Mikropipetten er nok det mest brugte værktøj i laboratoriet. De bruges af videnskabsmænd i en lang række sektorer, herunder den akademiske verden, hospitaler og retsmedicinske laboratorier samt udvikling af lægemidler og vacciner til at overføre præcise, meget små mængder væske
Selvom det kan være irriterende og frustrerende at få øje på luftbobler i engangspipettespidsen, hvis de ikke bliver opdaget eller ignoreret, kan det have en enorm indflydelse på resultaternes pålidelighed og reproducerbarhed.
Den gode nyhed er, at der er nogle enkle foranstaltninger, du kan tage for at forhindre luftbobler og forbedre laboratoriets effektivitet, operatørtilfredshed samt nøjagtigheden og præcisionen af resultater.
Nedenfor undersøger vi konsekvensen af at få en luftboble i din pipettespids, og hvad du så skal gøre.
Konsekvensen af bobler iPipettespids
Selv hvis du bruger de mest nøjagtige, bedst vedligeholdte, servicerede og kalibrerede pipetter, kan pålideligheden af dine resultater blive påvirket af laboratoriefejl. Når der kommer bobler ind itipdet kan have flere udfald.
● Når brugeren opdager luftboblen, skal de bruge tid på at dispensere den opsugede væske korrekt, skubbe spidsen ud og starte processen igen.
● Uopdagede luftbobler kan resultere i lav volumenoverførsel og dermed ændre koncentrationen af reaktionsblandinger, hvilket fører til mislykkede eksperimenter og tvivlsomme eller upålidelige resultater.
Disse udfald kan have flere konsekvenser (1).
● Nedsat laboratorieeffektivitet – Tests og analyser skal gentages, hvilket medfører arbejds- og materialeomkostninger, som kan være ret betydelige.
● Tvivlsomme eller forkerte testresultater – Hvis ukorrekte resultater frigives, kan der være mere alvorlige konsekvenser, herunder fejldiagnosticering og dårlige patientresultater.
● Tilbagetrækning af manuskripter fra journaler – Hvis peers undlader at kopiere dine resultater på grund af luftbobler, der forårsager unøjagtige resultater, kan papirer blive trukket tilbage.
Bedste praksis for at forhindre luftbobler
I de fleste tilfælde er luftbobler i pipettespidserne forårsaget af operatørfejl. Dårlig teknik på grund af utilstrækkelig træning eller træthed er normalt det underliggende problem.
Pipettering er en dygtig operation, som kræver 110 % opmærksomhed, ordentlig træning og øvelse for at opnå ensartede og nøjagtige resultater.
Selvom der er flere ting, du kan gøre for at reducere generelle pipetteringsfejl, har vi nedenfor fremhævet nogle bedste praksisser, der kan bruges til at undgå luftbobler ipipettespidser.
Forbedre brugerteknik
Pipetter langsomt
Hvis stemplet slippes for hurtigt under aspiration, kan der indføres luftbobler i spidsen. Dette kan især være problematisk ved overførsel af tyktflydende væsker. En lignende effekt kan opstå, hvis stemplet slippes for hurtigt efter dispensering.
For at undgå luftbobler under aspiration, skal du sørge for at betjene stemplet på manuelle pipetter på en jævn og regelmæssig måde med en konstant kraft.
Brug den korrekte nedsænkningsdybde
Undladelse af at nedsænke pipettespidsen dybt nok under menisken i væskereservoiret kan resultere i aspiration af luft og dermed bobledannelse.
Men hvis spidsen nedsænkes for dybt, kan der opsuge mere væske på grund af øget tryk, eller der kan forekomme dråber på ydersiden af spidsen, så det er vigtigt at nedsænkepipettespidstil den rigtige dybde.
Den anbefalede dybde varierer mellem pipettestørrelse, type og fabrikat. Selvom fabrikantens anbefalinger skal følges, er her en generel vejledning fra National Physical Laboratory.
