Was sind Kryoröhrchen?
Kryo-Aufbewahrungsfläschchensind kleine, verschlossene und zylindrische Behälter, die für die Lagerung und Konservierung von Proben bei extrem niedrigen Temperaturen konzipiert sind. Obwohl diese Fläschchen traditionell aus Glas hergestellt wurden, werden sie heute aus Bequemlichkeits- und Kostengründen viel häufiger aus Polypropylen hergestellt. Kryoröhrchen wurden sorgfältig entwickelt, um Temperaturen von bis zu -196 °C standzuhalten und eine Vielzahl von Zelltypen aufzunehmen. Diese reichen von Diagnosestammzellen, Mikroorganismen, Primärzellen bis hin zu etablierten Zelllinien. Darüber hinaus können darin auch kleine mehrzellige Organismen eingelagert seinkryogene Lagerfläschchensowie Nukleinsäuren und Proteine, die bei kryogenen Lagertemperaturen gelagert werden müssen.
Kryo-Aufbewahrungsfläschchen gibt es in verschiedenen Formen. Wenn Sie den richtigen Typ finden, der alle Ihre Anforderungen erfüllt, stellen Sie sicher, dass Sie die Probenintegrität wahren, ohne zu viel zu bezahlen. Lesen Sie unseren Artikel, um mehr über die wichtigsten Kaufaspekte bei der Auswahl des richtigen Kryoröhrchens für Ihre Laboranwendung zu erfahren.
Zu berücksichtigende Eigenschaften von kryogenen Fläschchen
Externe vs. interne Threads
Oftmals wird diese Wahl aufgrund persönlicher Vorlieben getroffen, es gibt jedoch tatsächlich wichtige funktionale Unterschiede zwischen den beiden Garnarten, die es zu berücksichtigen gilt.
Viele Labore entscheiden sich oft für Fläschchen mit Innengewinde, um den Platz für die Röhrchenaufbewahrung zu minimieren und einen besseren Einbau in Gefrierboxen zu ermöglichen. Dennoch können Sie davon ausgehen, dass die Option mit Außengewinde die bessere Option für Sie ist. Es wird davon ausgegangen, dass bei ihnen ein geringeres Kontaminationsrisiko besteht, da es aufgrund ihres Designs noch schwieriger ist, dass etwas anderes als die Probe in das Fläschchen gelangt.
Für genomische Anwendungen werden im Allgemeinen Fläschchen mit Außengewinde bevorzugt, für Biobanking und andere Anwendungen mit hohem Durchsatz gelten jedoch beide Optionen als geeignet.
Eine letzte Sache, die Sie beim Einfädeln beachten sollten: Wenn Ihr Labor Automatisierung nutzt, müssen Sie möglicherweise überlegen, welches Gewinde mit den Instrumentengreifern verwendet werden kann.
Speichervolumen
Kryofläschchen sind in verschiedenen Größen erhältlich, um die meisten Bedürfnisse abzudecken, meist liegen sie jedoch zwischen einem Fassungsvermögen von 1 ml und 5 ml.
Der Schlüssel besteht darin, sicherzustellen, dass Ihr Kryoröhrchen nicht überfüllt ist und dass zusätzlicher Platz zur Verfügung steht, falls die Probe beim Einfrieren aufquillt. In der Praxis bedeutet dies, dass Labore sich für 1-ml-Fläschchen entscheiden, wenn sie Proben von 0,5 ml in Kryoschutzmittel suspendierten Zellen lagern, und für 2,0-ml-Fläschchen für 1,0 ml Probe. Ein weiterer Tipp, um ein Überfüllen Ihrer Fläschchen zu vermeiden, besteht darin, Kryoröhrchen mit abgestuften Markierungen zu verwenden, um ein Anschwellen zu verhindern, das zu Rissen oder Undichtigkeiten führen könnte.
Schraubverschluss vs. Flip-Top
Welche Art von Aufsatz Sie wählen, hängt hauptsächlich davon ab, ob Sie flüssigen Stickstoff verwenden oder nicht. Wenn ja, dann benötigen Sie Kryoröhrchen mit Schraubverschluss. Dadurch wird sichergestellt, dass sie aufgrund falscher Handhabung oder Temperaturschwankungen nicht versehentlich aufspringen können. Darüber hinaus ermöglichen Schraubverschlüsse eine einfachere Entnahme aus Kryoboxen und eine effizientere Lagerung.
Wenn Sie jedoch keinen flüssigen Stickstoff verwenden und einen bequemeren Deckel benötigen, der sich leichter öffnen lässt, ist ein Klappdeckel die bessere Option. Dadurch sparen Sie viel Zeit, da es viel einfacher zu öffnen ist, was besonders bei Betrieben mit höherem Durchsatz und bei Batch-Prozessen nützlich ist.
Siegelsicherheit
Der beste Weg, um eine sichere Versiegelung zu gewährleisten, besteht darin, sicherzustellen, dass sowohl der Verschluss Ihres Kryogefäßes als auch die Flasche aus dem gleichen Material bestehen. Dadurch wird sichergestellt, dass sie gleichzeitig schrumpfen und sich ausdehnen. Wenn sie aus unterschiedlichen Materialien hergestellt werden, schrumpfen und dehnen sie sich bei Temperaturänderungen unterschiedlich schnell aus, was zu Lücken und potenziellen Leckagen und daraus resultierender Kontamination führt.
