Hvad er kryovialer?
Kryogene opbevaringshætteglaser små, lukkede og cylindriske beholdere designet til opbevaring og konservering af prøver ved ultralave temperaturer. Selvom disse hætteglas traditionelt er blevet lavet af glas, er de nu meget mere almindeligt fremstillet af polypropylen af bekvemmeligheds- og omkostningsmæssige årsager. Kryovialer er omhyggeligt designet til at modstå temperaturer så lave som -196 ℃ og til at rumme en lang række celletyper. Disse varierer fra diagnostiske stamceller, mikroorganismer, primære celler til etablerede cellelinjer. Ud over det kan der også være små flercellede organismer, der er lagret indenikryogene opbevaringshætteglas, samt nukleinsyre og proteiner, som skal opbevares ved kryogene opbevaringstemperaturniveauer.
Kryogene opbevaringshætteglas kommer i forskellige former, og at finde den korrekte type, der opfylder alle dine behov, vil sikre, at du bevarer prøvens integritet uden at betale for meget. Læs vores artikel for at lære mere om de vigtigste købsovervejelser, når du vælger den rigtige kryovial til din laboratorieapplikation.
Egenskaber ved kryogen hætteglas at overveje
Eksterne vs interne tråde
Folk træffer ofte dette valg baseret på personlige præferencer, men der er faktisk vigtige funktionelle forskelle at overveje mellem de to typer tråd.
Mange laboratorier vælger ofte hætteglas med indvendigt gevind for at minimere røropbevaringspladsen, så de passer bedre ind i frysebokse. På trods af dette kan du overveje, at den udvendigt gevindskårne mulighed er den bedre mulighed for dig. De anses for at have en lavere forureningsrisiko på grund af designet, der gør det endnu sværere for andet end prøven at komme ind i hætteglasset.
Udvendigt gevindskårne hætteglas foretrækkes generelt til genomiske applikationer, men begge muligheder anses for at være egnede til biobanking og andre applikationer med høj kapacitet.
En sidste ting at overveje ved gevindskæring - hvis dit laboratorium bruger automatisering, skal du muligvis overveje, hvilket gevind der kan bruges med instrumentgriberne.
Opbevaringsvolumen
Kryogene hætteglas er tilgængelige i en række størrelser for at dække de fleste behov, men for det meste varierer de mellem en kapacitet på 1 ml og 5 ml.
Nøglen er at sikre, at din kryovial ikke er overfyldt, og at der er ekstra plads til rådighed, hvis prøven svulmer, mens den fryser. I praksis betyder det, at laboratorier vælger 1 ml hætteglas, når de opbevarer prøver på 0,5 ml celler suspenderet i kryobeskyttelsesmiddel og 2,0 ml hætteglas til 1,0 ml prøve. Et andet tip til ikke at overfylde dine hætteglas er at få dig til at bruge cryovials med graduerede markeringer, som vil sikre, at du forhindrer enhver hævelse, der kan forårsage revner eller utæthed.
Skruelåg vs Flip Top
Den type top, du vælger, afhænger primært af, om du vil bruge flydende nitrogen eller ej. Hvis du er det, skal du bruge kryovialer med skruelåg. Dette sikrer, at de ikke kan springe op ved et uheld på grund af forkert håndtering eller temperaturændringer. Derudover giver skruelåg mulighed for lettere at hente fra kryogene kasser og mere effektiv opbevaring.
Men hvis du ikke bruger flydende nitrogen og har brug for en mere bekvem top, som er nemmere at åbne, så er en flip top den bedre mulighed. Dette vil spare dig for en masse tid, da det er meget nemmere at åbne, hvilket gør det særligt nyttigt i operationer med højere gennemløb og dem, der bruger batch-processer.
Segl Sikkerhed
Den bedste måde at sikre en sikker forsegling på er at sikre, at din kryoviale hætte og flaske begge er konstrueret af det samme materiale. Dette vil sikre, at de krymper og udvider sig i forening. Hvis de er fremstillet ved hjælp af forskellige materialer, vil de krympe og udvide sig med forskellige hastigheder, efterhånden som temperaturen ændres, hvilket fører til huller og potentiel lækage og deraf følgende forurening.
