Skærer du afpipettespidsnår man pipetterer glycerol? Det gjorde jeg under min ph.d., men jeg måtte lære, at dette øger unøjagtigheden og upræcisionen i min pipettering. Og for at være ærlig, da jeg skar spidsen af, kunne jeg også have hældt glycerolen direkte fra flasken ned i røret. Så jeg ændrede min teknik for at forbedre pipetteringsresultaterne og opnå mere pålidelige og reproducerbare resultater, når jeg arbejder med viskose væsker.
En væskekategori, der kræver særlig opmærksomhed ved pipettering, er viskøse væsker. Disse bruges ofte i laboratoriet, enten i ren form eller som bufferkomponenter. Berømte repræsentanter for viskøse væsker i forskningslaboratorier er glycerol, Triton X-100 og Tween® 20. Men laboratorier, der udfører kvalitetskontrol af fødevarer, kosmetik, lægemidler og andre forbrugerprodukter, beskæftiger sig også med viskøse opløsninger dagligt.
Viskositet angives enten som dynamisk eller kinematisk viskositet. I denne artikel koncentrerer jeg mig om væskers dynamiske viskositet, da den beskriver væskens bevægelse. Viskositetsgraden er angivet i millipascal pr. sekund (mPa*s). Flydende prøver omkring 200 mPa*s, såsom 85 % glycerol, kan stadig overføres ved hjælp af en klassisk luftpudepipette. Ved anvendelse af en speciel teknik, omvendt pipettering, reduceres aspiration af luftbobler eller rester i spidsen kraftigt, hvilket fører til mere nøjagtige pipetteringsresultater. Men det er stadig ikke det bedste, vi kan gøre for at forbedre pipettering af viskøse væsker (se fig. 1).
Når viskositeten stiger, øges vanskelighederne. Mellemviskøse opløsninger på op til 1.000 mPa*s er vanskeligere at overføre ved hjælp af klassiske luftpudepipetter. På grund af molekylernes høje indre friktion har viskøse væsker en meget langsom strømningsadfærd, og pipettering skal udføres meget langsomt og forsigtigt. Omvendt pipetteringsteknik er ofte ikke nok til præcis væskeoverførsel, og mange mennesker vejer deres prøver. Denne strategi betyder også, at man tager højde for væskens densitet samt laboratorieforhold såsom fugtighed og temperatur for præcist at beregne den nødvendige væskevolumen i vægt. Derfor anbefales andre pipetteringsværktøjer, såkaldte positive forskydningsværktøjer. Disse har en spids med et integreret stempel, ligesom en sprøjte. Derfor kan væske lettere aspireres og dispenseres, samtidig med at der gives præcis væskeoverførsel. En særlig teknik er ikke nødvendig.
Ikke desto mindre når positive fortrængningsværktøjer også en grænse med meget viskose opløsninger såsom flydende honning, hudcreme eller visse mekaniske olier. Disse meget krævende væsker kræver et andet specialværktøj, der også bruger princippet om positiv fortrængning, men derudover har et optimeret design til at håndtere meget viskøse opløsninger. Dette specialværktøj er blevet sammenlignet med eksisterende positive fortrængningsspidser for at opnå en tærskel, hvor det er vigtigt at skifte fra en normal dispenseringsspids til en specialspids til meget viskøse opløsninger. Det blev vist, at nøjagtigheden øges, og de kræfter, der er nødvendige til aspiration og dispensering, reduceres, når man bruger en specialspids til meget viskøse væsker. For yderligere detaljerede oplysninger og væskeeksempler, download venligst Applicaton Note 376 om optimeret ydeevne til meget viskøse væsker.
Opslagstidspunkt: 23. januar 2023