να ληφθούν υπόψη:
1 χωρητικότηταΠλάκες PCRκαι οι σωλήνες έρχονται σε διαφορετικά μεγέθη και ικανότητες. Η επιλογή του μεγέθους και της χωρητικότητας εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από την ποσότητα του DNA που πρέπει να ενισχυθεί σε μία μόνο αντίδραση. Για παράδειγμα, εάν πρέπει να ενισχύσετε μια μικρή ποσότητα DNA, μπορείτε να επιλέξετε ένα μικρό σωλήνα. Εάν πρέπει να ενισχυθεί μια μεγάλη ποσότητα DNA, μπορεί να επιλεγεί μια πλάκα με μεγαλύτερη χωρητικότητα.
2. Οι πλάκες PCR υλικών και οι σωλήνες μπορούν να κατασκευαστούν από διαφορετικά υλικά όπως πολυπροπυλένιο, πολυανθρακικό ή ακρυλικό. Το πολυπροπυλένιο είναι το πιο συχνά χρησιμοποιούμενο υλικό λόγω της χημικής και θερμικής αντοχής του. Είναι επίσης λιγότερο ακριβό σε σύγκριση με άλλα υλικά. Τα πολυανθρακικά και τα ακρυλικά είναι πιο ακριβά, αλλά έχουν καλύτερη οπτική σαφήνεια και είναι ιδανικά για PCR σε πραγματικό χρόνο.
3. Η PCR θερμικής αγωγιμότητας περιλαμβάνει πολλαπλούς θερμικούς κύκλους, που απαιτούν ταχεία θέρμανση και ψύξη του μίγματος αντίδρασης. Επομένως, οι πλάκες και οι σωλήνες PCR πρέπει να έχουν καλή θερμική αγωγιμότητα για να εξασφαλίσουν ομοιόμορφη θέρμανση και ψύξη του μίγματος αντίδρασης. Οι πλάκες με λεπτές τοίχους και επίπεδες επιφάνειες είναι ιδανικές για τη μεγιστοποίηση της μεταφοράς θερμότητας.
4. Οι πλάκες PCR συμβατότητας και οι σωλήνες πρέπει να είναι συμβατές με τον θερμικό κυκλοποιητή που χρησιμοποιείτε. Οι πλάκες και οι σωλήνες πρέπει να είναι σε θέση να αντέχουν στις υψηλές θερμοκρασίες που απαιτούνται για την ενίσχυση των θραυσμάτων DNA. Συμβουλευτείτε πάντα τον κατασκευαστή θερμικών κυκλικών για τις συνιστώμενες πλάκες και τους σωλήνες.
5. Σφραγίδα Μια σφιχτή σφράγιση είναι κρίσιμη για την πρόληψη της μόλυνσης του μίγματος της αντίδρασης. Οι πλάκες και οι σωλήνες PCR μπορούν να σφραγιστούν χρησιμοποιώντας διαφορετικές μεθόδους όπως σφραγίδες θερμότητας, συγκολλητικά φιλμ ή καπάκια. Η σφράγιση θερμότητας είναι η ασφαλέστερη μέθοδος και παρέχει ένα ισχυρό εμπόδιο κατά της μόλυνσης.
6. Οι πλάκες PCR αποστείρωσης και οι σωλήνες πρέπει να είναι απαλλαγμένες από τυχόν μολυσματικές ουσίες που μπορεί να παρεμβαίνουν στην αντίδραση. Ως εκ τούτου, πρέπει να αποστειρωθούν πριν από τη χρήση. Είναι σημαντικό να επιλέξετε πλάκες και σωλήνες που είναι εύκολο να αποστειρωθούν και να ανθεκθούν σε μεθόδους χημικής και θερμικής αποστείρωσης.
Συνοπτικά, η επιλογή της δεξιάς πλάκας και των σωλήνων PCR είναι κρίσιμη για την επιτυχή ενίσχυση του DNA. Η επιλογή εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τον τύπο εφαρμογής, την ποσότητα του DNA που ενισχύεται και τη συμβατότητα με τους θερμικούς ποδηλάτες.
Suzhou Ace Biomedical Technology Co., Ltd. Προσφέρει μια σειρά από πλάκες και σωλήνες PCR υψηλής ποιότητας σε διαφορετικά μεγέθη, ικανότητες και υλικά για την κάλυψη των αναγκών κάθε ερευνητή.
Χρόνος δημοσίευσης: Μάιος-17-2023