Nogle virksomheder tilbyder dobbelte skiver og flange for det højeste niveau af prøvesikkerhed på kryovialer med udvendigt gevind. O-ring kryovialer anses for at være de mest pålidelige til indvendigt gevindskårne kryovialer.
Glas vs plastik
For sikkerhed og bekvemmelighed bruger mange laboratorier nu plastik, normalt polypropylen, i stedet for varmeforseglelige glasampuller. Glasampuller anses nu for at være et forældet valg, da der under forseglingsprocessen kan udvikle sig usynlige lækager, som ved optøning efter opbevaring i flydende nitrogen kan få dem til at eksplodere. De er heller ikke så velegnede til moderne mærkningsteknikker, hvilket er nøglen til at sikre prøvesporbarhed.
Selvstående vs afrundede bunde
Kryogene hætteglas fås både som selvstående med stjerneformet bund eller som afrundet bund. Hvis du har brug for at placere dine hætteglas på en overflade, så sørg for at vælge den selvstående
Sporbarhed og prøvesporing
Dette område med kryogen opbevaring overses ofte, men prøvesporing og sporbarhed er et afgørende aspekt at overveje. Kryogene prøver kan opbevares i mange år, over hvilken tidsperiode personalet kan ændre sig, og uden korrekt vedligeholdte optegnelser kan de blive uidentificerbare.
Sørg for at vælge hætteglas, som gør prøveidentifikation så let som muligt. Ting du skal være opmærksom på inkluderer:
Store skriveområder til at registrere tilstrækkelige detaljer, så optegnelser kan findes, hvis et hætteglas er placeret på en forkert placering - normalt er celleidentitet, dato frosset og initialer på den ansvarlige person tilstrækkelige.
Stregkoder til at hjælpe med prøvestyring og sporingssystemer
Farvede kasketter
En note til fremtiden – ultrakuldebestandige chips er ved at blive udviklet, som, når de er monteret i individuelle kryovials, potentielt kan lagre en detaljeret termisk historie samt detaljeret batchinformation, testresultater og anden relevant kvalitetsdokumentation.
Ud over at tage hensyn til de forskellige specifikationer af hætteglas, der er tilgængelige, skal der også gøres nogle overvejelser om den tekniske proces med at opbevare kryovials i flydende nitrogen.
Opbevaringstemperatur
Der er adskillige opbevaringsmetoder til kryogen opbevaring af prøver, som hver fungerer ved en bestemt temperatur. Valgmuligheder og den temperatur, de opererer ved, omfatter:
Flydende fase LN2: opretholde en temperatur på -196 ℃
Dampfase LN2: er i stand til at fungere ved specifikke temperaturområder mellem -135°C og -190°C afhængigt af modellen.
Nitrogendampfrysere: -20°C til -150°C
Den type celler, der opbevares, og en forskers foretrukne opbevaringsmetode vil afgøre, hvilken af de tre tilgængelige muligheder dit laboratorium bruger.
Men på grund af de ekstremt lave temperaturer, der anvendes, vil ikke alle rør eller design være egnede eller sikre. Materialer kan blive ekstremt skøre ved ekstremt lave temperaturer. Brug af et hætteglas, der ikke er egnet til brug ved din valgte temperatur, kan få beholderen til at splintre eller revne under opbevaring eller optøning.
Tjek omhyggeligt producentens anbefalinger om korrekt brug, da nogle kryogene hætteglas er egnede til temperaturer så lave som -175°C, nogle -150°C andre kun 80°C.
Det er også værd at bemærke, at mange producenter angiver, at deres kryogene hætteglas ikke er egnede til nedsænkning i væskefasen. Hvis disse hætteglas opbevares i væskefasen, når de vender tilbage til stuetemperatur, kan disse hætteglas eller deres hætteforseglinger knuses på grund af en hurtig opbygning af tryk forårsaget af små lækager.
Hvis celler skal opbevares i flydende nitrogenfase, skal du overveje at opbevare celler i egnede kryogene hætteglas varmeforseglet i cryoflex-slanger eller at opbevare celler i glasampuller, der er hermetisk lukkede.
Indlægstid: 25. nov. 2022