Som en kok, der bruger en kniv, har en videnskabsmand brug for pipettering. En erfaren kok kan muligvis skære en gulerod i bånd, tilsyneladende uden en tanke, men det skader aldrig at have nogle pipetteringsregler i tankerne - uanset hvor erfaren videnskabsmanden er. Her giver tre eksperter deres bedste tips.
"Man skal være forsigtig med at have den rigtige teknik, når man manuelt dispenserer væske," siger Magali Gaillard, senior manager, porteføljestyring, MLH Business Line, Gilson (Villiers-le-bel, Frankrig). "Nogle af de mest almindelige pipetteringsfejl er relateret til skødesløs brug af pipettespidser, inkonsekvent rytme eller timing og forkert håndtering af pipetten."
Nogle gange vælger en videnskabsmand endda den forkerte pipette. Som Rishi Porecha, global produktchef hosRegnInstruments (Oakland, CA), siger: "Nogle almindelige fejl ved pipettering omfatter ikke at bruge den korrekte volumenpipette til en specifik opgave og at bruge en luftfortrængningspipette til at håndtere ikke-vandig væske." Ved tyktflydende væsker bør der altid anvendes en positiv forskydningspipette.
Inden der kommer til specifikke pipetteringsmetoder, bør nogle generelle begreber overvejes. "Hver gang pipettebrugere begynder at arbejde for dagen, bør de overveje, hvilket eksperiment de laver, hvilke væsker de arbejder med, og hvilken gennemstrømning de ønsker, før de vælger en pipette," siger Porecha. "Realistisk set har intet laboratorium alle de pipetter, som en bruger måtte ønske, men hvis en bruger kigger på, hvilke værktøjer der er tilgængelige i laboratoriet og afdelingen, kan de få en bedre idé om, hvilke eksisterende pipetter der skal implementeres i et assay eller af hvilke pipetter de måske vil købe."
De funktioner, der er tilgængelige i dagens pipetter, rækker ud over selve enheden. Fremskridt inden for væskehåndtering har gjort det muligt for brugere nu at forbinde deres pipette til skyen. Med denne forbindelse kan en bruger downloade protokoller eller oprette brugerdefinerede. Pipetteringsdata kan endda fanges i skyen, hvilket er en måde at identificere eventuelle fejltrin og forbedre pipetteringsprocessen, især ved at spore den løbende nøjagtighed eller mangel på den.
Med det rigtige udstyr i hånden er den næste udfordring at få de rigtige trin.
Nøglen til succes
Med en luftfortrængningspipette øger de følgende trin sandsynligheden for nøjagtigt og gentagne gange at måle et specifikt volumen:
- Indstil volumen på pipetten.
- Tryk stemplet ned.
- Nedsænk spidsen til den korrekte dybde, som kan variere afhængigt af pipetten og spidsen, og lad stemplet stille og roligt gå til hvileposition.
- Vent cirka et sekund, indtil væsken løber ind itip.
- Sæt pipetten - holdt ved 10-45 grader - mod væggen af modtagekammeret, og tryk blødt stemplet ned til det første stop.
- Vent et sekund, og tryk derefter stemplet ned til det andet stop.
- Skub spidsen op ad karvæggen for at fjerne pipetten.
- Lad stemplet vende tilbage til hvilepositionen.
Indlægstid: 12. december 2022