Guide til dybden af spidsnedsænkning
Pipettevolumen (µl) og nedsænkningsdybde (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
For-vådPipette tips
Ved pipettering af volumener større end 10 µlpipettespidserer sædvanligvis forfugtet ved at fylde dem flere gange med den væske, der dispenseres, og udvise den til spilde for at forbedre nøjagtigheden.
Undladelse af at forfugte dem kan resultere i luftbobler, især ved brug af tyktflydende eller hydrofobe væsker. For at undgå luftbobler skal du sørge for at våde spidserne på forhånd, når du pipetterer volumen større end 10 µl.
Brug omvendte pipetteringsteknikker, hvis det er relevant
Viskøse stoffer: Et almindeligt problem ved pipettering af tyktflydende stoffer såsom protein- eller nukleinsyreopløsninger, glycerol og Tween 20/40/60/80 er den hyppige dannelse af bobler, når den fremadrettede pipeteringsteknik anvendes.
Langsom pipettering, ved at bruge den omvendte pipeteringsteknik reducerer risikoen for bobledannelse ved overførsel af viskøse opløsninger.
ELISA teknik
Omvendt pipettering anbefales også, når små mængder pipetteres ind96 brønds mikrotestpladertil ELISA-teknikker. Når luftbobler trækkes ind i pipetten eller dispenseres i brønde ved tilsætning af reagenser, kan det påvirke de optiske tæthedsværdier og resultaterne. Omvendt pipettering anbefales for at minimere eller eliminere dette problem.
Brug ergonomiske pipetter
Pipetter i gammel stil, der ikke er designet med ergonomi for øje, kræver mere fysisk indsats, du bliver træt, og din pipetteteknik bliver sjusket og dårlig. Fejl nævnt ovenfor, såsom hurtig udløsning af stemplet, kan forekomme hyppigere.
Ved at investere i en mere ergonomisk løsning vil du være i stand til at opretholde fremragende teknik og forhindre dannelse af luftbobler på grund af dårlig teknik.
Tag dig tid til at træne personalet
Regelmæssig træning og vurdering af personalet i pipetteringsmetoder kan sikre, at operatørfejl og luftbobledannelse reduceres.
Overvej flere automatiserede løsninger
Som nævnt ovenfor er de fleste luftbobler forårsaget af operatøren. Det kan være muligt at reducere operatørfejl og komfort ved at bruge elektroniske pipetter eller en fleksibel væskehåndteringsplatform som f.eksAgilent Bravo væskehåndteringsrobot.
Brug god kvalitetPipette tips
Mikropipetter købes normalt med omhu, men ofte tænkes der kun lidt over kvaliteten af engangspipettespidsen. På grund af den indflydelse, som en spids har på pipetteringsresultaterne, kræver standardISO 8655 en ekstra kalibrering, hvis pipetter og spidser fra forskellige producenter anvendes.
Dette kan skyldes, at mange billige spidser kan se fine ud i starten, men når du studerer dem omhyggeligt, kan de have blink, fremspring, ridser og luftbobler eller være bøjet eller indeholde urenheder.
Køb af god kvalitet spidser lavet af højkvalitets polypropylen kan reducere forekomsten af luftbobler.
At konkludere
At få luftbobler i din pipettespids har en indvirkning på laboratoriets effektivitet samt unøjagtighed og unøjagtighed af resultater. Vi har bemærket flere ting, du kan gøre for at undgå, at luftbobler kommer ind ipipettespids.
Men hvis kvaliteten er dårligpipettespidserfår luftbobler til at trænge ind i din pipettespids, vil du blive glad for at vide, at vores universelle pasformpipettespidserer lavet til de højeste standarder og er lavet med førsteklasses ren polypropylen.
Suzhou Ace Biomedicinsk selskabproducere højkvalitets 10,20,50,100,200,300,1000 og 1250 µL volumener universelle pipettespidser, 96 spidser/stativ. Enestående holdbarhed – alle ACE-spidsstativer lever op til kravene til brug med flerkanalspipetter. Steril, filter, RNase-/DNase-fri og ikke-pyrogen.
Velkommen til at spørge os for flere detaljer.
Indlægstid: 29. december 2022