Polymerase-Kettenreaktionen (PCR) sind eine der bekanntesten Methoden in Life-Science-Labors.
Die PCR-Platten werden aus erstklassigen Kunststoffen hergestellt und ermöglichen eine hervorragende Verarbeitung und Analyse der gesammelten Proben oder Ergebnisse.
Sie haben dünne und homogene Wände, um eine präzise Wärmeübertragung zu gewährleisten.
Zur Vorbereitung von Echtzeitanwendungen werden winzige DNA- oder RNA-Abschnitte isoliert und in PCR-Platten aufbewahrt.
Die PCR-Platten sind hocheffizient beim Heißsiegeln und schränken zudem den Wärmefluss ein.
Doch so effektiv und zuverlässig die PCR-Platten auch sind, bei der Probenverarbeitung kann es leicht zu Fehlern und Ungenauigkeiten kommen.
Wenn Sie also an einer guten und hohen Qualität interessiert sindPCR-Platten.Am besten wenden Sie sich an einen zuverlässigen PCR-Plattenhersteller. Damit haben Sie die Gewissheit, das beste Angebot zu erhalten.
Hier sind einige Vorsichtsmaßnahmen, die Sie befolgen sollten, um eine Kontamination von Reagenzien oder Proben zu vermeiden und zu verhindern, dass sich Ungenauigkeiten in die Ergebnisse einschleichen.
Sterilisieren der Umgebung
Aufgrund der Anwesenheit von Verunreinigungen kommt es zu falschen Positiv- oder Negativbefunden, was Zweifel an den Ergebnissen aufkommen lässt.
Verunreinigungen und Verunreinigungen treten in verschiedenen Formen auf, beispielsweise als nicht verwandte DNA oder chemische Zusätze, die letztendlich die Effizienz und Wirksamkeit der Reaktion verringern.
Es gibt zahlreiche Möglichkeiten, die Kontaminationsrate der PCR-Platte deutlich zu reduzieren.
Die Verwendung sterilisierter Filterspitzen ist eine weitere nützliche Möglichkeit, um zu verhindern, dass Verunreinigungen durch die Pipetten in Ihre Proben gelangen.
Stellen Sie eine völlig saubere Ausrüstung, bestehend aus Pipetten und Racks, ausschließlich für die PCR-Verwendung bereit. Dadurch wird eine vernachlässigbare Übertragung von Verunreinigungen oder Kontaminanten im Labor gewährleistet.
Verwenden Sie Bleichmittel und Ethanol auf den Pipetten, Gestellen und Bänken, um Verunreinigungen abzuwischen.
Weisen Sie allen Ihren PCR-Reaktionen einen reservierten Platz zu, um die Partikelkontamination weiter zu minimieren.
Tragen Sie bei jedem Schritt saubere Handschuhe und ersetzen Sie diese regelmäßig.
PCR-Platten
Überprüfen Sie die Konzentration und Reinheit der Vorlage.
Die Sauberkeit des Labortischs und der Ausrüstung, die bei der Analyse von Proben mit der PCR verwendet werden, sollte gewahrt bleiben. Es ist wichtig, den Reinheitsgrad der Proben vor der Analyse und Verarbeitung zu validieren.
Im Allgemeinen berücksichtigen Analysegeräte die Konzentration und den Reinheitsgrad der DNA-Proben.
Achten Sie darauf, dass das Absorptionsverhältnis für 260 nm/280 nm nicht weniger als 1,8 beträgt. Anschließend werden Wellenlängen zwischen 230 nm und 320 nm zur Identifizierung von Verunreinigungen verwendet.
In einem Fall werden chaotrope Salze und andere organische Verbindungen bei einer Absorptionsrate von 230 nm nachgewiesen. Trübungen in DNA-Proben werden ebenfalls bei einer Absorptionsrate von 320 nm erkannt und verifiziert.
Vermeiden Sie eine Überladung der PCR-Platten mit Produkt
So sehr es erwünscht ist, mehrere Produkte gleichzeitig laufen zu lassen, führt dies zu einer Kreuzkontamination der PCR-Platten.
Eine Überladung der PCR-Platten mit unterschiedlichen Produkten führt zu Abfall und erschwert die Bestimmung der Proben erheblich.
Führen Sie Aufzeichnungen über aliquote PCR-Reagenzien
Kontinuierliche Einfrier-/Auftauzyklen und die häufige Verwendung von Aliquots können die PCR-Reagenzien, Enzyme und DNTPs durch Rekristallisation beschädigen.
Bemühen Sie sich immer, die Menge der verwendeten Aliquots bei der Vorbereitung der zu analysierenden Proben zu überwachen.
Das bevorzugte LIMS eignet sich besser zur Kontrolle des Inventars und der Menge der eingefrorenen oder aufgetauten Reagenzien und Proben.
Wählen Sie die beste Glühtemperatur.
Die Auswahl und Verwendung einer falschen Annealing-Temperatur ist eine weitere Möglichkeit, dass PCR-Ergebnisse fehlerhaft sind.
Manchmal verläuft die Reaktion nicht wie geplant. Um eine erfolgreiche Reaktion zu ermöglichen, ist es wünschenswert, die Glühtemperatur zu senken.
Eine Senkung der Temperatur erhöht jedoch die Wahrscheinlichkeit falsch positiver Ergebnisse und des Auftretens von Primerdimeren.
Es ist wichtig, die Analyse der Schmelzkurve bei der Verwendung der PCR-Platten zu bestätigen, da sie ein guter Indikator für die Wahl der richtigen Annealing-Temperatur ist.
Primer-Design-Software hilft beim Design, sorgt für die richtige Annealing-Temperatur und reduziert direkt Fehler in den PCR-Platten.
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Zeitpunkt der Veröffentlichung: 30. Okt. 2021