Einige Unternehmen bieten doppelte Unterlegscheiben und Flansche für ein Höchstmaß an Probensicherheit bei Kryoröhrchen mit Außengewinde an. O-Ring-Kryoröhrchen gelten als die zuverlässigsten Kryoröhrchen mit Innengewinde.
Glas vs. Kunststoff
Aus Sicherheits- und Komfortgründen verwenden viele Labore heute Kunststoffampullen, meist Polypropylen, anstelle von heißversiegelbaren Glasampullen. Glasampullen gelten mittlerweile als veraltet, da beim Versiegelungsprozess unsichtbare, nadelstichartige Lecks entstehen können, die beim Auftauen nach der Lagerung in flüssigem Stickstoff zur Explosion führen können. Sie eignen sich auch nicht so gut für moderne Etikettierungstechniken, die für die Gewährleistung der Rückverfolgbarkeit der Proben von entscheidender Bedeutung sind.
Selbststehende vs. abgerundete Hosen
Kryofläschchen sind sowohl freistehend mit sternförmigem Boden als auch mit abgerundetem Boden erhältlich. Wenn Sie Ihre Fläschchen auf einer Oberfläche platzieren müssen, achten Sie darauf, dass Sie sich für eine freistehende Variante entscheiden
Rückverfolgbarkeit und Probenverfolgung
Dieser Bereich der kryogenen Lagerung wird oft übersehen, aber die Probenverfolgung und Rückverfolgbarkeit ist ein entscheidender Aspekt, den es zu berücksichtigen gilt. Kryoproben können viele Jahre lang gelagert werden. In diesem Zeitraum kann das Personal wechseln und ohne ordnungsgemäß geführte Aufzeichnungen können sie nicht mehr identifizierbar sein.
Achten Sie darauf, Fläschchen auszuwählen, die die Probenidentifizierung so einfach wie möglich machen. Zu den Dingen, auf die Sie achten sollten, gehören:
Große Schreibflächen zum Aufzeichnen ausreichender Details, sodass Aufzeichnungen gefunden werden können, wenn sich ein Fläschchen an einem falschen Ort befindet – in der Regel genügen die Zellidentität, das Einfrierdatum und die Initialen der verantwortlichen Person.
Barcodes zur Unterstützung von Probenverwaltungs- und Nachverfolgungssystemen
Farbige Kappen
Ein Hinweis für die Zukunft: Es werden ultrakältebeständige Chips entwickelt, die, wenn sie in einzelne Kryoröhrchen eingebaut werden, möglicherweise einen detaillierten thermischen Verlauf sowie detaillierte Chargeninformationen, Testergebnisse und andere relevante Qualitätsdokumentationen speichern könnten.
Neben der Berücksichtigung der unterschiedlichen Spezifikationen der verfügbaren Fläschchen muss auch über den technischen Prozess der Lagerung von Kryoröhrchen in flüssigem Stickstoff nachgedacht werden.
Lagertemperatur
Für die kryogene Lagerung von Proben gibt es mehrere Lagermethoden, die jeweils bei einer bestimmten Temperatur arbeiten. Zu den Optionen und der Betriebstemperatur gehören:
Flüssigphase LN2: Halten Sie eine Temperatur von -196℃ aufrecht
Dampfphasen-LN2: können je nach Modell in bestimmten Temperaturbereichen zwischen -135 °C und -190 °C betrieben werden.
Stickstoffdampf-Gefriergeräte: -20 °C bis -150 °C
Die Art der gelagerten Zellen und die vom Forscher bevorzugte Lagerungsmethode bestimmen, welche der drei verfügbaren Optionen Ihr Labor nutzt.
Aufgrund der extrem niedrigen Temperaturen sind jedoch nicht alle Rohre oder Designs geeignet oder sicher. Materialien können bei extrem niedrigen Temperaturen extrem spröde werden. Die Verwendung eines Fläschchens, das nicht für die Verwendung bei der von Ihnen gewählten Temperatur geeignet ist, kann dazu führen, dass das Gefäß während der Lagerung oder beim Auftauen zerbricht oder Risse bekommt.
Überprüfen Sie sorgfältig die Empfehlungen der Hersteller zur ordnungsgemäßen Verwendung, da einige Kryofläschchen für Temperaturen von bis zu -175 °C geeignet sind, einige für -150 °C, andere nur für 80 °C.
Erwähnenswert ist auch, dass viele Hersteller angeben, dass ihre Kryofläschchen nicht zum Eintauchen in die flüssige Phase geeignet sind. Wenn diese Fläschchen in der flüssigen Phase gelagert werden, können diese Fläschchen oder ihre Verschlussdichtungen bei der Rückkehr auf Raumtemperatur aufgrund eines schnellen Druckaufbaus aufgrund kleiner Lecks zerbrechen.
Wenn Zellen in der flüssigen Phase von flüssigem Stickstoff gelagert werden sollen, erwägen Sie die Lagerung der Zellen in geeigneten Kryofläschchen, die in Kryoflex-Schläuchen heißversiegelt sind, oder die Lagerung der Zellen in hermetisch verschlossenen Glasampullen.
Zeitpunkt der Veröffentlichung: 25. November 2022