Wie man Pipetten und Spitzen richtig verwendet

Wie ein Koch ein Messer benutzt, benötigt ein Wissenschaftler Pipettierfähigkeiten. Ein erfahrener Koch mag in der Lage sein, scheinbar ohne nachzudenken eine Karotte in Streifen zu schneiden, aber es schadet nie, einige Pipettierrichtlinien im Hinterkopf zu behalten – egal, wie erfahren der Wissenschaftler ist. Hier geben drei Experten ihre Top-Tipps.

„Bei der manuellen Flüssigkeitsabgabe muss man auf die richtige Technik achten“, sagt Magali Gaillard, Senior Manager, Portfolio Management, MLH Business Line, Gilson (Villiers-le-bel, Frankreich). „Einige der häufigsten Pipettierfehler hängen mit der unvorsichtigen Verwendung von Pipettenspitzen, inkonsistentem Rhythmus oder Timing und unsachgemäßer Handhabung der Pipette zusammen.“

Manchmal wählt ein Wissenschaftler sogar die falsche Pipette. Wie Rishi Porecha, globaler Produktmanager beiRaininInstruments (Oakland, CA) sagt: „Zu den häufigsten Fehlern beim Pipettieren gehört, dass für eine bestimmte Aufgabe nicht die richtige Volumenpipette verwendet wird und dass für die Handhabung nichtwässriger Flüssigkeiten eine Luftverdrängungspipette verwendet wird.“ Bei viskosen Flüssigkeiten sollte immer eine Direktverdrängerpipette verwendet werden.

Bevor wir uns konkreten Pipettierverfahren zuwenden, sollten einige allgemeine Konzepte berücksichtigt werden. „Jedes Mal, wenn Pipettenbenutzer mit der Arbeit beginnen, sollten sie überlegen, welches Experiment sie durchführen, mit welchen Flüssigkeiten sie arbeiten und welchen Durchsatz sie wünschen, bevor sie sich für eine Pipette entscheiden“, sagt Porecha. „Realistisch gesehen verfügt kein Labor über alle Pipetten, die sich ein Benutzer wünscht, aber wenn ein Benutzer einen Blick darauf wirft, welche Werkzeuge im Labor und in der Abteilung verfügbar sind, erhält er möglicherweise eine bessere Vorstellung davon, welche vorhandenen Pipetten er in einem Test verwenden kann welche Pipetten sie vielleicht kaufen möchten.“

Die Funktionen heutiger Pipetten gehen über das Gerät selbst hinaus. Fortschritte im Liquid Handling haben es Benutzern nun ermöglicht, ihre Pipette mit der Cloud zu verbinden. Mit dieser Konnektivität kann ein Benutzer Protokolle herunterladen oder benutzerdefinierte Protokolle erstellen. Pipettierdaten können sogar in der Cloud erfasst werden. Dies ist eine Möglichkeit, Fehltritte zu erkennen und den Pipettierprozess zu verbessern, insbesondere durch die Verfolgung der laufenden Genauigkeit oder deren Fehlen.

Mit der richtigen Ausrüstung besteht die nächste Herausforderung darin, die Schritte richtig zu machen.

Schlüssel zum Erfolg

Bei einer Luftverdrängungspipette erhöhen die folgenden Schritte die Wahrscheinlichkeit, ein bestimmtes Volumen genau und wiederholt zu messen:

1. Stellen Sie das Volumen an der Pipette ein.
2. Drücken Sie den Kolben herunter.
3. Tauchen Sie die Spitze bis zur richtigen Tiefe ein, die je nach Pipette und Spitze variieren kann, und lassen Sie den Kolben sanft in seine Ruheposition gehen.
4. Warten Sie etwa eine Sekunde, bis die Flüssigkeit in den fließtTipp.
5. Setzen Sie die Pipette – gehalten in einem Winkel von 10–45 Grad – an die Wand der Aufnahmekammer und drücken Sie den Kolben sanft bis zum ersten Anschlag herunter.
6. Warten Sie eine Sekunde und drücken Sie dann den Kolben bis zum zweiten Anschlag herunter.
7. Schieben Sie die Spitze an der Gefäßwand hoch, um die Pipette zu entfernen.
8. Lassen Sie den Kolben in seine Ruheposition zurückkehren.