Skærer du afpipettespidsnår du pipetterer glycerol? Det gjorde jeg under min ph.d., men jeg måtte lære, at dette øger unøjagtigheden og unøjagtigheden af min pipettering. Og for at være ærlig, da jeg skar spidsen, kunne jeg også have hældt glycerolen fra flasken direkte i røret. Så jeg ændrede min teknik for at forbedre pipetteringsresultaterne og opnå mere pålidelige og reproducerbare resultater, når jeg arbejder med tyktflydende væsker.
En væskekategori, som kræver særlig opmærksomhed ved pipettering, er tyktflydende væsker. Disse bruges ofte i laboratoriet, enten i ren form eller som bufferkomponenter. Berømte repræsentanter for tyktflydende væsker i forskningslaboratorier er glycerol, Triton X-100 og Tween® 20. Men også laboratorier, der udfører kvalitetskontrol af fødevarer, kosmetik, lægemidler og andre forbrugerprodukter, håndterer tyktflydende opløsninger på daglig basis.
Viskositet er enten angivet som dynamisk eller kinematisk viskositet. I denne artikel koncentrerer jeg mig om væskers dynamiske viskositet, da den beskriver væskens bevægelse. Graden af viskositet er angivet i millipascal pr. sekund (mPa*s). Væskeprøver omkring 200 mPa*s, såsom 85 % glycerol, kan stadig overføres med en klassisk luftpudepipette. Ved anvendelse af en speciel teknik reduceres omvendt pipettering, aspiration af luftbobler eller rester i spidsen kraftigt og fører til mere nøjagtige pipeteringsresultater. Men det er stadig ikke det bedste, vi kan gøre for at forbedre pipettering af viskøse væsker (se fig. 1).
Når viskositeten stiger, øges vanskelighederne. Mellemviskøse opløsninger op til 1.000 mPa*s er vanskeligere at overføre ved brug af klassiske luftpudepipetter. På grund af molekylernes høje indre friktion har viskøse væsker en meget langsom strømningsadfærd, og pipettering skal udføres meget langsomt og omhyggeligt. Omvendt pipetteringsteknik er ofte ikke nok til nøjagtig væskeoverførsel, og mange mennesker vejer deres prøver. Denne strategi betyder også, at der tages højde for væskens densitet samt laboratoriebetingelserne såsom fugtighed og temperatur for nøjagtigt at beregne det nødvendige væskevolumen i vægt. Derfor anbefales andre pipetteringsværktøjer, såkaldte positive forskydningsværktøjer. Disse har en spids med integreret stempel, ligesom en sprøjte. Derfor kan væske lettere aspireres og dispenseres, mens der gives nøjagtig væskeoverførsel. En speciel teknik er ikke nødvendig.
Ikke desto mindre når også positive forskydningsværktøjer en grænse med meget tyktflydende opløsninger som flydende honning, hudcreme eller visse mekaniske olier. Disse meget krævende væsker har brug for et andet specialværktøj, der også bruger det positive forskydningsprincip, men som desuden har et optimeret design til at håndtere højviskose løsninger. Dette specielle værktøj er blevet sammenlignet med eksisterende positive forskydningsspidser for at opnå en tærskel, hvor det er vigtigt at skifte fra en normal dispenseringsspids til en speciel spids til højviskose opløsninger. Det blev vist, at nøjagtigheden øges, og de nødvendige kræfter til aspiration og dispensering reduceres, når der anvendes en speciel spids til højviskose væsker. For yderligere detaljerede oplysninger og flydende eksempler, download venligst Applicaton Note 376 om optimeret ydeevne til meget viskøse væsker.
Indlægstid: 23-jan-2023