Ein Experiment zu starten bedeutet, viele Fragen zu stellen. Welches Material wird benötigt? Welche Proben werden verwendet? Welche Bedingungen sind notwendig, z. B. Wachstum? Wie lange dauert die gesamte Bewerbung? Muss ich das Experiment am Wochenende oder nachts überprüfen? Eine Frage wird oft vergessen, ist aber nicht weniger wichtig. Welche Flüssigkeiten werden bei der Anwendung verwendet und wie werden diese pipettiert?
Da das Pipettieren von Flüssigkeiten zum täglichen Geschäft gehört und die aufgenommene Flüssigkeit auch wieder abgegeben wird, widmen wir diesem Thema in der Regel nicht allzu viel Zeit und Mühe. Es ist jedoch sinnvoll, zweimal über die verwendete Flüssigkeit und das verwendete Pipettenwerkzeug nachzudenken.
Flüssigkeiten können in fünf Hauptkategorien eingeteilt werden: wässrig, viskos (einschließlich Reinigungsmittel), flüchtig, dicht und infektiös oder giftig. Ein unsachgemäßer Umgang mit diesen Flüssigkeitskategorien hat enormen Einfluss auf das Pipettierergebnis. Während das Pipettieren wässriger Lösungen wie die meisten Puffer relativ einfach ist und hauptsächlich mit klassischen Luftpolsterpipetten durchgeführt wird, kann es beim Pipettieren flüchtiger Flüssigkeiten wie Aceton zu Schwierigkeiten kommen. Flüchtige Flüssigkeiten haben einen hohen Dampfdruck, der zur Verdunstung im Luftpolster und dadurch zur Tröpfchenbildung führt. Im Endeffekt bedeutet dies Proben- oder Reagenzienverlust ohne die richtige Pipettiertechnik. Beim Pipettieren flüchtiger Flüssigkeiten ist eine Vorbenetzung der Flüssigkeiten erforderlichPipettenspitze(wiederholte Ansaug- und Abgabezyklen zur Befeuchtung der Luft in der Spitze) ist zur Erhöhung der Pipettiergenauigkeit zwingend erforderlich. Eine ganz andere Flüssigkeitskategorie sind viskose Flüssigkeiten wie Glycerin. Diese weisen aufgrund einer hohen inneren Reibung der Moleküle ein sehr langsames Fließverhalten auf, was zur Ansaugung von Luftblasen, Rückständen in der Spitze und Proben- oder Reagenzienverlust führt. Bei der Verwendung klassischer Luftpolsterpipetten empfiehlt sich eine spezielle Pipettiertechnik, das so genannte Reverse-Pipettieren. Noch besser ist jedoch die Verwendung eines anderen Pipettierwerkzeugs, eines Verdrängergeräts mit einer spritzenähnlichen Spitze, das ohne Luftpolster zwischen der Probe und dem Kolben in der Spitze arbeitet. Mit diesen Hilfsmitteln kann Flüssigkeit schneller und einfacher abgesaugt werden. Bei der Abgabe einer viskosen Flüssigkeit kann das gesamte Volumen ohne Rückstände in der Spitze abgegeben werden.
Wenn Sie also vor Beginn eines Experiments über die Flüssigkeit nachdenken, können Sie Ihren Arbeitsablauf und Ihre Ergebnisse vereinfachen und verbessern. Einen Überblick über die Flüssigkeitskategorien, ihre Herausforderungen und Empfehlungen zu richtigen Pipettiertechniken und Pipettierwerkzeugen finden Sie auf unserem Poster. Sie können das Poster herunterladen, um eine druckbare Version für Ihr Labor zu erhalten.
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Zeitpunkt der Veröffentlichung: 09.02.2023