Hvordan man forsegler en PCR -plade

Indledning

PCR -plader, en hæfteklamme i laboratoriet i mange år, bliver endnu mere udbredt i den moderne indstilling, når laboratorier opskalerer deres gennemstrømning og i stigende grad anvender automatisering inden for deres arbejdsgange. At nå disse mål, mens man bevarer nøjagtigheden og integriteten af ​​eksperimenter, kan være vanskelig. Et af de fælles områder, hvor fejl kan krybe ind, er med forseglingen afPCR -plader, med dårlig teknik, der tillader fordampning af prøver, ændring af pH og derfor forstyrrer enzymatiske funktioner og inviterer forurening. At lære at forsegle enPCR -pladeeliminerer korrekt disse risici og sikrer reproducerbare resultater.

Find den rigtige tætning til din PCR -plade

Pladehætter vs. filmforsegling vs. låg
Hætterer en god måde at forsegle din tallerken med en tæt tætning, mens du stadig giver dig fleksibiliteten til meget let at fjerne sig og genforsegle pladen, som du har brug for uden affald. Imidlertid har kasketter et par nøgle -ulemper.

For det første bliver du nødt til at købe den specifikke cap, der er kompatibel, hvilket gør dem ikke alsidige. Du bliver nødt til at sørge for, at den hætte, du vælger, passer til pladen, som er afhængig af dens producent, og vælg enten kuppel eller fladt baseret på den termocycler, du bruger.

For det andet kan anvendelse af hætterne på pladen være meget gentagne og kedelige med risikoen for krydskontaminering, hvis du lægger det forkerte loft på den forkerte brønd.

Mens filmsæler er mindre fleksible med hensyn til fjernelse og udskiftning, er de meget alsidige, da de passer til enhver form for PCR -plade uden hensyntagen til, hvem producenten er. De kan simpelthen skæres til størrelse, hvilket gør dem meget effektive.

En anden mulighed er et pladelåg. Disse tilbyder mindre beskyttelse, der hætter og sæler, og bruges hovedsageligt kun til kortvarig dækning for at forhindre forurening.

Optisk vs. foliefilmforsegling

Uanset om du har brug for en optisk, klar tætning eller enAluminiumsfoliefilmFor at forsegle din plade afgøres af dit eksperimentelle format.Optiske tætningsfilmer gennemsigtige for at give dig mulighed for at observere prøver, mens du stadig beskytter dem og forhindrer fordampning. De er også især nyttige i QPCR -eksperimenter, der involverer at foretage meget præcise målinger af fluorescens direkte fra pladen, i hvilket tilfælde du har brug for en tætningsfilm, der filtrerer så lidt fluorescens som muligt. Det er vigtigt at sikre, at den tætning eller hætte, du bruger, har et højt niveau af optisk klarhed til at sikre, at aflæsningerne er nøjagtige.

Foliefilm er passende til eventuelle prøver, der er lette følsomme eller skal opbevares under 80 ° C. Af denne grund kræver de fleste prøver, der er bestemt til langvarig opbevaring, en foliefilm. Foliefilm er også gennemborede, hvilket er nyttigt til enten at undersøge individuelle brønde eller til overførsel af prøver fra nåle. Dette kan forekomme manuelt eller som en del af en robotplatform.

Overvej også, at aggressive stoffer, der inkluderer syrer, baser eller opløsningsmidler, kræver en tætning, der kan modstå dem, i hvilket tilfælde en folieforsegling sandsynligvis er mere passende.

Klæbemiddel vs. varmeforseglingsfilm
Klæbende filmforseglingerer meget ligetil og let gældende. Alt hvad du behøver er, at en bruger skal anvende tætningen på pladen og bruge et simpelt applikatorværktøj til at trykke ned og danne en tæt tætning.

Varmeforseglinger er mere avancerede, hvilket giver en længere varig tætning, der har reduceret fordampningshastigheden sammenlignet med et konventionelt klæbemiddelforsegling. Denne mulighed er passende, hvis du ønsker at gemme prøver på lang sigt, selvom dette kommer med et yderligere krav til pladeforseglingsudstyr.

Hvordan man forsegler en PCR -plade

Metode til tætning af pladesætning

Selvklæbende

1.. Sørg for, at du arbejder på en flad og stabil arbejdsoverflade

2. Fjern filmen fra emballagen, og fjern opbakningen

3. placer forsigtigt forseglingen på pladen, mens du sørger for, at alle brønde er dækket

4. Brug et applikatorværktøj til at lægge tryk på tværs af pladen. Start fra den ene ende og arbejd dig hen til den anden, og tryk jævnt

5. Gentag dette adskillige gange

6. Kør din applikator rundt på de udvendige brønde for at sikre, at disse også er korrekt forseglet.

Varmeforseglinger

Varmeforseglinger fungerer ved at smelte filmen til kanten af ​​hver brønd ved hjælp af en pladesætning. For at betjene en varmeforsegler skal du henvise til instruktionerne fra producenten af ​​udstyret. Sørg for, at den producent, du kilder dit udstyr fra, er velrenommeret, da det er meget vigtigt, at tætningen er korrekt, effektiv og vandtæt.

Pladeforsegling Top tip

en. Gå i både vandrette og lodrette retninger for at sikre et ordentligt forsegling, når du lægger pres på tætningen.

b. Det er altid god praksis at køre et testkørsel af hvad du end laver, og dette er ikke anderledes med pladetætning. Test med en tom plade, før du bruger en med prøver.

c. Når du tester, skal du tage forseglingen af ​​og se for at se, at klæbemidlet sidder fast korrekt uden huller. Der er en visuel repræsentation af dette i det første referencedokument. Hvis du ikke har forseglet pladen korrekt, når du fjerner tætningen, vil der være huller, hvor klæbemidlet ikke har gjort fuldt binding til pladen.

d. Til forsendelse og transport af prøver kan du synes, det er nyttigt at påføre en plastforsegling på toppen af ​​folieforseglingen til ekstra beskyttelse (især fra piercing).

e. Sørg altid for, at der ikke er nogen buler eller rynker, når du anvender filmen - disse vil forårsage lækager og fordampning